不同牛PrP合成肽段的抗原性研究

目的研究PrP多肽的抗原性以及不同偶联方法对多肽免疫原性的影响。方法选择4段牛PrP多肽(BoP1、BoP2、BoP3、BoP4)为半抗原,KLH为载体,MBS、戊二醛两种偶联方法进行偶联,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血清中抗体效价,并对两种偶联方法进行比较。结果两组动物均出现死亡,戊二醛偶联多肽免疫小鼠出现不同程度的腹水,MBS偶联多肽免疫小鼠未见其它异常反应;戊二醛偶联的4种多肽产生的抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP3抗体效价低于其它3种多肽(P<0.05);对同一种多肽而言,不同偶联方法KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4所产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),戊二醛偶联KLH-BoP3产生的抗体效价明显高于MBS偶联KLH-BoP3产生的抗体效价(P<0.05)。结论PrP多肽可作为半抗原刺激小鼠强烈的免疫反应,不同偶联方法,不同肽段抗原性不同,为抗PrP多克隆及单克隆抗体的制备奠定了基础。

儿童肺炎与微量元素关系的临床研究

肺炎是儿科常见病、多发病，是由于气道或肺局部防御能力缺陷致使肺部分泌物引流障碍或感染难以清除所致。微量元素在人体内含量低于体重的0．01％，在生理代谢、增强免疫功能过程中发挥极重要的作用。

2,5-己二酮对大鼠神经组织神经丝含量的影响

目的初步探讨正己烷中毒性周围神经病变中2,5己二酮(HD)对大鼠大脑、脊髓、坐骨神经中神经丝(NF)亚单位含量的影响。方法Wistar雄性大鼠分3组,2个染毒组,1个对照组,每组9只,经腹腔染毒HD,剂量分别为200和400mg/kg,连续8周(每周5d),分离大脑、脊髓、坐骨神经组织,匀浆,28000g、30min离心制备各组织上清和沉淀,采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和WesternBlotting检测低分子量NF(NFL)、中分子量NF(NFM)、高分子量NF(NFH)的相对含量。结果大脑、坐骨神经上清中未检测到NFL、大脑上清中未能检测到NFM,其他NF亚单位的含量在沉淀和上清中均明显降低,下降为对照组的5%～77%,其中以NFM和坐骨神经组织中NF含量的降低更为明显。结论HD导致大鼠各神经组织中NF含量的降低,NF含量改变与正己烷中毒性周围神经病变的发生有关。

氯丙烯亚慢性染毒对大鼠神经行为功能的影响

目的 观察氯丙烯亚慢性染毒对大鼠神经行为功能的影响。方法 选用雄性Wistar大鼠分别以 10 0或 2 0 0mg kg剂量灌胃 ,3次 周 ,连续 3个月 ,定期测量大鼠热感觉、压痛阈值、后肢撑力和倒挂网格等指标。结果 氯丙烯亚慢性染毒后大鼠热感觉传导时间缩短 (甩尾实验低剂量组缩短 3 3 0 % ,高剂量组缩短 3 6 8% ,热板仪实验低剂量组缩短 10 9% ,高剂量组缩短 16 7% ) ,压痛阈值增加 (低剂量组增加 9 1% ,高剂量组增加 16 7% ) ,后肢支撑力减少 (低剂量组减少14 6% ,高剂量组减少 2 3 4% ) ,倒挂网格时间缩短 (低剂量组缩短 16 7% ,高剂量组缩短 2 2 5 % ) ,与正常对照组相比 ,差异均有显著性 (P <0 0 1)。结论 氯丙烯亚慢性染毒可引起大鼠热感觉传导时间缩短。

食管癌患者全血微量元素变化的临床意义

目的探讨食管癌患者全血微量元素铜(Cu)、锌(Zn)、铁(Fe)含量及Cu/Zn比值的变化情况及临床意义。方法采用火焰原子吸收分光光谱法测定食管癌患者与健康人全血Cu、Zn、Fe含量及Cu/Zn比值进行比较分析。结果食管癌患者全血Cu含量和Cu/Zn比值明显高于对照组(P<0.01),Zn和Fe的含量明显低于对照组(P<0.01)。结论全血微量元素Cu、Zn、Fe的含量及Cu/Zn比值与食管癌的发生、发展密切相关。

2,5-HD对大鼠DRG神经元神经丝蛋白表达的影响

目的比较2,5-己二酮(2,5-HD)和3,3′-亚氨基二丙腈(3,3-′IDPN)对大鼠DRG神经元神经丝蛋白(NF-M)的损伤作用。方法用出生后2 d的大鼠背根神经节(DRG)神经元,在培养皿中加不同浓度的2,5-HD和3,3-′IDPN进行培养,用荧光染料测定细胞毒性,计算细胞死亡率。用蛋白免疫荧光方法测定NF-M,计算DRG神经元细胞体的神经丝表达。结果DRG神经元24 h接触2,5-HD和3,3-′IDPN的LD50约为32和102 mmol/L。DRG细胞体内的NF-M蛋白含量在接触2,5-HD(0、4、8和16 mmo/L浓度)24和48 h后结果显示,各个剂量组均有明显降低(P<0.05,P<0.01);而在接触3,3-′IDPN 24 h后,各个剂量组之间没有发生明显改变,但在接触48 h后,仅有64,128 mmol/L组与对照相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在DRG神经元具有相同死亡率时,2,5-HD和3,3-I′DPN 24 h后对NF-M蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论2,5-HD与3,3-′IDPN对NF-M的损伤不同。2,5-HD减少NF-M蛋白表达要早于细胞死亡。NF-M对2,5-HD比对3,3-′IDPN敏感。

氯丙烯对大鼠血清中氧化-抗氧化功能的影响

目的探讨氯丙烯亚慢性染毒对大鼠血清中氧化-抗氧化功能的影响。方法选用雄性Wistar大鼠分别以100或200 mg/kg剂量灌胃3个月,测定大鼠血清中还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量和超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽还原酶(GR)活力的变化。结果与对照组相比,大鼠血清中GSH含量及T-SOD、T-AOC、GR活性显著降低,其中低剂量组分别降低13.4%、11.1%、22.4%和16.6%(P<0.01),高剂量组分别降低17.5%、24.6%、34.8%和28.1%(P<0.01);MDA含量及GSH-Px活力有增加趋势(P>0.05);ROS含量低剂量组增加12%(P<0.01),高剂量组增加20%(P<0.01)。结论氯丙烯亚慢性染毒可导致大鼠血清中活性氧成分明显增加,抗氧化能力明显减弱,T-AOC及GR活力变化幅度最大。

甲胺磷对母鸡坐骨神经中神经丝蛋白的影响

目的观察甲胺磷诱导母鸡迟发性神经毒性时坐骨神经中神经丝蛋白的变化。方法皮下注射甲胺磷30mg/kg,连续15d。分别在母鸡呈现迟发性神经毒性症状的第2天、第10天和第23天,采用免疫印记法检测坐骨神经沉淀和上清液中神经丝亚单位高分子量神经丝(NF H)、中分子量神经丝(NF M)和低分子量神经丝(NF L)的含量。结果坐骨神经沉淀中,NF H积分密度(IOD)值在呈现症状第2天为145117±17038,比对照组的78875±22569升高了84%,呈现症状第10天和第23天分别为55917±17333和45038±6662,与对照组比较,分别降低了29%和43%;NF M的IOD值在呈现症状第2天时为31493±4625,与对照组的27925±2660比较,差异无统计学意义;呈现症状第10天和第23天分别为19367±2746和6612±1119,明显低于对照组;NF L的IOD值在呈现症状第2天时为39211±3800,明显高于对照组的28749±9319;第10天和第23天分别为27974±3611和21507±2286,与对照组比较差异无统计学意义。3个时间点上清液中NF H的IOD值分别为4709±1739、12337±3205和16745±931,均明显低于对照组的44083±6895;NF M含量明显降低,呈现症状第2天的IOD值为3196±269,比对照组的17243±3232降低了81%,第10天时仅检测到微量,第23天时的IOD值为5206±1292,比对照组降低了70%;

茶多酚对高蛋氨酸饮食诱导大鼠纤维蛋白溶解功能损伤的影响

目的研究茶多酚（teapolyphenols，TP）对蛋氨酸诱导大鼠纤维蛋白溶解功能损伤的保护作用。方法取成年雄性Wistar大鼠50只，按体重分层随机分为对照组、模型组，以及TP低、中和高剂量组。对照组喂饲正常基础饲料，模型组及TP组均喂饲3％高蛋氨酸饲料，同时TP低、中、高剂量组每天经灌胃分别给予50、100和200rag／kg的TP，灌胃体积均为0．5ml／100g，对照组和模型组给予等体积蒸馏水。8周后断头处死大鼠，采用免疫组织化学链霉亲和素．生物素．过氧化物酶复合物（strept—avidin—biotincomplex，SABC）法测定大鼠主动脉弓组织型纤溶酶原激活物（tissue．typeplasminogenactivator，t-PA）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（type-1plasminogenactivatorinhibitor，PAI-1）蛋白表达结果；ELISA法测定血浆中t-PA和PAI-1含量；RT—PCR法测定胸主动脉t-PA和PAI-1mRNA水平。结果实验结束后，对照组、模型组及TP低、中、高剂量组主动脉弓中t-PA蛋白表达量分别为133．03±10．14、95．46±11．08、111．97±11．91、130．23±10．80、139．39±9．41（F=14．15，P〈0．01），PAI-1蛋白表达量分别为90．91±8．67、166．76±12．18、139．63±12．71、134．66±13．19、109．49±10．82（F=31．44，P〈0．01）；血浆中tPA含量分别为（10．69±1．26）、（6．13±0．92）、（8．56±1．19）、（9．69±0．92）、（11．97±1．08）ng/ml（F=41．98，P〈0．01），PAI-1含量分别为（6．31±0．81）、（16．98±1．27）、（11．39±0．82）、（8．46±0．67）、（8．08±0．91）rig／ml（F=207．74，P〈0．01）；t-PAmRNA水平分别为1．12±0．02、0．75±0．14、1．01±0．09、0．95±0．08、1．05±0．13（F=5．77，P〈0．05）；PAl-1mRNA水平分别为1．25±0．11、1．74±0．06、1．23±0．05、1．09±0．14、1．23±0．04（F=23．56，P〈0．01）。结论TP能够调节t-PA和PAI-1的转录及蛋白水平，维持t-PA和PAI-1的平衡状态，修复高蛋氨酸饮食诱导的大鼠纤维蛋白溶解功能损伤。

二十二碳六烯酸对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的预防保护作用

目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤的预防保护作用。方法雄性昆明种小鼠随机分成对照组、DHA组和模型组。适应性喂养1周后,DHA组动物每天经灌胃给予500mg/kgDHA,对照组和模型组给予等体积的玉米油,连续2周。第15天,模型组和DHA组动物经腹腔注射给予LPS10mg/kg诱导内毒素性急性肺损伤;给予LPS后,记录各组动物死亡情况,进行死亡率比较。20h后乌拉坦麻醉各组小鼠,取肺脏进行病理学检查;称量肺组织,计算肺脏/体重比值;BCA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白质含量。结果给予LPS后的20h内,DHA组小鼠死亡率为10%,模型组死亡率为33.3%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);模型组肺脏/体重比值明显升高,肺组织病理学观察可见肺泡间隔明显增厚,大量中性粒细胞浸润,BALF中总蛋白含量明显升高;与模型组相比,预给予DHA2周,可明显降低肺脏/体重比值,降低BALF中总蛋白含量,改善肺组织病理变化。结论DHA能够减轻小鼠内毒素性急性肺损伤。

不同时间给予大蒜油对四氯化碳急性肝损伤的保护效果

目的 观察并比较不同时间给予大蒜油对四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）引起的急性化学性肝损伤的保护效果.方法 实验分为4个预防组和2个治疗组,其中每组又分为阴性对照组、溶剂对照组（玉米油）、CCl4模型组、大蒜油低（25mg/kg）、中（50mg/kg）、高（100mg/kg）剂量组,每组15只雄性昆明种小鼠.预防组给药方案为预防1组,提前灌胃大蒜油30 d;预防2组,提前灌胃大蒜油5d,均为1次/d（10ml/kg）,末次给大蒜油后4 h灌胃1次CCl4（80mg/kg,10ml/kg）;预防3组,提前2 h灌胃1次大蒜油;预防4组,灌胃CCl4的同时给予1次大蒜油.治疗1组为灌胃CCl4后2 h灌胃1次大蒜油,治疗2组为灌胃CCl4后给予5 d大蒜油（1次/d,首次给药时间为CCl4染毒后2h）.溶剂对照组灌胃等体积的玉米油.模型组灌胃1次CCl4给药时间与各大蒜油组相同.末次给药（CCl4或大蒜油）后24 h,取血测定各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）的活力,取肝脏,称重,并计算肝脏系数,同时取肝左叶进行病理组织学检查.结果 与阴性对照组相比,CCl4模型组肝脏系数明显增加,血清中ALT、AST活力明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）.与CCl4模型组相比,预防组各组的大蒜油低、中、高剂量组肝脏系数明显减小,血清中ALIT、AST活力明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）,并有剂量-反应关系;同时大蒜油可有效减轻CCl4引起的细胞坏死、气球样变等肝细胞损伤.不同预防组大蒜油的保护效果相比,预防3组效果较好.但治疗1组各项指标无明显改善,治疗2组已基本恢复正常.结论 大蒜油能预防CCl4引起的急性肝损伤,并且提前2 h给药预防效果较好.