Ⅲ度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体皮移植对创面愈合的影响

目的 探讨对 度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面 ,采用自体皮移植修复的机制 ,并评价其疗效。方法 采用肉眼、病理组织学、免疫组织化学、电镜和流式细胞术 ,动态观察成年 系小型猪 度烧伤后肉芽切除断层皮下组织创面自体植皮术 (A组 )后 ,移植皮片活性与结构 ,移植床肉芽组织、胶原纤维、微血管、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)蛋白表达和成纤维细胞超微结构变化 ,并与 度烧伤后传统的肉芽刮除纤维板创面自体植皮术 (B组 )进行比较 ,另设对照组 ,皮肤仅剃毛 (C组 )。 结果 术后 3天 ,移植皮片成活 ,A组较 B组皮片损伤轻、皮肤细胞增殖指数高、移植床血管内皮细胞及肉芽组织增生 ,b FGF表达明显。5天 ,两组血管内皮细胞及肉芽组织增殖旺盛 ,成纤维细胞呈蛋白合成旺盛和功能活跃象 ,新生胶原纤维出现 ,但 B组增殖更加明显。 7～ 14天 ,A组表皮结构及真皮毛细血管密度逐渐恢复正常 ,移植床肉芽组织逐渐成熟为纤维结缔组织 ,而 B组则延后 2天左右。 2 1天后 ,A组愈合创面病理改变轻于 B组。 30～ 6 0天 ,A组创面收缩及改容程度明显轻于 B组 ,且触之较软、移动度尚可。 结论

猪无细胞真皮基质在体移植后的稳定性

目的:采用一步法将组织工程的支架材料猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植,动态观察猪无细胞真皮基质在体移植后的稳定性。方法:动物实验于2001-01/2002-03在上海市烧伤研究所完成,指标检测在上海第二医科大学细胞生物学教研室完成。以清洁级雄性SD大鼠90只为动物模型,在其背部造成4cm×5cm的全层皮肤缺损。取模型大鼠84只随机分为薄自体皮移植组和猪无细胞真皮基质+薄自体皮移植组两组,每组各42只。复合皮移植组采用一步法将猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植,在创面上先移植猪无细胞真皮基质,然后立即在无细胞真皮基质上移植薄自体皮片,缝合固定后覆盖凡士林纱布及干纱布,环形包扎。薄自体皮移植组直接将薄自体皮移植在创面上,然后固定包扎。分别于移植1,2,3,4,8,12,16周取标本,通过大体观察和组织学观察,动态观察猪无细胞真皮基质移植后创面修复效果、皮片移植成活率及猪无细胞真皮基质的稳定性和可降解性。皮片成活率=犤植皮(移片总面积-皮片坏死面积)/植皮片总面积犦×100%。另取6只大鼠进行移复合皮移植,其中3只观察至移植后24周,另外3只观察至移植后32周,分别取全层皮肤标本。结果:实验动物SD大鼠共90只,全部进入结果分析。①无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植2周,皮片成活良好,与薄自体皮移植组比较,皮片成活率差异无显著性犤87.29±13.80)%,(88.59±10.30)%,t=0.8509,P(>0.05犦②复合皮移植后愈合创面外观平整,色泽与周围皮肤相似,柔。韧有弹性,而薄自体皮组移植区皮肤比正常皮肤薄,无弹性。③猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后皮片成活率与薄自体皮移植组无显著性差异,猪无细胞真皮基质早期完整,随着时间的推移,猪无细胞真皮基质逐渐被降解,并被自体新生的胶原所替代,直到移植后32周,在真皮的网状层仍可见到残留的猪真皮基质。在32周的观察期内未见急慢性排斥反应。结论:采用一步法将猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植,并不影响覆盖其上的自体皮的成活率,且其在体内具有较好的稳定性,对于引导真皮组织的再生和减轻瘢痕形成可能具有积极的意义。

植皮成活率及愈合时间与不同切痂术式的关系

目的:观察不同的切痂术式对肢体深度烧伤患者术中出血量、植皮成活率及创面愈合时间的影响,探寻更合适的肢体切痂的手术方式。方法:选择2001-06/2004-05济南市中心医院烧伤科收治的肢体Ⅲ度烧伤患者22例患者38个肢体,按入院先后顺序随机分为2组,逆行切痂组11例20个肢体,常规顺行切痂组11例18个肢体,患者均签署知情同意书且得到医院伦理道德委员会许可。两组患者于休克期平稳度过后分别做逆行切痂术和常规顺行切痂术,除关节功能部位移植大张中厚皮外,其他创面移植邮票皮片。术中收集止血纱布计算出血量,术后观察植皮成活率和创面愈合时间。结果:22例患者全部进入结果分析,无脱落。①逆行切痂组患者的1%体表面积切痂出血量显著低于常规顺行切痂组[(21.30±2.11,30.30±2.67)mL(P<0.01)]。②逆行切痂组患者的植皮成活率显著高于常规顺行切痂组[(83.45±5.57,73.27±5.06)%(P<0.01)]。③逆行切痂组患者的创面愈合时间显著短于常规顺行切痂组[(33.73±4.15,44.64±3.72)d(P<0.01)]。结论:逆行切痂能明显减少肢体深度烧伤患者的术中出血量,增加植皮成活率,缩短创面愈合时间,减少患者痛苦,值得推广应用。

新型猪胶原基真皮支架细胞毒性及亲和性的实验研究

目的通过对一种新型的猪胶原基真皮支架（PCDM）的细胞毒性和与成纤维细胞（FB）的亲和性进行评价,为这种新型生物材料的安全应用及工艺改良提供依据。方法用MTT法检测真皮支架不同浓度的浸提液对细胞增殖的影响情况,按医用生物材料细胞毒性分级标准进行评级;用MTT法测定种植24 h后FB在PCDM乳头层面的黏附情况,并与空白培养板对照,确定细胞在支架上的黏附率;在PCDM乳头层面种植人FB,于接种后1、7、14天通过苏木精-伊红染色、扫描电镜观察FB在PCDM上的生长情况。结果PCDM细胞毒性评级为0～1级,可认为无细胞毒性;FB在PCDM上的黏附数目相当于在培养板上的50%;FB在真皮支架乳头层表面增殖良好,但无法长入支架内部。结论猪胶原基真皮支架是一种无毒的天然异种真皮替代物,细胞亲和性较好,但需要改良生产工艺,以提高细胞黏附率和细胞相容性。

重组人生长激素对烧伤大鼠肠粘膜结构及细胞凋亡的影响

目的 探讨重组人生长激素 (rhGH)的早期应用对严重烧伤大鼠小肠粘膜的保护作用。 方法 30只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、烧伤组和rhGH组 ,每组 10只。后两组造成2 5 %TBSAⅢ度烧伤创面 ,立即腹腔注射地塞米松 80mg/kg ,从伤后 2h开始分别给予等渗盐水和rhGH(1.33U·kg-1·d-1)。于伤后 30、96h ,观察回肠末端粘膜组织形态、肠上皮细胞超微结构和肠粘膜细胞增殖活性与凋亡率变化。 结果 烧伤组肠粘膜形态结构及上皮细胞损伤严重 ,rhGH组明显减轻 ,基本接近对照组 ;伤后 30h烧伤组和rhGH组肠粘膜细胞增殖指数 (proliferativeindex ,PI)均明显高于对照组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,但两组之间差异无显著性意义 ;伤后 96h ,rhGH组PI较烧伤组和对照组均明显升高 (P <0 .0 1)。烧伤组肠粘膜细胞凋亡率较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,rhGH组凋亡率较烧伤组 (P <0 .0 1)和对照组 (P <0 .0 5 )明显下降。 结论 rhGH能促进严重烧伤后肠粘膜细胞增殖 ,但作用缓慢 ;能抑制肠粘膜细胞凋亡 ,而且作用迅速、效果明显 ,并可能通过抑制作用减轻肠粘膜损伤 ,维护形态结构的基本正常。

异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的变化

目的观察异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的动态变化。方法以SD大鼠为动物模型,在其背部造成4 cm×5 cm的全层皮肤缺损。大鼠分为薄自体皮移植组和猪无细胞真皮基质+薄自体皮移植组,分别于移植后1,2,3,4,8,12,16周取标本,检测羟脯氨酸含量、Ⅰ/Ⅲ型前胶原mRNA的表达、透明质酸含量及纤维连接蛋白的变化。结果猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后,各时相点羟脯氨酸含量、Ⅰ型前胶原mRNA的表达均低于薄自体皮移植组(P<0.05);Ⅲ型前胶原mRNA的表达与薄自体皮移植组差异无统计学意义(P>0.05);透明质酸含量高于薄自体皮移植组(P<0.05);而纤维连接蛋白的表达在早期高于薄自体皮移植组,后期则低于薄自体皮移植组(P<0.05)。结论猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后能够减少胶原合成和Ⅰ型前胶原mRNA的表达,增加皮肤中透明质酸含量,从而减轻瘢痕增生。纤维连接蛋白早期表达增高有利于创面愈合及基底膜的重塑,而后期表达降低有助于减轻瘢痕增生。