siRNA抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞株VEGF基因表达的实验研究

目的研究siRNA(small interfering,RNA)对乳腺癌细胞SK-BR-3的VEGF基因表达的抑制作用,为RNAi技术在肿瘤生物治疗中的应用提供实验基础。方法体外合成一条针对VEGF基因的siRNA,使用脂质体转染的方法导入细胞,观察转染后乳腺癌细胞SK-BR-3的增殖变化,MTT法检测细胞存活率,RT-PCR检测转染后VEGFmRNA表达水平的变化,ELISA检测蛋白表达的下降效果。结果所设计的siRNA能有效抑制乳腺癌细胞的生长;降低了VEGFmRNA的表达;蛋白表达水平也显著降低。作为阴性对照的错义序列组siRNA则没有这种效果,不起作用。结论 siRNA可以有效抑制细胞株SK-BR-3中VEGF的表达,从而抑制细胞生长。应用RNA干扰技术可以有效抑制肿瘤细胞的增殖。

支气管哮喘患者血清肿瘤坏死因子-α和透明质酸及羟脯氨酸水平表达及意义

目的探讨支气管哮喘患者血清肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-a,TNF-α)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)及羟脯氨酸(hydroxyproline,HP)水平变化,分析其与肺功能的相关性。方法支气管哮喘患者35例,处于发作期21例为发作期组,处于缓解期14例为缓解期组,同期11例体检健康者为对照组,测定3组血清TNF-α、HA、HP水平及用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、第1秒钟用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV_1)、最大呼气峰值流速(peak expiratory flow,PEF)、最大呼气中期流速(maximal mid-expiratory flow,MMEF_(75/25))、FEV_1/FVC;分析TNF-α、HA及HP与肺功能指标的相关性。结果发作期组血清TNF-α[(1.49±0.40)μg/L]、HA[(92.69±7.04)μg/L]、HP[(1.90±0.21)mg/L]水平高于对照组[(0.99±0.08)μg/L、(34.84±9.61)μg/L、(1.41±0.78)mg/L](P<0.05);缓解期组血清TNF-α水平[(1.26±0.22)μg/L]高于对照组(P<0.05),HA[(38.99±9.56)μg/L]、HP[(1.96±0.61)mg/L]水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);发作期组血清TNF-α、HA水平高于缓解期组(P<0.05);发作期组FVC[(2.732±0.914)L]、FEV_1[(1.428±0.301)L]、FEV_1/FVC[(50.623±17.537)%]、PEF[(129.851±5.346)L/min]、MMEF_(75/25)[(0.359±0.090)L/s]均低于对照组[(3.216±0.869)L、(2.496±0.459)L、(59.796±16.438)%、(557.544±7.101)L/min、(2.355±0.353)L/s](P<0.05);缓解期组FVC[(3.314±0.589)L]高于对照组,FEV_1[(1.888±0.319)L]、PEF[(506.256±15.908)L/min]、MMEF_(75/25)[(0.603±0.095)L/s]低于对照组(P<0.05),FEV_1/FVC[(57.909±9.653)%]与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05);发作期组FVC、FEV_1、PEF、MMEF_(75/25)低于缓解期组(P<0.05);Pearson相关分析结果显示,FVC、FEV_1、PEF、MMEF_(75/25)与TNF-α、HA、HP均呈负相关(P<0.01),FEV_1/FVC与HA、HP呈负相关(P<0.01),与TNF-α无相关性(P>0.05)。结论 TNF-α、HA、HP对评估哮喘气道炎症的发生及持续有重要价值。