肺缺陷的体细胞核移植牛TTF-1 mRNA的低表达与启动子区CpG的甲基化无关

通过体细胞核移植技术获得克隆哺乳动物的种类在不断增加,但成功率仍然较低,常表现为围产期的高死亡率.其中,肺发育异常是最常见的发育缺陷之一.哺乳动物肺器官的发生受一系列蛋白因子的调控,其中隶属于同源结构域转录因子家族的TTF-1参与肺的发生和出生后功能的维持,是一种重要的转录因子,其表达水平的异常很可能与肺的发育缺陷有关.SCNT胚胎异常的甲基化可能影响发育关键基因的表达.本研究克隆了牛TTF-1基因,包括启动子区(921bp)、外显子1(373bp)、内含子1(932bp)和外显子2的一部分(273bp)在内约2.5kb的核苷酸序列,发现3头肺发育有缺陷的SCNT牛TTF-1mRNA的表达量均显著低于肺发育正常的SCNT牛及对照牛(P<0.05).对表达量最低的个体和对照牛肺组织TTF-1基因启动子区63个CpG位点的甲基化状态进行了分析,发现在大多数位点上,二者均处于去甲基化状态,甲基化百分比差异不显著(P>0.05),说明肺发育缺陷的体细胞核移植牛TTF-1mRNA的低表达与启动子区CpG的甲基化无关.