空肠弯曲菌PEB1 DNA和PEB1蛋白联合免疫小鼠的效果评价

目的初步检测抗空肠弯曲菌感染外膜黏附蛋白(PEB1)核酸疫苗与蛋白疫苗联合免疫诱导小鼠免疫应答水平。方法通过灌胃免疫的方法,将制备的核酸疫苗pcDNA3.1(-)-PEB1及蛋白疫苗PEB1采用核酸初次免疫-蛋白加强免疫及分别单独免疫的方法免疫雌性BALB/c小鼠,以PBS及空质粒pcDNA3.1(-)对照,检测各组小鼠体液免疫应答及细胞免疫应答水平。末次免疫后第28天,对各组小鼠灌胃攻击空肠弯曲菌,评价疫苗保护率。结果免疫后第56天,核酸蛋白联合免疫组小鼠脾淋巴细胞刺激指数(SI)为2.625±0.275,脾细胞培养上清中IFN-γ含量为(258.92±13.472)pg/mL。血清IgG抗体滴度为(2.507±0.124)μg/mL,胃和小肠黏膜冲洗液sIgA抗体滴度为(80.351±5.769)ng/mL,脾细胞培养上清中IL-4(377.47±14.560)pg/mL水平均明显高于各对照组(P<0.05)。小鼠攻击试验显示:核酸蛋白免疫组的疫苗保护率为91.53%。结论PEB1核酸蛋白联合免疫组诱导的免疫应答水平和疫苗保护率高于单独核酸疫苗免疫组和单独蛋白疫苗免疫组。

空肠弯曲菌重组蛋白微球疫苗制备及其免疫原性的分析

目的为增强多肽蛋白类药物的免疫效果,制备空肠弯曲菌外膜蛋白PEB1与大肠埃希菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合表达的重组PEB1-LTB蛋白聚丙烯酸树脂微球,分析免疫Balb/c小鼠体内体液免疫应答及细胞免疫应答水平。方法乳剂—溶剂挥发法制备微球,测量微球粒径、包封率和体外释放度。雌性Balb/c小鼠随机分为4组,于第0、14、30天各免疫1次,末次免疫14 d后,检测各组血清特异性IgG、IgA、黏膜冲洗液sIgA水平及脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-4含量。结果制备得到平均粒径在(47.6±10.2)μm的聚丙烯酸树脂微球,包封率为79.87%。微球可耐受胃酸的破坏,在模拟肠液中的释放度4 h后达95.27%。免疫后特异性IgG、IgA、sIgA及IFN-γ、IL-4均明显高于对照组(P<0.05)。结论本研究制备的重组PEB1-LTB蛋白聚丙烯酸树脂微球通过口服免疫Balb/c小鼠可以有效的提高其免疫应答。