多元化知识体系在系统解剖学教学中的应用

系统解剖学是一门形态学课程，内容抽象且逻辑性“差”而且知识浩瀚，名词繁多；教师的任务是利用有限的时间和资源，将厚重的书本转化为生动的解剖图片或临床操作场景，帮助学生认知、消化解剖学知识，最后将其融入其他学科的学习及临床实践。

香港中文大学的医学教育

笔者应邀于2003年9～11月访问了香港中文大学。三个月的时间对香港中文大学医学院和解剖学系有了全面的认识。

应用胶原-壳聚糖桥接管引导大鼠坐骨神经再生

目的:观察胶原-壳聚糖桥接管促进大鼠坐骨神经损伤后再生与修复的作用。方法:用壳聚糖和胶原蛋白按1∶3的比例采用冷冻干燥法制成胶原-壳聚糖复合导管;将20只雄性Wistar大鼠随机分为2组,胶原-壳聚糖导管组和硅胶管组,切断坐骨神经,建立10mm的缺损动物模型;分别用胶原-壳聚糖导管和硅胶管进行桥接。于术后不同时间对2组动物进行大体观察,并于术后14周进行电生理、组织学及逆行示踪检测,比较2组大鼠坐骨神经的再生和功能恢复情况。结果:术后14周2组动物坐骨神经再生和功能恢复情况的各项检测指标显示,胶原-壳聚糖桥接组明显优于硅胶管桥接组。结论:胶原-壳聚糖导管可用来桥接损伤神经,在周围神经缺损修复方面具有良好的应用前景。

血管内皮生长因子C在人乳腺癌细胞株MCF-7及MCF-7/Adr中的表达

背景与目的:血管内皮生长因子C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)是近期发现的血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)家族的新成员。研究发现VEGF-C可特异性作用于淋巴管内皮细胞,并在多种人类肿瘤中表达。为探索VEGF-C在肿瘤发生、发展中的作用,我们分别检测了VEGF-CmRNA和蛋白在人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr中的表达。方法:根据VEGF-C基因序列,设计合成地高辛标记的特异性寡核苷酸探针,运用原位杂交方法检测培养的细胞株MCF-7和MCF-7/Adr中VEGF-CmRNA的表达,并运用免疫组织化学方法检测两种细胞中VEGF-C蛋白的表达,实验中用缓冲液分别代替杂交液和一抗作阴性对照。结果:原位杂交法检测到MCF-7和MCF-7/Adr细胞的胞浆中有阳性蓝色颗粒,免疫组化检测发现两种细胞的胞浆中均有阳性棕黄色颗粒,而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒。结论:人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞能够转录VEGF-CmRNA,并在其细胞浆中翻译合成相应的蛋白。

血管内皮生长因子CmRNA在人乳腺癌细胞株中的表达

目的 :检测血管内皮生长因子C(VEGF C)mRNA在人乳腺癌细胞株MDA MB 2 31及MCF 7中的定位、定量表达。方法 :根据VEGF C基因序列 ,设计合成地高辛标记的特异性寡核苷酸探针 ,运用原位杂交方法检测培养的细胞株MDA MB 2 31及MCF 7中VEGF CmRNA的定位表达 ;并运用半定量RT PCR方法检测了两种细胞中VEGF C相对于看家基因 β 肌动蛋白 (β actin)的表达水平。结果 :原位杂交检测到MDA MB 2 31及MCF 7细胞的胞浆中有阳性蓝色颗粒 ,而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒 ;半定量RT PCR检测到两种细胞中VEGF C基因均以较高水平表达 ,相对 β actin的表达水平分别为 0 .89和 0 .6 8。结论 :人乳腺癌细胞株MDA MB 2 31及MCF 7细胞能够以较高水平转录VEGF

人结直肠癌VEGF-C的表达及与淋巴结转移之间的关系

目的 :探讨血管内皮生长因子C(VEGF C)在人结直肠癌中的表达及与肿瘤淋巴结转移之间的关系。方法 :选择 47例结直肠癌标本 ,应用免疫组织化学染色方法 ,检测VEGF C在人结直肠癌组织中的表达 ,同时对伴与不伴有淋巴结转移的结直肠癌VEGF C表达的差异进行统计学分析。结果 :VEGF C在结直肠癌组织中的阳性表达率为 44 .7%,其中有淋巴结转移的表达率为 6 0 .0 %,无淋巴结转移的表达率为 17.7%,二者差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :结直肠癌可表达VEGF C ,并与肿瘤细胞淋巴转移有关。

D-环丝氨酸对大鼠空间工作记忆的影响

目的:探讨D环丝氨酸对空间工作记忆损伤大鼠的治疗作用。方法:随机将32只大鼠分为4组:对照组、阿托品损伤组、生理盐水治疗组和D环丝氨酸治疗组,分别给予相应的药物处理后,训练动物学习水迷宫中延缓的位置非匹配作业,以大鼠选择游泳时的选择正确率及逃避潜伏期为评判标准。结果:阿托品损伤组大鼠的选择正确率显著降低(P<0.01),而逃避潜伏期无改变(P>0.05);D环丝氨酸治疗组大鼠在作业的最初3天,选择正确率明显提高(P<0.01),但自第4天起效果不明显(P>0.05);整个过程中逃避潜伏期无改变(P>0.05)。结论:D环丝氨酸对空间工作记忆损伤大鼠有短期治疗作用,长期用药后效果不明显。

昆明小鼠胚胎干细胞大鼠侧脑室内移植诱导分化的在体研究

目的:探讨脑内微环境诱导胚胎干细胞向神经细胞分化的状况,确定胚胎干细胞脑内移植的最佳分化阶段。方法:将未分化的昆明小鼠胚胎干细胞和经维甲酸初步诱导分化的胚胎干细胞分别进行侧脑室内移植,通过苏木素伊红(HE)染色、尼氏染色和神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色,检测胚胎干细胞移植后的存活和分化情况。结果:未分化的昆明小鼠胚胎干细胞侧脑室内移植后,不能很好地向神经细胞方向分化,有形成畸胎瘤的倾向。而经维甲酸初步诱导分化的胚胎干细胞进行侧脑室移植后4周,移植物中有相当一部分细胞为NSE免疫阳性细胞,部分细胞的胞浆中可见尼氏小体,具有神经细胞的典型特征。结论:经过维甲酸诱导后,胚胎干细胞发生了向神经细胞的分化,在侧脑室微环境中可以存活,并朝着神经细胞方向分化。

GFP转基因鼠神经上皮干细胞纹状体内移植的实验研究

目的:观察GFP转基因鼠胚胎神经上皮干细胞的体外培养及脑内移植后的存活与分化状况。方法:将GFP转基因鼠的胚胎神经上皮干细胞置于无血清培养基内纯化扩增,用巢蛋白免疫组织化学染色鉴定神经干细胞,将扩增后的含GFP基因的神经干细胞在立体定位仪下,定向移植到大鼠的纹状体内。术后不同时期取材、切片,在荧光显微镜下观察移植细胞的存活状况,行微管相关蛋白(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色鉴定移植细胞的分化状况。结果:GFP转基因鼠神经管来源的神经上皮干细胞在无血清培养基内能增殖形成神经球,呈巢蛋白阳性。纹状体内移植2周、4周均可见明显的呈绿色荧光的移植细胞,显示细胞存活良好。免疫组织化学染色显示移植细胞在不同间隔时间可分化为MAP-2、GFAP及TH阳性细胞。结论:GFP转基因鼠来源的具有GFP标记的胚胎神经上皮干细胞可在体外培养扩增,移植到大鼠纹状体内存活良好并能分化成神经元、神经胶质细胞,且能定向分化为多巴胺能神经元。

血管内皮生长因子C在人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达

目的:研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)在人乳腺癌细胞中的体外表达情况,探讨其在肿瘤发生、发展中的作用。方法:运用半定量RT-PCR和免疫组织化学的方法分别检测了VEGF-C mRNA和VEGF-C在人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达。结果:半定量RT-PCR检测到VEGF-C mRNA以较高水平表达,免疫组化结果显示MDA-MB-231细胞的胞浆中有棕黄色阳性颗粒,而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒。结论:人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞在体外能够转录VEGF-C mRNA并翻译合成相应的蛋白。

6-OHDA损伤神经细胞CXCR4/CXCL12表达变化的实验研究

目的研究6-OHDA损伤PC12细胞CXCR4/12表达的变化。方法以梯度浓度的6-OHDA处理PC12细胞,光镜观察各组PC12细胞的形态学变化;MTT法检测6-OHDA对PC12细胞的损伤;间接免疫荧光染色法检测6-OHDA不同浓度下PC12细胞CXCR4/CXCL12表达的变化。结果随6-OHDA浓度的增加,PC12细胞的存活率呈梯度降低;光镜下观察发现PC12细胞数减少,轴突变短甚至消失;间接免疫荧光染色则显示CXCL12及其受体CXCR4在神经细胞的表达增加。结论 6-OHDA浓度的增加可导致PC12细胞凋亡,同时伴有CXCL12及其受体CXCR4表达增加。

胸廓内血管为蒂的肋骨复合组织瓣解剖学研究

目的研究胸廓内血管及其前穿支对前胸壁组织供血的解剖学要点。方法新鲜成人尸体胸部2具4侧,自胸廓内动静脉起始处分别灌注红、蓝乳胶颜料。观察胸廓内血管诸穿支供应胸部皮肤的范围;10%福尔马林固定的成人尸体胸部15具30侧,采用巨微解剖学方法,观察胸廓内血管及皮肤穿支在肌肉、皮下的走行,并且测量诸前穿支穿出胸壁的具体位置、长度、外径、分支数目、吻合情况。结果胸廓内动脉穿支动脉多起自胸廓内动脉的内侧壁,前穿支的出现率以2、3穿支最常见,出现率为100%,且口径较为粗大,各穿支之间有丰富的血管吻合现象,穿支动脉的伴行静脉多为一支或缺失;前胸壁的肋骨、肋软骨、及肋间肌等结构,主要由胸廓内动脉及其分支和肋间后动脉供血。结论胸廓内血管为蒂的肋骨复合组织瓣可用于面颈部软组织伴下颌骨缺损的修复。

辛伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎性反应抑制作用

目的:运用脂多糖(LPS)诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的炎性反应,观察辛伐他汀对HUVECs炎性反应的抑制作用。方法:体外培养HUVECs,细胞至第3代,随机分为空白对照组、LPS(100 ng/mL)组、辛伐他汀(5 mg/mL)组、辛伐他汀(5 mg/mL)和LPS(100 ng/mL)共作用组,运用实时荧光定量PCR和ELISA的方法,测定各组细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)和尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA/uPAR)的mRNA和蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,LPS组细胞的MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显增加(P均<0.01);与LPS组相比,辛伐他汀和LPS共作用组的细胞MCP-1I、L-1、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显降低(P均<0.05)。结论:辛伐他汀可抑制HUVECs合成及分泌细胞因子MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR,延缓动脉粥样硬化的进程。

KM小鼠胚胎干细胞大鼠纹状体内移植诱导分化的在体研究

目的探讨体外培养扩增的胚胎干细胞移植到纹状体内的存活、迁移和分化情况,确定胚胎干细胞脑内移植的最佳分化阶段。方法分别将未分化的胚胎干细胞和诱导分化至神经前体细胞阶段的胚胎干细胞进行纹状体内移植,移植4周后通过形态学观察、尼氏染色、TH与BrdU免疫组织化学染色,检测胚胎干细胞移植后的存活和分化情况。结果初步诱导分化后的胚胎干细胞纹状体内移植后4周,移植区内有大量BrdU免疫阳性细胞出现,而且部分BrdU免疫阳性细胞已迁移出移植区,有些细胞已分化为TH免疫阳性细胞,胞浆内可见尼氏体;而未分化的胚胎干细胞进行脑内移植后有成瘤的趋向。结论在体外对胚胎干细胞进行诱导分化至神经前体细胞阶段,然后进行脑内移植,更有利于胚胎干细胞的存活和部位特异性分化。

空间参考记忆和空间工作记忆检测阿尔茨海默病模型的研究

目的:损伤大鼠双侧基底核形成阿尔茨海默病(AD)模型,用空间参考记忆和空间工作记忆共同检测该模型的可靠性。方法:选用3月龄大鼠16只,随机选8只制成模型组,将鹅膏蕈酸钠(IBO)注入大鼠双侧基底核,其余8只为青年对照组。另选24月龄大鼠8只为老年对照组。用Morris水迷宫对3组大鼠进行行为学检测。结果:模型组与青年组、老年组相比,空间参考记忆和空间工作记忆均明显下降(P<0.01)。结论:空间参考记忆和空间工作记忆是检测AD模型的可靠方法。