目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NUTM2B-AS1在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移的影响及分子机制。方法采用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中NUTM2B-...目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NUTM2B-AS1在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移的影响及分子机制。方法采用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中NUTM2B-AS1表达水平。qRT-PCR法检测口腔上皮角质细胞HOK、口腔鳞状细胞癌细胞系Cal-27、SCC-25、SCC-9、HSC-3中NUTM2B-AS1表达水平。Cal-27细胞分别转染NUTM2B-AS1过表达载体(pmirGLO-NUTM2B-AS1)和空载体(pmirGLO),记为NUTM2B-AS1组和对照组,qRT-PCR验证每组细胞中NUTM2B-AS1表达水平。Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测Cal-27细胞侵袭和迁移。生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验验证NUTM2B-AS1和miR-770-5p的靶向关系。qRT-PCR检测Cal-27细胞miR-770-5p的表达,Western blot检测Cal-27细胞Sirt7/Smad4信号通路蛋白(Sirt7、E-cadherin、Smad4、MMP-7、Vimentin)的表达。结果与癌旁组织比较,口腔鳞状细胞癌组织中NUTM2B-AS1表达显著降低(P<0.01)。与HOK细胞比较,口腔鳞状细胞癌细胞系Cal-27、SCC-25、SCC-9、HSC-3中NUTM2B-AS1表达显著降低(P<0.01),Cal-27细胞中NUTM2B-AS1表达最低(P<0.01)。与对照组比较,NUTM2B-AS1组Cal-27细胞中NUTM2B-AS1表达显著升高(P<0.01)。与对照组比较,NUTM2B-AS1组Cal-27细胞侵袭数显著降低(P<0.01),Cal-27细胞划痕愈合率显著降低(P<0.01)。miR-770-5p是NUTM2B-AS1的靶向结合基因(P<0.01)。与对照组相比,NUTM2B-AS1组Cal-27细胞中miR-770-5p表达显著降低(P<0.01),Sirt7、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.01),Smad4、MMP-7、Vimentin蛋白表达下降(P<0.01)。结论NUTM2B-AS1在口腔鳞状细胞癌组织和细胞系中低表达,高表达NUTM2B-AS1可抑制口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移,其作用机制与靶向下调miR-770-5p表达有关。展开更多
文摘目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NUTM2B-AS1在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及对口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移的影响及分子机制。方法采用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中NUTM2B-AS1表达水平。qRT-PCR法检测口腔上皮角质细胞HOK、口腔鳞状细胞癌细胞系Cal-27、SCC-25、SCC-9、HSC-3中NUTM2B-AS1表达水平。Cal-27细胞分别转染NUTM2B-AS1过表达载体(pmirGLO-NUTM2B-AS1)和空载体(pmirGLO),记为NUTM2B-AS1组和对照组,qRT-PCR验证每组细胞中NUTM2B-AS1表达水平。Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测Cal-27细胞侵袭和迁移。生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验验证NUTM2B-AS1和miR-770-5p的靶向关系。qRT-PCR检测Cal-27细胞miR-770-5p的表达,Western blot检测Cal-27细胞Sirt7/Smad4信号通路蛋白(Sirt7、E-cadherin、Smad4、MMP-7、Vimentin)的表达。结果与癌旁组织比较,口腔鳞状细胞癌组织中NUTM2B-AS1表达显著降低(P<0.01)。与HOK细胞比较,口腔鳞状细胞癌细胞系Cal-27、SCC-25、SCC-9、HSC-3中NUTM2B-AS1表达显著降低(P<0.01),Cal-27细胞中NUTM2B-AS1表达最低(P<0.01)。与对照组比较,NUTM2B-AS1组Cal-27细胞中NUTM2B-AS1表达显著升高(P<0.01)。与对照组比较,NUTM2B-AS1组Cal-27细胞侵袭数显著降低(P<0.01),Cal-27细胞划痕愈合率显著降低(P<0.01)。miR-770-5p是NUTM2B-AS1的靶向结合基因(P<0.01)。与对照组相比,NUTM2B-AS1组Cal-27细胞中miR-770-5p表达显著降低(P<0.01),Sirt7、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.01),Smad4、MMP-7、Vimentin蛋白表达下降(P<0.01)。结论NUTM2B-AS1在口腔鳞状细胞癌组织和细胞系中低表达,高表达NUTM2B-AS1可抑制口腔鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移,其作用机制与靶向下调miR-770-5p表达有关。