人乳头瘤病毒HPV16L1-E7C重组质粒的构建及其细胞的免疫性

目的:构建HPV16L1-E7C重组质粒并研究其细胞免疫性。方法:利用基因克隆技术将HPV16L1-E7CDNA片段定向插入pcDNA3.1载体,构建重组质粒pcDNA16L1-E7C,然后将其免疫C57BL/6小鼠,利用T淋巴细胞增殖试验检测免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖能力,同时利用ELISA试验检测免疫小鼠的脾淋巴细胞分泌γ-干扰素(IFN-γ)的水平。结果:特异性T细胞增殖试验中实验组3H-TdR掺入率为18339±1972,对照组为6737±1243,实验组小鼠T细胞增殖水平明显高于对照组(P<0.05)。DNA免疫后实验组小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平为0.89±0.56,对照组为4.81±1.33,两者相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重组质粒能增强小鼠的细胞免疫功能。

TRAIL受体在肿瘤细胞系上的表达及意义

目的 检测ＴＮＦ相关凋亡诱导配体（ＴＲＡＩＬ）的受体，在来源于血液系统、肝脏、肺脏和大肠的８个肿瘤细胞系中的表达，并探讨其意义。方法采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ，对ＴＲＡＩＬ受体的表达进行半定量检测。结果 ＴＲＡＩＬ凋亡通路中，能够诱导凋亡反应的死亡受体ＤＲ４和ＤＲ５，在所检测的肿瘤细胞系中都有表达，其中ＤＲ５在所有肿瘤细胞系中的表达水平均显著高于ＤＲ４（Ｐ＜０．０５）。而能够竞争性阻断ＴＲＡＩＬ诱导的凋亡反应的诱骗受体ＤｃＲ１和ＤｃＲ２，在所有的肿瘤细胞中都呈低水平表达或不表达。结论 ＤＲ５可能在ＴＲＡＩＬ诱导凋亡的通路中发挥最重要的作用。ＴＲＡＩＬ死亡受体和诱骗受体在肿瘤细胞系中的表达具有差异性，这种差异性可在一定程度上解释不同细胞对ＴＲＡＩＬ诱导凋亡的敏感度。

hTERT的结构功能特点与应用前景

端粒酶是维持染色体末端端粒长度和功能稳定的重要物质。在端粒酶的 3个亚单位中 ,其催化亚单位hTERT与端粒酶的活性、肿瘤的发生、发展、诊断以及恶性程度的判断有着最大的相关关系。对hTERT表达的抑制可能会成为治疗肿瘤的一个极有前途的手段。

不同方式给予反义寡核苷酸对培养肝癌细胞HBV基因表达的影响

为开发新型抗HBV药物 ,设计合成针对HBVENⅡ (1713 172 7)的反义寡核苷酸 (as ENⅡ ) ,以不同浓度、不同作用方式作用于HepG2 2 15细胞 ,ELISA检测结果表明 10 μmol/L的as ENⅡ可显著抑制HBsAg、HBeAg表达 ,抑制率可达 5 2 1%和 40 1%。 10 μmol/Las ENⅡ一次性用于HepG2 2 15细胞后 ,其对HBsAg、HBeAg的抑制作用呈现双峰现象 :分别在 1d、5d和 1d、3d ,抑制作用分别为 30 4% ,5 2 1%和 34 0 % ,40 1%。同样浓度as ENⅡ每天反复加入HepG2 2 15细胞 ,其抑制作用缓慢上升 ,分别在第 7、6d达高峰 ,抑制作用分别为 73 6 9%和 73 6 4%。结果提示HBVENⅡ是设计抗HBV反义寡核苷酸片段的良好靶位 。

TRAIL抗癌作用的分子机制

TRAIL是近年新发现的一种凋亡诱导配体 ,它能够选择性地诱导肿瘤细胞凋亡 ,而使正常细胞逃逸其杀伤作用。TRAIL强大的凋亡诱导能力和选择性的杀伤作用 ,引起了广大研究者极大的兴趣。本文从TRAIL的结构功能开始分析 ,论述了TRAIL作用的分子机制 。

血栓调节蛋白与肝脏疾病

血栓调节蛋白 (thrombomodulin ,TM)是一种内皮细胞膜糖蛋白 ,是某些疾病血管内皮损伤的一个分子标志物。

TRAIL在肿瘤治疗中的研究进展

TRAIL是TNF家族的新成员 ,它通过与死亡受体结合 ,激活caspase通路传递和放大凋亡信号 ,从而诱导靶细胞发生快速、大量、高效的凋亡反应。TRAIL可以选择性地杀伤肿瘤细胞和病毒感染的细胞 ,而正常细胞则通过表达诱骗受体等方式逃逸其杀伤作用 ,这种特性使其具有在肿瘤治疗中应用的巨大潜力。

乙型肝炎病毒对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导凋亡的影响及其机制

目的 研究乙型肝炎病毒 (HBV)转染后 ,细胞对肿瘤坏死因子 (TNF)相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)诱导的凋亡的敏感度变化及作用机制。通过人肝癌细胞HepG2及转染了HBV全基因组的HepG2 2 15细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感度研究 ,探讨HBV感染对细胞凋亡的影响及其机制。方法 流式细胞仪检测TRAIL诱导的凋亡反应和细胞表面TRAIL蛋白的表达 ,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清中分泌型TRAIL蛋白质的表达 ,半定量逆转录聚合酶链反应检测TRAIL受体和其转导通路中凋亡拮抗分子FLIP的表达。结果 HepG2和HepG2 2 15对TRAIL诱导的凋亡率分别为5 1 6 0 %和 9 12 %。与HepG2相比 ,HepG2 2 15细胞表面TRAIL蛋白质及其受体的表达都有不同程度的下调 ,而抵抗细胞凋亡的分子—FLIP的表达却显著上调 (P <0 0 1) ,两细胞系上清中分泌型TRAIL的表达量差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论 HBV转染可以抵抗TRAIL诱导的细胞凋亡 ,可以下调细胞表面TRAIL蛋白质及其受体的表达 ,但使FLIP的表达显著上调。这能从一定程度上解释HBV感染逃逸机体免疫监视 ,持续存活 。