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HIV相关脑病患者中枢神经系统来源的HIV-1Tat蛋白对HUVECs活性的影响
被引量:
2
1
作者
郑文慧
秦泽明
+6 位作者
李昕
曹馨月
单晓宇
温红玲
王志玉
黄涛
赵丽
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
2018年第6期561-565,共5页
目的在原核细胞中表达并纯化HIV相关脑病(HIV-associated dementia,HAD)患者基底核(basal ganglia,BG)来源HIV-1Tat蛋白,研究其对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活性的影响。方法以本室保存的重组质...
目的在原核细胞中表达并纯化HIV相关脑病(HIV-associated dementia,HAD)患者基底核(basal ganglia,BG)来源HIV-1Tat蛋白,研究其对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活性的影响。方法以本室保存的重组质粒pGEX-KG-tat为模板扩增tat,构建重组表达载体pET-32a-tat。转化BL21(DE3)并用IPTG诱导表达Tat蛋白。Tat蛋白经镍亲和层析柱和凝胶过滤预装柱纯化、SDS-PAGE和Western blot(WB)鉴定后浓缩,测定BCA蛋白浓度,cck-8检测不同浓度Tat对HUVECs活性的影响。结果在BL21大肠杆菌中表达、纯化得到了纯度较高的Tat蛋白,BCA测定浓度为0.47mg/ml。随着Tat浓度的增加,HUVECs活性逐渐降低,与阴性对照组相比,100ng/ml、200ng/ml两组细胞活性差异均无统计学意义(P>0.05),300ng/ml、400ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml四组细胞活性差异均有统计学意义(P<0.05),但四组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在原核细胞中高效表达了具有生物学活性的HIV-1Tat蛋白,浓度达到300ng/ml可显著降低HUVECs的活性。
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关键词
HIV相关脑病
HIV-1tat
蛋白纯化
人脐静脉内皮细胞
细胞活性
原文传递
题名
HIV相关脑病患者中枢神经系统来源的HIV-1Tat蛋白对HUVECs活性的影响
被引量:
2
1
作者
郑文慧
秦泽明
李昕
曹馨月
单晓宇
温红玲
王志玉
黄涛
赵丽
机构
山东大学
公共
卫生
学院
卫生
微生物检验学系
山东
省"十三五"高校重点
实验
室感染性疾病防控重点
实验
室
山东大学公共卫生学院预防医学实验中心
山东
省疾病
预防
控制
中心
出处
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
2018年第6期561-565,共5页
文摘
目的在原核细胞中表达并纯化HIV相关脑病(HIV-associated dementia,HAD)患者基底核(basal ganglia,BG)来源HIV-1Tat蛋白,研究其对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)活性的影响。方法以本室保存的重组质粒pGEX-KG-tat为模板扩增tat,构建重组表达载体pET-32a-tat。转化BL21(DE3)并用IPTG诱导表达Tat蛋白。Tat蛋白经镍亲和层析柱和凝胶过滤预装柱纯化、SDS-PAGE和Western blot(WB)鉴定后浓缩,测定BCA蛋白浓度,cck-8检测不同浓度Tat对HUVECs活性的影响。结果在BL21大肠杆菌中表达、纯化得到了纯度较高的Tat蛋白,BCA测定浓度为0.47mg/ml。随着Tat浓度的增加,HUVECs活性逐渐降低,与阴性对照组相比,100ng/ml、200ng/ml两组细胞活性差异均无统计学意义(P>0.05),300ng/ml、400ng/ml、500ng/ml、1000ng/ml四组细胞活性差异均有统计学意义(P<0.05),但四组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在原核细胞中高效表达了具有生物学活性的HIV-1Tat蛋白,浓度达到300ng/ml可显著降低HUVECs的活性。
关键词
HIV相关脑病
HIV-1tat
蛋白纯化
人脐静脉内皮细胞
细胞活性
Keywords
HIV-associated dementia
HIV-1 tat
Protein purification
Human umbilical vein endothelial cells
Cell activity
分类号
R747.9 [医药卫生—神经病学与精神病学]
R512.91 [医药卫生—内科学]
R446.5 [医药卫生—诊断学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HIV相关脑病患者中枢神经系统来源的HIV-1Tat蛋白对HUVECs活性的影响
郑文慧
秦泽明
李昕
曹馨月
单晓宇
温红玲
王志玉
黄涛
赵丽
《中华实验和临床病毒学杂志》
CAS
CSCD
2018
2
原文传递
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