济南市传染病医院1997～2006年肾综合征出血热2164例分析

目的探索近年来城市中心传染病医院肾综合征出血热(HFRS)病例特点,为进一步制定防治策略和采取有效措施提供依据。方法收集济南市传染病医院1997～2006年10年间住院确诊HFRS患者的流行病学资料和近5年(2002～2006)住院HFRS患者的临床资料,建立数据库,应用SPSS13.0软件进行统计分析。结果2164例HFRS患者,年龄为1～82岁,平均37.97岁,20～49岁占70.19%,男女比例3:1,农村患者占78.51%,多数患者生活或工作环境中有鼠类活动;发病率逐年下降,未愈/病死率似有下降趋势;发病形式以全年散发为主,春季稍多。临床特点是不典型病例较多,重危患者较多,并发症和继发症复杂。多器官功能衰竭、急性呼吸窘迫综合征、急性肾功能衰竭、颅内出血、DIC是主要死因。结论HFRS仍然是危害人们健康的重要疾病,必须持续灭鼠、杀螨、防护重点人群,积极开展新的实验室诊断方法的研究,提高基层医疗机构诊断水平,加强城市中心传染病医院治疗研究。

山东地区乙型肝炎病毒感染者乙肝病毒基因型和亚型的分布

目的:了解山东地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型和亚型的分布。方法:采用特异性引物巢式PCR法,检测140例HBV感染者基因型和基因亚型。结果:140例标本中,129例(92.1%)可检出基因型,其中B基因型12例(9.3%),C基因型109例(84.5%),B/C混合基因型8例(6.2%),未检出A、D、E、F基因型。在B基因型中,均为Ba基因亚型,未检出Bj亚型;C基因型中,C2基因亚型81例(74.3%),非C1/C2基因亚型28例(25.7%);8例B/C混合基因型中,Ba+C2亚型5例,Ba+非C1/C2基因亚型3例。结论:山东地区HBV感染者中,存在HBV基因B、C、B/C型,其中B型均为Ba亚型,C型中以C2基因亚型为主。

白细胞介素17在乙肝肝纤维化中的表达及意义

目的:探讨白细胞介素17(IL-17)与慢性乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝病特别是乙肝肝纤维化发生的相关性。方法:酶联免疫吸附试验(ELISA)及逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法分别测定36例慢乙肝、42例肝硬化(Child-pughA、B、C分别为15、12、15例)、34例原发性肝癌、30例慢性重型乙型肝炎及20例健康对照者血清中的IL-17和外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17mRNA水平及肝硬化Child-pugh分级患者血清中的IL-17和肝纤维化指标IV型胶原(C-IV),层黏连蛋白(LN),透明质酸(HA)的浓度。结果:与正常对照组相比,血清IL-17和PBMC中IL-17mRNA水平在4组病人中表达升高(P<0.01);与其他各组相比,IL-17及mRNA水平在肝硬化中升高尤其明显(P<0.01)。肝硬化患者血清IL-17及肝纤维化指标水平在Child-pughC组高于Child-pughA和Child-pughB组,Child-pughB组高于Child-pughA组(P<0.01)。IL-17水平与Child-pugh分级评分及C-IV,LN,HA浓度均呈正相关(r=0.582、0.568、0.682、0.764,P<0.01)。结论:IL-17在慢性HBV相关性肝病尤其是乙肝肝硬化中表达明显升高,IL-17可能与慢性HBV相关性肝病尤其是乙肝肝纤维化的发生有明显的相关性。

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎过程中发生病毒突破患者的(HBV)P基因变异分析

目的观察阿德福韦酯(adefovir dipivoxil,ADV)单药治疗慢性乙型肝炎(慢乙肝)过程中发生病毒突破的患者乙型肝炎病毒(HBV)P基因区变异发生情况。方法选取51例阿德福韦酯单药治疗(10 mg/d,疗程>12月)发生病毒突破的慢乙肝患者作为研究对象,分别检测随访发现病毒突破时患者的血清ALT、HBV DNA水平,并采用PCR产物直接测序法分析HBV P区基因的变异发生情况。结果51例患者中有37例检测出阿德福韦酯耐药相关变异,且rt181位点变异多于rt236位点(分别为33例和8例,其中两位点联合变异4例,P<0.001)。联合变异患者其血清HBV DNA水平高于单一变异患者[分别为(6.53±0.45)log10拷贝/mL、(5.37±1.08)log10拷贝/mL,P=0.043]。结论在应用阿德福韦酯单药治疗的慢乙肝患者中可筛选出HBV P基因区的相关耐药变异,不同耐药位点患者的HBV DNA水平可有差异。

ntPCR-RFLP检测HBV阿德福韦耐药变异-rtN236T变异

目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV) 阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法. 方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraI酶切位点(5’TTTAAA3’),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点.同时PCR扩增2份已行HBVRT区基因测序证实未出现rtN236T 变异的慢性乙型肝炎患者血清及自行构建的对照质粒,扩增产物经DraI酶切,30 g/L琼脂糖凝胶电泳后,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析. 结果:所建立的ntPCtk-RFLP方法灵敏度高,可以检测到106copies/L的HBV DNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致. 结论:ntPCR-RFLP方法灵敏、特异、简便、实用,适用于ADV耐药变异的临床监测工作.

拉米夫定治疗中病毒核酸无应答患者体内乙型肝炎病毒逆转录酶基因变异分析

目的:了解拉米夫定病毒核酸无应答与HBV逆转录酶基因变异之间的关系. 方法:采用PCR产物直接测序方法对3例病毒核酸无应答患者体内HBV RT区基因序列治疗前后的变异情况进行分析. 结果:治疗前后6份标本核苷酸变异率为0.63-1.52%,氨基酸变异率为0.38-1.90%,其中出现rtY203H、rtS256C、rtL269Ⅰ变异的频率较高,此外尚有1例出现rtL180M变异. 结论:拉米夫定治疗中病毒核酸无应答可能与HBV RT区基因变异有关.

干扰素和利巴韦林联合用药对慢性丙型肝炎患者肝组织中α-SMA、TIMP-1的影响

目的:探讨干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎,不同治疗效果组其肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的变化。方法:23例慢性丙型肝炎患者采用干扰素α-2b联合利巴韦林片治疗48周,据治疗结束和随访24周病毒学的结果分为持续病毒学应答(SVR)组和非SVR组。应用两步法对治疗前后肝组织中α-SMA及TIMP-1进行免疫组化染色,对其结果采用BI-2000免疫组化图像分析系统进行定量分析。结果:在SVR组,治疗后肝组织中的α-SMA及TIMP-1较治疗前明显下降(P<0.05);而在非SVR组,治疗后α-SMA及TIMP-1均较治疗前下降,但其差异无统计学意义(P均>0.05)。在SVR组和非SVR组之间,α-SMA及TIMP-1表达的下降具有统计学意义(P<0.05)。结论:干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎,可以通过降低α-SMA及TIMP-1的表达而具有抗纤维化的作用。获得SVR者其肝纤维化得到明显改善。

脾切除对乙型肝炎肝硬化患者外周血T细胞及其活化抗原HLA-DR的影响

目的:检测乙型肝炎肝硬化脾切除患者外周血T细胞活化抗原HLA-DR的表达水平,探讨其临床意义。方法:以28例乙型肝炎肝硬化脾切除患者为实验组(肝硬化脾切除组),同时以38例乙型肝炎肝硬化非脾切除患者和22例健康人为对照组(肝硬化非脾切除组、健康组)。采用流式细胞技术检测外周血T淋巴细胞亚群及HLA-DR抗原的表达。结果:肝硬化脾切除组患者外周血CD3+、CD4+和CD8+百分含量分别为(41.59±6.79)%,(22.64±6.87)%和(19.16±7.28)%,显著低于健康组和肝硬化非脾切除组。肝硬化脾切除组患者CD4+/CD8+的比值显著高于健康组;HLA-DR在CD3+、CD4+和CD8+上的表达水平分别为(25.42±5.51)%,(22.36±4.90)%和(28.53±8.35)%,与健康组相比差异无统计学意义,但在CD3+和CD8+上的表达水平显著低于肝硬化非脾切除组。结论:肝硬化脾切除患者存在细胞免疫功能缺陷,表现为T细胞数量的减少和活化功能的下降。

慢性乙型肝炎肝硬化淋巴细胞亚群及HLA-DR抗原的表达

目的检测慢性乙型肝炎和肝硬化患者外周血淋巴细胞亚群和T细胞活化抗原HLA-DR的表达,探讨其免疫功能变化及临床意义。方法研究对象为慢性乙型肝炎和肝硬化患者,共127例,其中慢性乙型肝炎61例(轻度17例,中度25例,重度19例),肝硬化66例(脾切除28例,非脾切除38例),同时设立健康对照组22例。采用流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞亚群和T细胞活化抗原HLA-DR。结果慢性重度乙型肝炎患者CD_8^+细胞高于健康对照组,慢性轻度和中度乙型肝炎CD_8^+细胞与健康对照组无差异;肝硬化脾切除及非脾切除患者CD_3^+和CD_8^+细胞低于健康对照组,肝硬化脾切除患者同时有CD_4^+细胞下降。肝硬化脾切除患者CD3+、CD_4^+和CD_8^+细胞低于非脾切除组;肝硬化脾切除及非脾切除患者CD_(19)^+高于健康对照组;肝硬化脾切除组HLA-DR抗原与健康对照组无差异,其余各组均高于健康对照组。肝硬化脾切除患者CD_3^+ DR^+和CD_8^+ DR^+抗原低于肝硬化非脾切除组。结论慢性乙型肝炎和肝硬化患者存在一定的免疫功能紊乱现象,主要表现为T细胞数量失衡和活化异常,以肝硬化脾切除患者最为明显。

47例HBeAg阴性慢性乙型肝炎拉米夫定停药后疗效持久性研究

目的:研究HBeAg阴性慢性乙型肝炎(HBeAg阴性慢乙肝)停药后拉米夫定疗效的持久性及影响因素。方法:对47例使用拉米夫定总疗程≥24月、HBV-DNA阴转达18个月以上HBeAg阴性慢乙肝,分别于停药后进行肝脏生化学、HBV-DNA检测和随访观察。结果:停药后3、6、12、24和36个月累计复发率分别为25.5%、25.5%、41.8%、48.3%和54.8%。复发23例,在4、9和12个月的复发累计病例分别占复发病例的52.2%、65.2%和82.6%,复发最长的1例为39个月。停药时的年龄与拉米夫定停药后疗效持久性有关。结论:HBeAg阴性慢乙肝拉米夫定停药后疗效持久性较HBeAg阳性低,年龄轻者复发率低。

ntPCR-RFLP检测HBV阿德福韦耐药变异-rtA181V变异

目的:建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异- rtA181V变异的快速检测方法．方法:根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt181 A)PCR产物中含有Blp Ⅰ酶切位点(5’GCTNAGC3’),而变异株(rt181V)无此限制性酶切位点．选取4份应用ADV治疗1 a以上出现HBV DNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、Blp Ⅰ酶切、30 g／L琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析．并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各一例进行 HBV RT区基因序列分析及对照质粒的构建．结果:自4份血清标本中检测到2例rtA181V变异．所建立的ntPCR—RFLP方法灵敏度高,可以检测到103 copies／L的HBV DNA;特异性强,其 RFLP分析结果与DNA测序结果一致．结论:应用ntPCR-RFLP方法检测rtA181V 变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于 ADV耐药变异的临床监测工作．

分子吸附再循环系统治疗慢性重型乙型病毒性肝炎的疗效评价——附57例报告

目的:评价分子吸附再循环系统(molecular adsorbent recirculating system,MARS)治疗慢性重型乙型病毒性肝炎(慢重肝)的疗效。方法:将116例慢重肝患者随机分为2组,治疗组57例采用MARS联合内科综合治疗,对照组59例则只予内科综合治疗,比较2组患者治疗4周后的临床疗效,观察治疗组患者在MARS治疗过程中发生的不良反应,对比2组患者的生存情况。结果:治疗组57例患者,MARS治疗共126次,平均2.2次。治疗4周后,治疗组有效率68%,对照组为49%,治疗组有效率高于对照组(P<0.05)。其中治疗组早、中、晚期慢重肝的有效率分别为89%、62%、1/8,3者比较差异有统计学意义(均为P<0.05)。治疗组126次MARS治疗中仅发生8次(6%)轻微不良反应,未影响继续治疗。治疗组中期慢重肝患者生存期较对照组同类患者明显延长(P<0.05)。结论:MARS治疗慢重肝短期疗效确切,可延长中期慢重肝患者生存时间。

应用巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异-rtN236T变异

目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5′TTTAAA3′),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBVDNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、DraⅠ酶切、3%琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBVRT区基因序列分析。结果自4份血清标本中检测到1例rtN236T变异。所建立的ntPCR-RFLP方法灵敏度高,可以检测到103copies/L的HBVDNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致。结论应用ntPCR-RFLP方法检测rtN236T变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于ADV耐药变异的临床监测工作。

YMDD变异阴性的拉米夫定表型耐药患者体内乙型肝炎病毒逆转录酶基因序列分析

目的:了解YMDD变异阴性的拉米夫定耐药患者体内HBV逆转录酶基因变异情况.方法:采用PCR产物直接测序方法对3例YMDD变异阴性的拉米夫定耐药患者体内HBVRT区基因序列进行分析.结果:3份标本核苷酸变异率为0.24—0.85%,氨基酸变异率均为0.73%,较既往GenBank中收录的HBVC型基因序列的变异率无明显差别.发现以往已发表序列中未出现的新型变异-rtQ125N变异.结论:部分拉米夫定表型耐药现象的出现可能与HBVRT区基因变异无关.

血浆渗透压与肝肾综合征预后的关系

目的探讨血浆渗透压评分对肝肾综合征(HRS)预后的评价作用。方法研究对象为106例HRS患者,按随访3月内的预后情况分为生存组(30例)和死亡组(76例),分别进行血浆有效晶体渗透压评分、胶体渗透压评分、血浆渗透压综合评分、MELD及Child-Pugh评分,进行统计学分析,比较各评分对HRS预后的评价能力。结果 HRS死亡组除血浆有效晶体渗透压单项评分外,其余各评分均高于存活组(P<0.01)。血浆有效晶体渗透压单项评分和胶体渗透压单项评分的AUC均<0.7,Child-Pugh评分、MELD评分和血浆渗透压综合评分的AUC均>0.7。Youden指数以血浆渗透压综合评分为最高,MELD评分和Child-Pugh评分次之。结论 Child-Pugh评分、MELD评分和血浆渗透压综合评分对HRS预后均具有良好的评价作用,其中以血浆渗透压综合评分的预测能力最佳。

泛昔洛韦和拉米夫定治疗慢性乙肝的短期疗效对比研究

比较和评价泛昔洛韦和拉米夫定短期治疗慢性乙肝的疗效。将101例慢性乙肝患者,随机分为泛昔洛韦组(A组)1500mg/日分三次(4个月)、拉米夫定组(B组)100mg/日和对照组(C组)。结果显示,治疗4个月时①A、B和C组ALT的复常率分别为74.0%、82.5%和63.3%。②A和B组HBV DNA的阴转率为64.5%和90.0%均显著高于C组(16.5%),P<0.001;B组明显高于A组,P=0.017。③A和B组HBeAg血清转化率达27.3%和25.8%,高于C组(13.0%),但P>0.05。④A组HBV DNA阴转的20例患者,在停药后2、4和6月时其持续应答率分别为65.0%、45.0%和25.0%。表明泛昔洛韦和拉米夫定对慢性乙肝均有治疗效果,拉米夫定的抗病毒作用和疗效明显优于泛昔洛韦。

1996-2008年1731例麻疹住院病人的流行病学特征及临床特点分析

目的:分析近1996-2004年济南市传染病医院收治的麻疹住院病人的流行病学特征及临床特点,为进一步制定防治策略及改善预防措施提供依据。方法:收集1731例确诊麻疹住院病人的流行病学资料及临床资料,对资料进行数理分析。结果与结论:1996-2004年麻疹患者住院病例数在低水平波动[(11～38例)/年]。自2005年麻疹住院病例数开始增加,2008年最多,达811例。1731例麻疹病人的发病年龄有2个高峰,分别为8月龄～9岁(54·59%)和20～29岁(15·02%)。此外,计划免疫接种前婴儿(8月龄内)发病人数占11·84%。全年均有发病,高峰为2-6月份(62·68%)。均有发热及皮疹,多有卡他症状,眼结膜充血等发生并发症711例(41·07%)。死亡4例,均合并严重的肺部感染。麻疹仍为危害人类健康的重要疾病,出生于强化免疫(1999年)后的8月龄～9岁儿童所占比例较高,必须加强该年龄段的儿童麻疹计划免疫,减少漏种;鉴于8月龄内患儿占相当比例,建议麻疹计划免疫时间适当提前至6月龄;有必要对成年人群进行麻疹疫苗强化或补种,以降低其发病率;重视并发症的治疗,以降低病死率。

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者YMDD变异及影响因素的研究

目的 探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(简称慢乙肝)患者过程中YMDD变异的发生率及影响因素。 方法 对采用拉米夫定治疗的249例慢乙肝和64例乙型肝炎肝硬化(简称乙肝肝硬化)患者采用错配聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析的方法检测了乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶YMDD变异,并应用SPSS统计软件对YMDD变异发生率和影响YMDD变异发生的因素进行统计学分析。 结果 随治疗时间的延长,YMDD变异的累计发生率逐渐升高;慢乙肝和乙肝肝硬化患者YMDD变异率于12、24、36、48个月分别达8.84％和17.19％、20.91％和32.40％、26.92％和39.56％、26.92％和58.79％。时序检验及Cox回归分折的结果均表明:未联台干扰素治疗,基线丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平较低、HBV DNA水平较高和治疗前诊断为肝硬化者均与YMDD变异的较早出现有关(P<0.05)。 结论 拉米夫定治疗慢乙肝患者,未联合干扰素治疗、基线ALT水平较它低、HBV DNA水平较高和乙肝肝硬化可作为YMDD变异发生的预测因子.

结缔组织生长因子的肝内表达与肝纤维化的关系

肝纤维化和肝硬化的成因相当复杂,目前已认识到纤维化的特征是细胞增殖和细胞外基质的聚集,并需转化生长因子（TGF）-β和血小板活化因子等大量介质的参与.结缔组织生长因子（CTGF）是TGF的下游效应介质,具有明显的丝裂原性和趋化性,能诱导成纤维细胞增殖和分泌细胞外基质,参与调节细胞增生、分化、胚胎发育以及伤口愈合[1].我们探讨了CTGF与肝纤维化的关系,现报道如下.