引进良种肉牛冻胚规模移植技术研究

从加拿大引进良种肉牛利木赞、西门塔尔、盖洛威冻胚 ,移植受体 4 89头次。得到以下研究结果 :12 0d直检妊娠 2 4 9头 ( 50 9% ) ,产犊 2 2 1头 ,产程死亡 13头 ,产犊成活率 94 1%。应用氯前列烯醇同期发情 ,累计处理受体牛 93 0头次 ,880头次出现发情 ( 94 6% ) ,84 7头次达到同期发情 ,72h内同期率为 91 1%。经产黄牛移植成功率 4 9 2 % ( 2 11/ 42 9) ;育成荷斯坦牛移植成功率63 3 % ( 3 8/ 60 )。首批选中的受体移植成功率为 60 1% ( 158/ 2 63 ) ;首批移植落选牛和移植后未孕牛再进行选择 ,移植成功率 3 6 4 % ( 64 / 176) ;而对类似情况的受体牛经医疗护理和加强饲养管理 ,两个月后再进行第三批移植 ,成功率为 54 0 % ( 2 7/ 50 )。A级黄体受体牛移植成功率 54 7% ( 4 1/75) ;B级黄体受体牛移植成功率 4 4 7% ( 115/ 2 57) ,统计差异不显著 (P >0 0 5)。桑椹胚 ( 155枚 )在周期的第 6d、6 5d和 7d的移植成功率分别为 55 0 % ( 3 3 / 60 )、51 5% ( 3 4 / 66)和 51 7% ( 15/2 9) ,统计分析 6d与 6 5d、7d差异不显著 (P <0 0 5) ;而囊胚 ( 158枚 )在周期的 6d、6 5d和 7d的移植成功率分别为 4 7 2 % ( 2 5/ 53 )、54 8% ( 17/ 3 1)和 75 7% ( 56/ 74 ) ,6 5d与 7d差异显著 (P <0 0 5) ,6d?

芹菜功能性成分及生物活性研究进展

近年来,人们对健康的意识增强,功能性产品的消费也日益增长。芹菜作为一种药食两用的原料,具有降压、抗动脉硬化等功效。芹菜的功效价值有待于进一步开发。基于前人的研究结果,对芹菜的营养价值、目前研究的功能性成分和相关生物活性进行综述,并汇总目前以芹菜为原料制成的产品,总体来看,芹菜是一种具有开发价值和应用潜力的原材料。本研究旨在为芹菜相关产品的进一步深加工和系列高附加值产品的开发提供借鉴和参考。

利用多重PCR技术检测羊肉中掺杂狐狸肉的方法研究

本研究根据山羊、绵羊和狐狸线粒体16S rRNA基因间序列差异,设计特异性引物,其扩增片段大小分别为401、450 bp和300 bp,从而可在一个PCR反应中同时鉴别山羊、绵羊和狐狸三种源性成分,检测灵敏度高。

盐碱地油莎豆机械化播种收获技术与装备研究进展

油莎豆适应性强、抗逆性高、耐盐碱、耐贫瘠、抗旱、耐涝的特点使其成为盐碱地改良和农业可持续发展的优良选择。油莎豆块茎生于地下,其机械化播种、收获方式成为该作物规模化推广种植及实现全产业链开发的关键。本文介绍了油莎豆的播种、收获方式方法,重点对目前油莎豆播种、收获机械研究开发情况进行了系统阐述,并对盐碱地油莎豆推广种植及产业发展做了展望。

油莎豆引种试验及绿色高效栽培技术研究进展

油莎豆是一种适应性好、抗逆性强、耐病虫害、经济价值高的集牧、饲、粮、油于一体的高效经济作物,具有广阔的开发应用前景和经济价值。本文从油莎豆种质资源收集筛选、引种试种、选地整地、播种、田间管理、病虫害绿色防控、收获等方面综述其研究进展,并在简要分析油莎豆高产栽培和示范推广中存在问题的基础上对其未来研究方向作了展望。

酸性土壤花生增施钙肥高产栽培技术研究

花生是需钙量大的作物。沿海旱砂地酸性土壤和因化肥过量施用造成的酸化土壤,由于酸度较大使土壤中钙素流失严重,严重影响花生籽粒的发育和产量的形成。本研究阐明了钙离子信号途径响应逆境胁迫的分子机制和调控荚果发育的分子机理,探明了酸性土壤增施钙肥花生增产原因,明确了钙肥与有机肥和微生物肥配施可显著提高酸性土壤交换性钙含量。在多年钙素基础理论和田间钙肥施用技术研究的基础上,创建了酸性土壤花生增施钙肥高产栽培技术,显著提高了酸性土壤花生产量,666.7m2最高产达到675.5 kg。

海藻肥在现代农业生产中的研究进展

海藻是海洋中储量最大且可再生的生物质资源,海藻肥则是与海藻相关的重要产品类型。为充分认知海藻肥在现代农业中发挥的作用以及发展前景,本文就其主要原料、功能成分、生产工艺以及近年来海藻肥的常见产品类型和在农业生产中的应用现状进行综述,分析探讨海藻肥发挥作用的机理机制、当前的应用瓶颈和开发前景,以期为进一步研发和推广新型高效海藻肥提供参考。

复合微生物固态发酵整粒菜籽的研究

为研究复合微生物固态发酵对整粒菜籽霉变、营养成分、氨基酸组成等的影响,利用米曲霉和酵母菌对整粒菜籽进行固态有氧发酵,利用乳酸菌和酵母菌进行厌氧发酵,然后在发酵第7、14、21、28天测定发酵产物霉变比例、p H值、常规营养成分以及氨基酸组成。结果表明:米曲霉和酵母菌固态有氧发酵菜籽在发酵期间霉变比例显著降低。发酵第7天,发酵组粗蛋白质、粗脂肪、钙含量比对照组分别提高了7.89%、3.76%、20.45%,且比发酵前提高了6.59%、6.34%、15.22%,能量也比发酵前提高了19.82%,必需氨基酸及总氨基酸含量比对照组分别提高了12.89%、7.72%,比发酵前分别提高了13.80%、9.28%。乳酸菌和酵母菌复合固态厌氧发酵菜籽在发酵期间有效降低霉变比例和p H值,发酵组干物质、粗蛋白质、粗脂肪比发酵前提高了1.86%、8.69%、10.96%。酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维比对照组分别降低了4.59%、6.99%,发酵组必需氨基酸及总氨基酸含量比对照组分别提高了11.68%、8.72%,且比发酵前提高了12.58%、10.13%。由此可知,米曲霉和酵母菌复合固态有氧发酵整粒菜籽及乳酸菌和酵母菌复合固态厌氧发酵整粒菜籽随着发酵时间的延长均能通过降低霉变比例,提高粗蛋白质、粗脂肪等营养成分含量,提高必需氨基酸及总氨基酸含量,达到保存饲料及改善饲料品质的目的。

波尔山羊胚胎移植技术研究

选择 1～ 2岁的波尔山羊为供体 ,在发情周期第 9～ 14天 (发情的当天为 0天 )的任何一天连续 3天每天上、下午肌肉注射FSH。在开始注射FSH的第二天上、下午 ,同时肌肉注射氯前列烯醇总量为 1 5ml,进行超排处理。经处理的母羊发情后配种 2～ 3次。在第一次配种后的第 6～ 6 5天手术冲胚、手术移植。 1999年 11～ 12月超排供体 15只 ,冲出胚胎 111枚 ,其中可用胚胎 10 4枚 ,变性胚 3枚 ,未受精卵 4枚。将 10 4枚胚胎移植给 10 3只受体羊 ,结果有 5 5只羊妊娠 (3个情期不返情 ) ,妊娠率为 5 3 4%。

家兔细胞核移植技术研究

以家兔 1 6～ 3 2细胞期胚胎卵裂球为核供体 ,显微注射到去核卵母细胞卵周隙中 ,共制作完成 2 2 9枚重组胚 ,2次电融合后融合率达到 76.8%。重组胚与兔胚胎成纤维细胞共同培养 ,卵裂率为 65 .7% (2 3 /3 5 ) ,桑囊率达到 2 2 .9% (8/ 3 5 ) ,均显著高于 (P<0 .0 1 )微滴直接培养结果 (4 3 .3 % ,1 3 / 3 0 ;1 6.7% ,5 / 3 0 )。将1 1 1枚重组胚手术移植到 9只同期发情的受体母兔输卵管中 ,2只妊娠 ,其中 1只完成足月胚胎发育产出克隆仔兔 2只。

复合微生物固态发酵整粒棉籽的研究

试验旨在研究微生物复合固态发酵对整粒棉籽霉变、营养成分、氨基酸组成及黄曲霉毒素B1含量的影响。利用米曲霉和马克思克鲁维酵母菌对整粒棉籽进行复合固态有氧发酵,然后在发酵第7、14 d测定发酵产物霉变比例、pH值、常规营养成分、氨基酸含量及黄曲霉毒素B1含量的变化。结果表明,米曲霉和酵母菌复合固态有氧发酵整粒棉籽在发酵第7 d和第14 d有效降低棉籽霉变比例,比对照组分别降低了60%和50%。发酵第7 d发酵组和对照组pH值没有显著差异,但在第14 d发酵组pH值比对照组显著提高。发酵第7 d发酵组粗蛋白质、粗脂肪和能量比对照组分别提高了6.2%、5.6%和25.6%,必需氨基酸及总氨基酸含量比对照组分别提高了3.55%和8.14%。在发酵第7 d和第14 d检测对照组黄曲霉毒素含量高达340μg/kg和354μg/kg,而发酵组均未检出。由此可知,米曲霉和酵母菌复合固态有氧发酵整粒棉籽随着发酵时间的延长通过降低霉变比例,提高粗蛋白质、粗脂肪等营养成分含量、提高必需氨基酸及总氨基酸含量以及降低黄曲霉毒素B1的含量,从而达到保存饲料以及改善饲料品质的目的。

农业昆虫气味受体功能研究进展

昆虫主要依靠嗅觉系统寻找食物、发现配偶、控制交配、选择产卵地、逃避天敌等,因此嗅觉系统对昆虫的繁殖和生存至关重要。气味受体(odorant receptor,OR)是嗅觉系统中的关键成分之一,可被信息化合物激活引发特定行为产生。随着测序技术的发展,大量的农业昆虫的基因组和转录组被测序,从测序数据中分析获得了它们的OR家族。现在OR功能研究经常用到外源表达系统和CRISPR/Cas9系统。外源表达系统结合记录系统可用于目标OR表达和配体筛选,CRISPR/Cas9系统可从昆虫染色体上敲除目标OR基因,进而利用电生理技术和行为学实验研究其功能。本文系统总结了鳞翅目、直翅目、半翅目、双翅目、膜翅目和鞘翅目6个目30个种的农业昆虫OR的气味分子反应谱及功能,尤其是鳞翅目农业昆虫。农业昆虫的性信息素往往是由雌虫产生的两种或两种以上成分按一定比例组成的混合物,包括在种间生殖隔离中起作用的行为拮抗剂。每个种因此具有多个性信息素的受体,共同感受这些信息素信息,调控种内和种间性行为。有些OR可调谐至主要针对植物挥发物,包括花香气味,在寄主植物选择和雌虫选择产卵地等行为中起作用。聚集信息素受体可特异地被聚集信息素激活,引起聚集行为;报警信息素受体可特异地被报警信息素激活,引起排斥行为。研究农业昆虫OR的气味分子反应谱和功能可为开发在害虫防控中应用的性诱剂、食诱剂、拒食剂、聚集信息素等奠定理论基础。最后我们对未来的主要研究方向提出了以下建议:(1)开发新的外源OR表达系统;(2)研究在雌虫中特异调谐至针对雄虫产生的性信息素的性信息素受体的功能;(3)探讨OR与气味分子之间特异性相互作用的分子机制。

利用基因枪技术转化小麦、玉米的研究

采用国产JQ－700型基因枪，以含Bt基因的质粒pHB101为供体，轰击小麦、玉米愈伤组织，轰击后的愈伤组织经潮霉素抗性筛选后，获得32株小麦再生苗，14株玉米抗性植株。以a－32P－dCTP标记的PHB101质粒为探针，对小麦抗性植株进行点杂交印渍检测，发现有15株小苗显示阳性信号，且其中有一株的后代对田间蚜虫及锈病的抗性较好。玉米再生植株种植田间后在其后代中选出一抗玉米螟的稳定株系，尚需进一步的分子验证和饲虫实验。

山东省牛胚胎移植技术规程

自１９８５年以来，我们对８１头荷斯坦奶牛和１９４头鲁西黄牛进行超数排卵，各批次每头平均获得可用胚胎５～６枚。移植效果为：奶牛鲜胚移植成功率５５．８％，奶牛冻胚移植成功率５６．８％，奶牛鲜胚分割移植成功率４６．６％，鲁西黄牛冻胚移植成功率５６．５％，引...

利用PCR技术体外扩增牛Y染色体特异DNA序列的研究

本实验建立了用ＰＣＲ（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术体外扩增牛Ｙ染色体特异ＤＮＡ序列的方法。根据牛的ＳＲＹ序列设计一对引物，两条引物均为２３ｂｐ，对公牛１９４ｂｐ序列进行体外扩增。从屠宰的公、母牛肝和血液中提取ＤＮＡ，用作ＰＣＲ模板，ＰＣＲ仪内进行扩增。结果表明公牛个体样品显示清晰可见的特异ＤＮＡ扩增带，而母牛个体样品无扩增片段出现，与预期的结果完全符合。

玉米锌指蛋白基因ZmAN11的序列分析及在非生物胁迫下的表达研究

对玉米锌指蛋白基因Zm AN11进行序列分析,结果表明Zm AN11开放阅读框长度为510 bp,编码一个含169个氨基酸的蛋白,预测分子量为18.06 k D,等电点是8.48。Zm AN11与水稻Osi SAP8同源性最高。在非生物胁迫下的表达研究发现,在盐、冷和热激胁迫下,Zm AN11表达量上调;而在干旱胁迫下,Zm AN11表达量下调。器官特异性分析发现,该基因在玉米叶片及胚芽鞘中表达量较高。Zm AN11基因的序列分析及表达研究为进一步研究其生物学功能和应用奠定了基础。

不同油莎豆品种在山东种植的产量与品质研究

油莎豆是一种特色油料作物,具有抗逆性强、产量高、营养品质好的特点。本团队从多个省份引进6个油莎豆品种,研究其在山东的产量和品质表现。结果表明:6个品种都能在山东正常生长发育,其中吉林大长粒和河北大圆粒两个品种产量较高,且块茎较大易于收获。大粒品种吉林大长粒的平均粒重达到1.09 g,产量达到13713.3kg/hm^(2)。云南小长粒的含油量最高,达到24.9%,其含糖量、产量等方面也表现良好。因此,河北大圆粒、吉林大长粒和云南小长粒均有推广种植价值。本研究可为山东地区的油莎豆栽培和品种培育提供参考。

CRISPR/Cas9基因编辑技术研究进展

CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9)是近年发现的继ZFNs和TALENs两种基因编辑技术之后的一种新型基因组定点编辑技术。本研究分别从CRISPR/Cas9系统的结构、类别、作用机制、相关应用以及存在问题等方面进行综述,旨在为相关领域研究提供参考。

强化豆科作物在北方现代农业结构中的作用

针对我国日趋严峻的粮油安全形势,近年来《中央一号文件》对农业种植结构进行了全面的、科学的调整:“生产上重点是保口粮,油料重点发展油菜和花生;东北地区扩种大豆杂粮薯类和饲草作物,构建合理轮作制度;黄淮海地区重点是扩种花生、大豆和饲草作物”。以豆科作物为主体的北方现代农业种植制度对保障粮油安全生产、饲草的供应以及农民增收具有重大意义。首先,从生产布局看,北方区域(东北、西北及黄淮海)是油料作物大豆、花生、杂豆以及饲草作物苜蓿的主要产区。其中,大豆种植面积和产量分别约占全国68%和66%、花生分别占全国的63%和70%。其次,从豆科作物的生态效益来看,可实现用地与养地相结合、充分利用生态位优势、提高资源利用率。目前,北方豆科作物种植模式主要有:单作、间套作(玉米‖大豆、花生,玉米‖蚕豆、玉米‖豌豆等)、轮作(大豆-冬小麦,夏花生-冬小麦,绿豆-冬小麦等)等生态友好型耕作制度。其中,玉米‖大豆、花生宽幅间作是农业部在黄淮海区域主要推广模式,具有经济、社会、生态效益,能有效缓解“粮油争地、人畜争粮”矛盾,大幅提高粮油综合生产能力。通过加大国家农业政策调控,培育和推广大豆和花生耐阴、抗旱、高产及玉米矮秆、抗旱、高产新品种,提高农业全程机械化水平和科技服务效率等措施,进一步提高农民生产积极性,强化豆科作物在北方现代农业结构中的比重和作用。

玉米锌指蛋白基因ZmAN14过表达转基因烟草对非生物胁迫的响应

【目的】Zm AN14是玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族成员,该家族在水稻中广泛参与非生物胁迫应答。通过分析玉米旱21(H21)及转Zm AN14烟草在非生物胁迫下的表达情况,为玉米Zm AN14及其家族的功能和分子机制的全面解析提供新信息。【方法】通过对Zm AN14进行序列分析,发现其属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。以玉米自交系H21为研究材料,在三叶期时对其进行非生物胁迫和ABA诱导处理,0、1、3、6、12和24 h时取整株样品,同时在玉米不同生长期取根、茎、叶、胚芽鞘、雌蕊、雄蕊、花丝、苞叶等不同组织样品,利用实时荧光定量PCR方法对Zm AN14的组织表达谱和非生物胁迫及ABA诱导的表达谱进行分析,并结合启动子区顺式作用元件分布情况进行对比分析。将Zm AN14编码序列克隆至GFP表达载体p MDC85,利用亚细胞定位技术验证Zm AN14在胞内的定位情况。将Zm AN14克隆至GAL4 DNA结合结构域载体,并转化酵母,将其涂布在缺陷培养基上观察酵母生长情况,分析其有无转录激活活性。将Zm AN14编码区与植物表达载体p1300-221连接构建超表达载体,并将其转入烟草,选择Zm AN14 m RNA表达量高的T2纯合体株系进行盐、干旱胁迫和ABA诱导,观察其对非生物胁迫的应答。【结果】序列分析表明,Zm AN14开放阅读框(ORF)为516 bp,编码一个171个氨基酸的蛋白,预测分子量为18.3 k D,等电点是8.28。Zm AN14具有A20和AN1结构域,属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。实时定量荧光PCR结果表明Zm AN14在叶中大量表达,受Na Cl、干旱胁迫和ABA诱导上调。Zm AN14与GFP融合蛋白定位于细胞质和细胞核中,定位结果与ZNF216和Zm AN13类似,而Zm AN14本身并没有核定位信号,暗示Zm AN14与其他蛋白结合进入细胞核中发挥其生物学功能。Zm AN14在酵母中表达时不能在酵母缺陷培养基(SD/-Leu-His medium)上生长,因此,未发现其具有转录激活活性。将Zm AN14在烟草中过表达会增加烟草苗期对盐和干旱的抗性。【结论】Zm AN14属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。Zm AN14主要在叶中表达,受非生物胁迫和ABA诱导,在烟草中过表达可以提高烟草苗期对盐和干旱的抗性。Zm AN14可能通过与其他蛋白的互作行使功能。相比较于其他的A20/AN1型锌指蛋白,在转基因烟草中,Zm AN14也参与非生物胁迫应答。Zm AN14与Zm AN13具有高同源性,但在盐和干旱胁迫时,二者却具有向反方向调控的功能。