微滴式数字PCR技术及其在产前诊断中的应用

微滴式数字PCR(ddPCR)技术是一种新型核酸检测方法,通过将含有靶分子的反应体系均分到大量独立的反应单元进行扩增,并根据阳性比例和泊松分布原理对靶分子进行绝对定量分析。与传统PCR技术相比,ddPCR具有高灵敏度、高精确度及绝对定量等优点,近年来得到迅速发展,广泛应用于肿瘤、微生物等检测等领域。本文主要在介绍ddPCR基本原理的基础上重点概述其在染色体及单基因遗传病等产前诊断领域的应用进展。

STEAP1在人乳腺癌中表达及其临床意义

目的:研究前列腺跨膜上皮抗原1(six-transmembrane epithelial antigen of prostate protein 1,STEAP1)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法:收集2007年1月至2016年12月山东省千佛山医院40例女性乳腺正常组织及52例乳腺纤维腺瘤、211例乳腺癌患者的组织标本,应用免疫组织化学法检测STEAP1的表达情况。根据STEAP1表达的高低将乳腺癌患者分为高表达组和低表达组,对两组行临床病理特征和Kaplan-Meier生存分析。运用RT-PCR及Western blot法检测STEAP1在人正常乳腺上皮细胞HBL-100及乳腺癌细胞MDA-MB-468、BT549和MCF-7中的表达情况,使用Oncomine和Kaplan-Meier Plotter数据库分析STEAP1的表达及预后。结果:免疫组织化学法检测显示乳腺癌组织中的STEAP1高表达者占11.8%(25/211),低于乳腺正常组织的85.0%(34/40)和乳腺纤维腺瘤的84.6%(44/52),3者之间具有显著性差异(P<0.001),与Oncomine数据库分析获得的乳腺癌组织中表达低于乳腺正常组织的结果一致。RT-PCR和Western blot法检测显示乳腺上皮细胞中的STEAP1 m RNA和蛋白质表达明显高于乳腺癌细胞MDA-MB-468、BT549和MCF-7,4种细胞之间具有显著性差异(均P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析与Kaplan-Meier Plotter数据库分析均表明STEAP1高表达者预后更佳(均P<0.05)。结论:正常乳腺中的STEAP1表达水平高于乳腺癌,STEAP1高表达与良好的预后相关。

2015年山东省6～18岁儿童青少年超重肥胖流行现况

目的分析山东省学龄期儿童青少年超重肥胖流行现况,为儿童青少年肥胖防治策略和措施的制定提供基础数据。方法利用2015年山东省中小学生体检数据,共纳入9 583 576名6~18岁儿童青少年。利用国内外四种儿童青少年超重肥胖标准分析山东省学龄期儿童超重肥胖性别、年龄、城乡分布特征,并比较国内标准与国外标准间的一致程度。结果基于中国肥胖问题工作组(中国标准)、国际肥胖问题工作组(IOTF标准)、美国疾病预防控制中心(CDC标准)和世界卫生组织(WHO标准)推荐的儿童青少年超重肥胖体重指数(BMI)筛查标准,山东省6~18岁儿童青少年总体超重检出率分别为17.5%、16.6%、13.9%和17.6%,肥胖检出率分别为13.1%、7.2%、11.4%、10.8%。男生超重肥胖检出率高于女生,城市高于农村。在6~11岁年龄组随年龄增长超重肥胖检出率呈平稳上升趋势,12~18岁年龄组呈迅速下降趋势。中国标准与其他三种国际标准之间一致性较好,加权Kappa值分别为0.82(中国标准vs.CDC标准)、0.70(中国标准vs.IOTF标准)和0.83(中国标准vs.WHO标准)。结论儿童青少年肥胖已成为山东省重要的公共卫生问题,需引起全社会的重点关注。

山东省6～18岁儿童青少年视力不良地域分布研究

目的分析山东省儿童青少年视力低下的地域分布特征,为开展视力低下防控工作提供科学依据。方法样本来源于2015年山东省体检数据,共纳入939万名6～18岁儿童青少年。获取左右眼视力等数据,利用Arc GIS 9.3软件呈现山东省6～18岁儿童青少年视力不良空间分布图,描述其地区分布特征。结果 2015年山东省6～18岁儿童青少年总体视力不良率为38.7%,轻度、中度、重度视力不良率分别为7.5%、14.2%和17.1%。其中城市视力不良率高于乡村(47.9%vs.33.3%),女生视力不良率高于男生(42.3%vs.35.7%),差异均有统计学意义(P<0.05)。2015年山东省儿童青少年总体及中、重度视力不良空间分布表现为山东中部及东北沿海地区检出率较高,男女生视力不良也呈现类似分布。轻度视力不良呈零散分布。结论山东省6～18岁儿童青少年视力低下空间分布存在显著差异,提示有关部门制订相关政策时考虑地区因素,采取针对性干预措施。

中国使用精子库冷冻精液助孕对子代出生缺陷影响的meta分析

目的通过meta分析方法评价使用精子库冷冻精液助孕出生的子代出生缺陷情况,为精液冷冻在辅助生殖中应用的安全性和可靠性提供科学依据。方法检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库(Wanfang)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBMDisc)及PubMed数据库截止至2019年10月1日所有收录的使用精子库冷冻精液行辅助生殖中有关子代出生缺陷的文献资料,严格按照纳入与排除标准筛选文献、提取资料,并根据STROBE声明中横断面研究评价标准进行文献质量评价。结果最终共纳入13篇文献,总样本量为33398例,出生缺陷率为1.09%(95%CI=0.85%~1.32%),低于国家卫健委(原卫生部)发布的检测数据(1.53%,P<0.001)。供精人工授精(artificial insemination by donor,AID)组出生缺陷率为1.06%(95%CI=0.78%~1.35%),体外受精(in vitro fertilization,IVF)组为0.60%(95%CI=0.03%~1.22%),卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)组为1.35%(95%CI=0.06%~2.75%),差异无统计学意义(P=0.785)。出生缺陷类别中,以循环系统先天性畸形发生率最高,其次为肌肉骨骼系统先天性畸形和变形、泌尿生殖系统先天性疾病等。结论使用精子库冷冻精液助孕未增加子代出生缺陷的风险,但受纳入研究的质量限制,上述结论尚需开展更多高质量研究予以验证。

EFEMP2在子宫内膜癌组织及细胞中的表达及其临床意义

目的探讨包含表皮生长因子的fibulin类细胞外基质2(EFEMP2)在子宫内膜癌组织以及子宫内膜癌细胞中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学法检测200例子宫内膜癌组织以及40例正常子宫内膜组织中EFEM P2的表达;采用免疫细胞化学法、qRT-PCR、Western blotting检测EFEM P2在4种子宫内膜癌细胞(KLE、HEC-1A、HEC-1B、Ishikaw a)中的表达水平;运用生长曲线及软琼脂克隆形成实验检测子宫内膜癌细胞的增殖能力;运用Transwell体外侵袭及转移实验检测子宫内膜癌细胞的侵袭及转移能力。结果 EFEMP2在子宫内膜癌组织、细胞中的表达明显低于正常子宫内膜组织及细胞(P<0.001),且与子宫内膜癌晚期、分化程度低、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。KLE和HEC-1A的增殖、侵袭、转移能力高于HEC-1B和Ishikawa(P<0.001)。结论EFEM P2的表达与子宫内膜癌临床分期、组织分化程度、有无淋巴结转移和侵袭生长等恶性表型密切相关,并可能参与抑制子宫内膜癌侵袭、转移过程。

24例难治性颞叶癫痫手术患者病例分析

目的了解难治性颞叶癫痫手术治疗的现状和预后效果。方法回顾性分析2011年4月—2014年6月于淄博昌国医院经手术治疗且临床及随访资料完整的24例难治性颞叶癫痫手术患者,其中男14例,女10例。年龄16~44岁,平均(24.40±6.26)岁,平均病程(12.50±8.42)年。分析患者的临床特点和预后情况。结果 24例患者均有海马硬化,行"颞前叶及颞内侧结构切除术"。经过5~7年的随访,术后癫痫发作情况达到EngelⅠ级20例(83.3%),EngelⅡ级2例(8.3%),EngelⅣ级2例(8.3%)。结论 24例患者以海马硬化和皮质发育不良多见,手术治疗效果较好。临床上为改善难治性癫痫患者预后,应视情况尽早行手术治疗。

贫困农村地区0～3岁留守儿童心理行为发育影响因素研究

目的分析农村0~3岁留守儿童心理行为发育异常的影响因素,为促进儿童早期发展提供基础依据。方法利用2016年原国家卫生计生委"贫困地区农村留守儿童健康教育项目"定量调查数据中3岁以下儿童信息进行分析,调查了全国12个省27个贫困县3 249例0~3岁留守儿童样本。儿童心理行为发育的测量采用"儿童心理行为发育预警征象筛查问卷",影响因素通过自编的调查问卷获得。结果农村留守儿童整体可疑心理行为发育异常检出率为9.48%,其中男生(10.94%)显著高于女生(7.75%),0~18个月儿童(12.20%)显著高于19~36个月儿童(8.1%);留守儿童家庭存在看护人年龄偏大、学历普遍偏低的情况,亲子分离情况仍十分严峻;Logistic回归分析显示,亲子互动良好(OR=0.604,95%CI:0.417~0.876,P=0.008),与兄弟姐妹一起生活(OR=0.664,95%CI:0.473~0.932,P=0.018),较高的家庭经济水平(OR=0.609,95%CI:0.414~0.897,P=0.012)和每日互动时间>30 min(OR=0.467,95%CI:0.230~0.948,P=0.035)是儿童心理行为发育的保护因素。从未母乳喂养(OR=2.071,95%CI:1.334~3.216,P=0.001)、纯母乳喂养时间>8个月(OR=1.793,95%CI:1.089~2.952,P=0.022)、存在照顾不周现象(OR=1.833,95%CI:1.047~3.211,P=0.034)是儿童心理行为发育的危险因素。结论农村0~3岁留守儿童在养育环境上存在劣势,影响心理行为发育因素较多,应针对性加大关注和干预力度。

不育男性人格特征、性别角色冲突与婚姻调适相关性研究

以不育男性为研究对象,分析人格特征、性别角色冲突与婚姻调适的关系。方法 选取2021年8月—2022年5月在山东省妇幼保健院和济南市中心医院生殖医学科门诊就诊的140名不育症患者进行问卷调查,调查内容包括社会人口学特征、人格特征、性别角色冲突、婚姻调适等。采用多元逐步线性回归分析人格特征、性别角色冲突与不育男性婚姻调适的相关性。结果 不育男性的婚姻调适总分为112.18±21.94分,婚姻调适良好为72.1%,婚姻失调为27.9%。多元逐步线性回归分析显示情绪稳定性与不育男性的婚姻调适呈正相关(P<0.01),工作家庭冲突与不育男性的婚姻调适呈负相关(P<0.01)。结论 不育男性中婚姻失调者较多,不育男性的情绪稳定性、工作家庭冲突均与婚姻调适具有相关性。