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生理能力和手术应激评分与原发性肝癌患者 根治性肝切除术围术期并发症的关系
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作者 田丽君 桑玉洁 +4 位作者 李雪琰 徐万辉 姜嘉琦 秦成勇 祁建妮 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 CAS 2024年第6期321-325,共5页
目的研究生理能力和手术应激评分(estimation of physiologic ability and surgical stress,E⁃PASS)与原发性肝癌患者根治性肝切除术围术期并发症的关系。方法回顾性选择山东省立医院2022年3月—2023年5月收住入院的原发性肝癌患者124... 目的研究生理能力和手术应激评分(estimation of physiologic ability and surgical stress,E⁃PASS)与原发性肝癌患者根治性肝切除术围术期并发症的关系。方法回顾性选择山东省立医院2022年3月—2023年5月收住入院的原发性肝癌患者124例作为研究对象,均在本院接受根治性肝切除术。统计围术期并发症情况,按是否发生并发症分为发生组(n=29)和未发生组(n=95),对比两组患者临床资料和疾病相关特征,并进行E⁃PASS评价,采取多因素logistic回归方程分析根治性肝切除术围术期并发症和各指标的关系,并绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,预测E⁃PASS评价原发性肝癌患者根治性肝切除术围术期并发症的价值。结果124例接受根治性肝切除术的患者中,围术期出现并发症的患者有29例(23.39%),其中肝功能衰竭2例(1.61%)、胸腔积液6例(4.84%)、腹腔脓肿4例(3.23%)、术后出血8例(6.45%)、腹腔感染9例(7.26%);另外,未发生并发症的患者有95例(76.61%)。发生组和未发生组在年龄、术中出血量、术前总胆红素、术前白蛋白方面相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。发生组术前风险分值(preoperative risk score,PRS)、手术应激分值(surgical stress score,SSS)、综合风险分值(composite risk score,CRS)评分均高于未发生组,差异均有统计学意义(P<0.05)。经多因素logistic回归方程分析,发现PRS、SSS、CRS均会对原发性肝癌患者根治性肝切除术围术期并发症产生显著的正向影响关系(P<0.05)。通过绘制ROC曲线,发现E⁃PASS预测根治性肝切除术围术期并发症存在一定价值,其曲线下面积(area under the curve,AUC)分别是0.617、0.614、0.601。结论原发性肝癌患者经根治性肝切除术后,围术期并发症发生率较高,需引起重视,且通过E-PASS预测其围术期并发症的价值较高,值得临床推广使用。 展开更多
关键词 原发性肝癌 根治性肝切除术 手术应激评分 生理能力
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银杏叶提取物治疗慢性乙型肝炎肝纤维化病人32例 被引量:14
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作者 王京 主余华 +2 位作者 任万华 张春清 马艳丽 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期44-47,共4页
目的:探讨银杏叶提取物(GbE761)对慢性乙型肝炎病人肝组织纤维化的影响。方法:将60例慢性乙型肝炎病人分为GbE761治疗组32例,年龄(34±s 13)a,16~55 a及对照组28例,年龄(34±14)a,17~57a,对照组给予常规治疗,治疗组给予常... 目的:探讨银杏叶提取物(GbE761)对慢性乙型肝炎病人肝组织纤维化的影响。方法:将60例慢性乙型肝炎病人分为GbE761治疗组32例,年龄(34±s 13)a,16~55 a及对照组28例,年龄(34±14)a,17~57a,对照组给予常规治疗,治疗组给予常规治疗加GbE761 20 mL,静脉滴注,每日1次,共4 wk,治疗前后分别检测肝功能、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)和转化生长因子β_1(TGF-β_1)。治疗组中5例分别于治疗前后进行肝活检术并行病理组织学检查。结果:治疗后2组的肝功能水平均较治疗前显著好转,但2组比较无差异(P>0.05)。治疗组治疗后PCⅢ,CⅣ,HA,LN及TGF-β_1水平分别下降(139±65)μg·L^(-1),(90±41)μg·L^(-1),(84±51)μg·L^(-1),(93±33)μg·L^(-1),(27±7)μg·L^(-1)(P<0.01),而对照组PCⅢ,CⅣ,HA,LN及TGF-β_1水平无明显变化(P>0.05)。治疗组5例肝活检证实,治疗后肝脏纤维化程度减轻,细胞损伤减轻。结论:GbE761对慢性乙型肝炎有显著的抗肝纤维化作用。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 细胞外基质 转化生长因子Β 银杏叶提取物
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银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及转化生长因子和结缔组织生长因子基因表达的影响 被引量:7
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作者 主余华 张春清 +2 位作者 许洪伟 任万华 吕晓霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1316-1321,共6页
目的:研究银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及细胞因子TGF-β1、CTGF mRNA及蛋白表达的影响,以探讨银杏叶提取物抗肝纤维化的可能机制。方法:用不同浓度(0、1、10、100、500mg/L)的银杏叶提取物处理HSC-T6,用MTT及流式细胞仪检测其对肝星... 目的:研究银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及细胞因子TGF-β1、CTGF mRNA及蛋白表达的影响,以探讨银杏叶提取物抗肝纤维化的可能机制。方法:用不同浓度(0、1、10、100、500mg/L)的银杏叶提取物处理HSC-T6,用MTT及流式细胞仪检测其对肝星状细胞增殖及细胞周期的影响,用RT-PCR及Western blotting检测培养24h及48h后各组细胞中TGF-β1、CTGF mRNA及蛋白的表达。结果:银杏叶提取物10、100、500mg/L可抑制肝星状细胞的增殖,与空白对照组相比,G0/G1期DNA含量逐渐增加(P<0.05或P<0.01),S期DNA含量则逐渐降低(P<0.01),增殖指数(PI)逐渐降低(P<0.05或P<0.01);24h各组TGF-β1mRNA及蛋白表达较对照组分别低(28±4)%、(39±4)%、(45±3)%(P<0.01);(27±4)%、(37±4)%、(41±3)%(P<0.01);48h组各组TGF-β1mRNA及蛋白表达较对照组分别低(35±4)%、(49±3)%、(54±3)%(P<0.01);(33±4)%、(48±3)%、(52±3)%(P<0.01);4h各组CTGF mRNA及蛋白表达较对照组分别低(29±6)%、(45±4)%、(56±3)%(P<0.01);(36±4)%、(48±4)%、(49±3)%(P<0.01);48h组各组CTGF mRNA及蛋白表达较对照组分别低(48±6)%、(57±4)%、(69±3)%(P<0.01);(44±6)%、(58±4)%、(62±3)%(P<0.01)。结论:银杏叶提取物可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制细胞因子TGF-β1、CTGF基因的表达发挥其抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 二裂银杏 肝星状细胞 转化生长因子Β 结缔组织生长因子 基因表达
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P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白在胃癌的表达与化疗敏感性的相关性研究 被引量:9
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作者 许洪伟 丛衍群 +3 位作者 王万忠 姜军梅 秦成坤 秦成勇 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第7期594-597,601,共5页
目的:探讨胃癌组织中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrugresis-tance-associatedprotein,MRP)的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法:应用免疫组化法检测P-gp及MRP在48例胃癌及癌旁组织的... 目的:探讨胃癌组织中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrugresis-tance-associatedprotein,MRP)的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法:应用免疫组化法检测P-gp及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达,同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验,检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性,进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性。结果:在48例胃癌中,P-gp及MRP阳性率分别为41.7%、29.2%,共同表达率为25.0%。癌旁组织与癌组织的P-gp、MRP阳性表达率无显著差异。在顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、鬼臼乙叉甙(VP-16)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、羟基喜树碱(HCPT)、甲氨蝶呤(MTX)中,ADM、VP-16、HCPT耐药组P-gp、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高。结论:胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药。P-gp、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素。 展开更多
关键词 胃肿瘤 P-糖蛋白 多药耐药相关蛋白质类 化疗敏感性 免疫组织化学
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苯丁酸钠对人肝癌细胞分化及P^(21WAF1/CIP1)表达的调控 被引量:4
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作者 孟玫 姜军梅 +2 位作者 尹晓燕 秦成勇 朱菊人 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期181-184,共4页
目的:探讨苯丁酸钠诱导人肝癌细胞Bel7402,HepG2生长抑制、分化和细胞周期阻滞,以及对抑癌基因P21WAF1 /CIP1表达的影响。方法:培养Bel7402,HepG2,应用MTT比色法观察苯丁酸钠对Bel7402,HepG2的生长抑制作用,倒置相差显微镜观察细胞形态... 目的:探讨苯丁酸钠诱导人肝癌细胞Bel7402,HepG2生长抑制、分化和细胞周期阻滞,以及对抑癌基因P21WAF1 /CIP1表达的影响。方法:培养Bel7402,HepG2,应用MTT比色法观察苯丁酸钠对Bel7402,HepG2的生长抑制作用,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术分析细胞周期,以RTPCR检测Bel 7402,HepG2细胞中P21WAF1 /CIP1基因表达水平,WESTERN印记法检测P21WAF1 /CIP1蛋白的表达。结果:苯丁酸钠 2, 4, 8mmol·L-1处理 72h后Bel 7402, HepG2 的抑制率分别为 28. 43 %,57. 61 %, 71. 32 %和 27. 42 %, 57. 11 %, 70. 31 %处理后的细胞成纤维母细胞样改变,细胞阻滞于G期,P21WAF1 /CIP1基因和蛋白表达水平均增强。结论:苯丁酸钠抑制 2种人肝癌细胞株的生长,诱导部分人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,苯丁酸钠能诱导P21WAF1 /CIP1基因的表达,增加P21WAF1 /CIP1蛋白的表达水平。 展开更多
关键词 基因表达 组蛋白 细胞周期 去乙酰化酶 苯丁酸钠
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HLA-DRB~*1201/~*1501与HBV感染不同状态的相关性 被引量:9
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作者 袁俊华 崔萌 +1 位作者 孙成刚 于会莉 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第5期428-431,共4页
目的:探讨HBV感染的不同状态与HLA-DRB1等位基因之间的相关性。方法:采用聚合酶链反应/序列特异性引物技术(PCR/SSP)分别对慢性乙型肝炎组、HBV携带组、HBV感染后自然恢复组和正常对照组进行HLA-DRB1等位基因的检测。结果:HLA-DRB1觹12... 目的:探讨HBV感染的不同状态与HLA-DRB1等位基因之间的相关性。方法:采用聚合酶链反应/序列特异性引物技术(PCR/SSP)分别对慢性乙型肝炎组、HBV携带组、HBV感染后自然恢复组和正常对照组进行HLA-DRB1等位基因的检测。结果:HLA-DRB1觹1201/觹1501在慢性乙型肝炎组和HBV携带组出现的频率均明显高于正常对照组(均为P<0.01),HLA-DRB1觹1201在乙肝肝硬化患者、HLA-DRB1觹1501在原发性肝癌患者中出现的频率与正常对照组比较具有统计学意义(P<0.05,Pc<0.01)。结论:HLA-DRB1觹1201/觹1501可能是慢性乙型肝炎和HBV携带者的易感基因,而HLA-DRB1觹1201还可能是乙肝肝硬化的易感基因,HLA-DRB1觹1501可能是原发性肝癌的易感基因。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 肝硬化 肝肿瘤 聚合酶链反应
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银杏叶提取物对肝星状细胞TGF-β_1,CTGF及细胞外基质表达的影响 被引量:2
7
作者 张春清 主余华 +3 位作者 任万华 许洪伟 秦成勇 吕晓霞 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期184-188,共5页
目的:研究银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及转化生长因子(TCF)-β1、结缔组织生长因子(CTCF) mRNA表达及细胞外基质分泌的影响。方法:用不同浓度(0,1,10,100,500 mg·L-1)的银杏叶提取物处理 HSC-T6 24 h及48 h后,用逆转录聚合酶链反... 目的:研究银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及转化生长因子(TCF)-β1、结缔组织生长因子(CTCF) mRNA表达及细胞外基质分泌的影响。方法:用不同浓度(0,1,10,100,500 mg·L-1)的银杏叶提取物处理 HSC-T6 24 h及48 h后,用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测各组细胞及空白对照组中TGF—β1,CTGF mRNA的表达;放射免疫法分析上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量;MTT及流式细胞仪检测其对肝星状细胞增殖及细胞周期的影响。结果:银杏叶提取物10,100,500 mg·L-1能明显抑制 TGF-β1和CTGF mRNA的表达,降低上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量 (P<0.01或P<0.05),在一定范围内呈随剂量增加及时间的延长,抑制效率增加;并可抑制肝星状细胞的增殖,影响HSC-T6的细胞周期,使细胞周期阻滞于G1期。结论:银杏叶提取物可明显抑制HSC-T6的增殖,降低其细胞因子基因表达及细胞外基质的分泌。 展开更多
关键词 转化生长因子 基因表达 细胞外基质 银杏叶提取物 肝星状细胞 结缔组织生长团子
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奥曲肽逆转肝癌细胞多药耐药机制的初步研究 被引量:2
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作者 李文欢 崔屹 +1 位作者 乔惠梅 朱菊人 《山东大学学报(医学版)》 CAS 2004年第3期290-293,共4页
目的:探讨生长抑素类似物奥曲肽(octreotide)逆转肝癌细胞多药耐药,增加肝癌细胞对化疗药物敏感性的机制?方法:应用MTT法分析肝癌细胞对化疗药物的敏感性;用RT-PCR?流式细胞术检测肝癌细胞多药耐药基因MDR1?MRP2 mRNA蛋白质的表达?结果... 目的:探讨生长抑素类似物奥曲肽(octreotide)逆转肝癌细胞多药耐药,增加肝癌细胞对化疗药物敏感性的机制?方法:应用MTT法分析肝癌细胞对化疗药物的敏感性;用RT-PCR?流式细胞术检测肝癌细胞多药耐药基因MDR1?MRP2 mRNA蛋白质的表达?结果:奥曲肽联合化疗药物可以显著降低各化疗药物的IC50?肝癌原代培养细胞有SSTR2?SSTR3?MDR1?MRP2的表达,奥曲肽可以显著降低肝癌细胞表面MDR1?MRP2的表达?结论:奥曲肽可以与肝癌细胞表面的SSTR结合,降低肝癌细胞表面MDR1?MRP2的表达,从而使细胞内细胞毒药物浓度增加,逆转肝癌细胞多药耐药? 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞 基因 MDR 多药耐药相关蛋白质类 生长抑素
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自分泌一氧化氮对人肝癌细胞Bel-7402增殖及凋亡的影响 被引量:1
9
作者 尹晓燕 姜军梅 +2 位作者 朱菊人 许洪伟 张春清 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第10期942-944,共3页
目的:观察人肝癌细胞Bel7402自分泌的一氧化氮对其增殖及凋亡的影响。方法:MTT法观察L精氨酸(LArg)及内毒素穴LPS雪联合LArg对细胞增殖的影响,免疫组化法检测iNOS在细胞中的表达,TUNEL法观察NO对细胞凋亡的影响。结果:低浓度LArg对细胞... 目的:观察人肝癌细胞Bel7402自分泌的一氧化氮对其增殖及凋亡的影响。方法:MTT法观察L精氨酸(LArg)及内毒素穴LPS雪联合LArg对细胞增殖的影响,免疫组化法检测iNOS在细胞中的表达,TUNEL法观察NO对细胞凋亡的影响。结果:低浓度LArg对细胞增殖有促进作用,高浓度抑制细胞增殖。LPS使iNOS表达增强,协同LArg抑制细胞增殖。高浓度NO促进细胞凋亡。结论:低浓度NO促进细胞增殖,高浓度NO抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 内源性一氧化氮 一氧化氮合酶 L-精氨酸 内毒素 增殖 细胞凋亡
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发卡样CTGF特异性RNA干扰重组体的构建及筛选 被引量:1
10
作者 主余华 张春清 +2 位作者 任万华 马艳丽 赵幼安 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第4期351-356,共6页
目的:利用Pgenesil-1质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA表达的质粒,并筛选有效的抑制序列。方法:分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列,经退火成互补双链,再克隆至带有U6启动子的质粒载体Pgenesil-1... 目的:利用Pgenesil-1质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA表达的质粒,并筛选有效的抑制序列。方法:分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列,经退火成互补双链,再克隆至带有U6启动子的质粒载体Pgenesil-1中,构建重组体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析。将构建成功的4组重组体转染HSC-T6 24 h后,通过半定量RT-PCR分析HSC-T6 CTGFmRNA的表达水平,与空白对照及仅加转染试剂组比较分析。结果:CTGF的shR-NA片段被成功克隆到Pgenesil-1质粒载体中,经酶切与测序证实构建成功,转染HSC-T6 24 h后,与空白对照组相比,通过半定量RT-PCR分析发现有两组细胞CTGFmRNA水平明显下降,24 h抑制效率分别为(74±5)%,(P<0.01);(61±3)%,(P<0.05)。转染非特异shRNA组及仅加转染试剂组CTGFmRNA表达水平无明显变化。结论:成功构建了能表达CTGFshRNA的3组重组体,并筛选出能高效抑制CTGF表达的shRNA序列,为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径奠定了实验基础。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 RNA干扰 短发夹RNA 质粒 肝纤维化 基因表达
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5-氟尿嘧啶联合L-精氨酸治疗裸鼠人肝癌移植瘤的研究 被引量:1
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作者 尹晓燕 姜军梅 +1 位作者 刘吉勇 朱菊人 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期559-562,共4页
目的观察5氟尿嘧啶联合L精氨酸对裸鼠人肝癌移植瘤的作用并探讨其作用机制。方法采用BEL7402细胞株建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,分别给裸鼠腹腔注射生理盐水,5氟尿嘧啶,5氟尿嘧啶+L精氨酸,观察各组药物对肿瘤的抑制作用,病理学观察移植瘤... 目的观察5氟尿嘧啶联合L精氨酸对裸鼠人肝癌移植瘤的作用并探讨其作用机制。方法采用BEL7402细胞株建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,分别给裸鼠腹腔注射生理盐水,5氟尿嘧啶,5氟尿嘧啶+L精氨酸,观察各组药物对肿瘤的抑制作用,病理学观察移植瘤的坏死程度和范围,免疫组化测定移植瘤组织内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。化学比色法检测诱导型一氧化氮合酶的活性。硝酸还原酶法检测瘤组织内的一氧化氮的浓度,统计分析采用SPSS10.0软件进行onewayANOVA,Bonferroni,KruskalWallisH检验。结果5氟尿嘧啶联合L精氨酸能明显增加对肿瘤生长的抑制作用,病理显示肿瘤的坏死范围增大,iNOS表达和活性增强,NO生成增加。结论5氟尿嘧啶联合L精氨酸能够抑制裸鼠人肝癌移植瘤的生长,其机制可能与诱导iNOS表达和活性增强,NO生成增加有关。 展开更多
关键词 5-氟尿嘧啶 L-精氨酸 动物模型 一氧化氮合酶 氧化氮
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5-氟尿嘧啶联合L-精氨酸治疗裸鼠人肝癌移植瘤及其机制 被引量:2
12
作者 尹晓燕 姜军梅 朱菊人 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第10期2475-2478,共4页
目的:观察5-FU联合L-Arg对裸鼠人肝癌移植瘤的作用并探讨其作用机制.方法:采用BEL-7402细胞株建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,分别给裸鼠ip生理盐水,5-FU,5-FU+L-Arg,观察各组药物对肿瘤的抑制作用,病理学观察移植瘤的坏死程度和范围.免疫组... 目的:观察5-FU联合L-Arg对裸鼠人肝癌移植瘤的作用并探讨其作用机制.方法:采用BEL-7402细胞株建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,分别给裸鼠ip生理盐水,5-FU,5-FU+L-Arg,观察各组药物对肿瘤的抑制作用,病理学观察移植瘤的坏死程度和范围.免疫组化测定移植瘤组织内iNOS的表达.统计分析采用SPSS10.0软件进行one-wayANOVA,Kmskal-WailisH检验.结果:5-FU联合L-Arg能明显增加对肿瘤生长的抑制作用,对照组,5-FU组、5-FJ+L-Arg组的肿瘤体积增长分别为257.978±59.0、172.232±66.0、91.523±26.7mm3,方差分析F值为30.241,aP<0.05;bP<0.05,vsA,C;CP<0.05,vsB,C.肿瘤的坏死范围与用药有明显关系,5-FU+L-Arg组的坏死范围最大(X2=15.963,P<0.05),5-FU组、5-FU+L-Arg组的iNOS表明显增加,且5-FU+L-Arg组增加更加明显,与对照组比较P<0.05.结论:5-FU联合L-Arg能够抑制裸鼠人肝癌移植瘤的生长,其机制可能与诱导一氧化氮合酶合成,NO生成增加有关. 展开更多
关键词 5-氟尿嘧啶 L-精氨酸 治疗 肝癌 移植瘤 作用机制
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CTGF shRNA对肝星状细胞细胞因子及细胞外基质表达的影响 被引量:1
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作者 主余华 李肖红 +3 位作者 张春清 任万华 赵幼安 马艳丽 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第6期577-581,594,共6页
目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对肝星状细胞(HSC-T6)中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达及细胞外基质分泌的影响。方法:将已构建并筛选有效含绿色荧光蛋白(EGFP)的CTGFshRNA质粒以转染... 目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对肝星状细胞(HSC-T6)中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达及细胞外基质分泌的影响。方法:将已构建并筛选有效含绿色荧光蛋白(EGFP)的CTGFshRNA质粒以转染试剂Metafectene转染HSC-T6,另设空质粒组、只加Metafectene组及空白对照组,24 h及48 h后,用RT-PCR法检测各组细胞中TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达;放免法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量;流式细胞仪分析转染效率。结果:CTGFshRNA质粒在肝星状细胞的转染效率24 h、48 h分别为(60±5)%(、42±3)%;与空白对照组相比,空质粒组、脂质体组对基因表达及细胞外基质的分泌均无影响,而CTGFshRNA能明显抑制CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达,降低上清液中Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白的含量(P<0.01或P<0.05),而对TGF-β1的基因表达则无影响。结论:CTGFshRNA可明显抑制肝星状细胞CTGF、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因表达及细胞外基质的分泌。 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹RNA 转化生长因子Β 结缔组织生长因子 肝纤维化
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内毒素联合精氨酸对人肝癌细胞Bel-7402增生及凋亡的影响 被引量:1
14
作者 孟玫 姜军梅 +1 位作者 尹晓燕 朱菊人 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第9期2053-2056,共4页
目的:通过内毒素联合精氨酸诱导自分泌的一氧化氮(No)及其限速酶的表达,观察人肝癌细胞Bel-7402自分泌的一氧化氮的改变对其增生及凋亡的影响. 方法:Bel-7402细胞中NO产生的限速酶为诱生型合酶(iNOS),其底物为精氨酸(L-Arg).采用MTT法... 目的:通过内毒素联合精氨酸诱导自分泌的一氧化氮(No)及其限速酶的表达,观察人肝癌细胞Bel-7402自分泌的一氧化氮的改变对其增生及凋亡的影响. 方法:Bel-7402细胞中NO产生的限速酶为诱生型合酶(iNOS),其底物为精氨酸(L-Arg).采用MTT法观察不同浓度的L-Arg及内毒素(LPS)对细胞增生的影响.采用细胞免疫组化的方法对iNOS在细胞中的表达进行观察.Tunel 法观察NO对细胞凋亡的影响. 结果:在iNOS的表达不受影响的情况下,0.625 mmol/L的L-Arg产生低浓度的NO,对细胞的增生有促进作用(对照组0.86±0.01,处理组0.87±0.02 P>0.05),2.5 mmol/L- Arg产生高浓度的NO,对细胞的增生有抑制作用(对照组0.86±0.01,0.83±0.01 P<0.05).100 ng/L LPS使iNOS的表达增强,使单位时间内NO的生成增多,细胞增生受抑.与L-Arg有协同作用.高浓度的NO能够促进细胞的凋亡. 结论:LPS可能通过促进iNOS的产生,在精氨酸的协同作用下,促进细胞凋亡,抑制细胞增生. 展开更多
关键词 增生 NOS 内毒素 凋亡 精氨酸 L-ARG 人肝癌细胞 限速酶 合酶 BEL-7402细胞
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外源性FHIT基因对人胃癌细胞株MGC-803增殖与凋亡的影响 被引量:2
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作者 付信娟 许洪伟 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第5期455-458,共4页
目的:研究三联脆性组氨酸基因(fragile histidine triad,FHIT)对胃癌细胞株MGC-803增殖与凋亡作用的影响,并探讨FHIT基因的抑癌机制。方法:通过脂质体介导把质粒pRC/CMV-FHIT及pRC/CMV转染到有FHIT基因表达缺失的胃癌细胞株MGC-803,用G... 目的:研究三联脆性组氨酸基因(fragile histidine triad,FHIT)对胃癌细胞株MGC-803增殖与凋亡作用的影响,并探讨FHIT基因的抑癌机制。方法:通过脂质体介导把质粒pRC/CMV-FHIT及pRC/CMV转染到有FHIT基因表达缺失的胃癌细胞株MGC-803,用G418对转染后细胞进行筛选,用Western blot对获得G418抗性的细胞进行FHIT基因表达的鉴定。用MTT法、克隆形成试验及流式细胞术观察转染前后细胞生长特性的变化。结果:转染FHIT基因的MGC-803细胞有外源性FHIT基因的表达,其增殖活性减弱、克隆形成能力降低、凋亡率增加、生长周期出现明显的G0/G1期阻滞,且与对照组差异均有统计学意义。结论:向胃癌细胞中导入外源性FHIT基因可以抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡并引起细胞生长周期阻滞。 展开更多
关键词 三联脆性组氨酸基因 胃肿瘤 基因转染 增殖 凋亡
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银杏叶提取物对慢性乙型肝炎患者肝窦微循环障碍的影响
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作者 主余华 王京 +2 位作者 梁斌 任万华 张春清 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第7期750-754,共5页
目的:探讨银杏叶提取物(EGb761)对慢性乙型肝炎患者肝窦微循环障碍的影响.方法:将47例慢性乙型肝炎患者分为EGb761治疗组26例及对照组21例,治疗前后分别进行肝组织活检术,肝组织行HE染色,并各取10例电镜观察治疗前后的肝窦微循环变化.结... 目的:探讨银杏叶提取物(EGb761)对慢性乙型肝炎患者肝窦微循环障碍的影响.方法:将47例慢性乙型肝炎患者分为EGb761治疗组26例及对照组21例,治疗前后分别进行肝组织活检术,肝组织行HE染色,并各取10例电镜观察治疗前后的肝窦微循环变化.结果:治疗后肝活检证实,与治疗前(炎症计分:15.7±6.3;纤维化计分:11.9±6.2)和对照组治疗后(炎症计分:14.2±6.6;纤维化计分:11.5±5.6)相比,EGb761治疗组肝组织损伤程度及纤维化程度明显改善(炎症计分:10.7±4.8;纤维化计分:8.3±4.2)(P<0.05);与治疗前相比,EGb761治疗组电镜下肝窦内血细胞聚集或微血栓形成(32vs56,P<0.01)、窦腔及Disse隙胶原沉积(23vs38,P<0.05)、窦内皮损伤(41vs59,P<0.05)、毛细血管化(17vs32,P<0.05)等肝脏微循环障碍明显改善;而对照组治疗前后均无明显变化(P>0.05).结论:银杏叶提取物能保护慢性乙肝患者肝窦内皮细胞,抑制肝窦内血细胞聚集及微血栓形成,抑制肝窦及Disse隙内胶原沉积及肝窦毛细血管化,改善肝脏微循环. 展开更多
关键词 银杏叶提取物 慢性乙型肝炎 肝窦 肝脏微循环
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CTGF靶向RNA干扰重组体的构建及序列分析
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作者 主余华 张春清 +2 位作者 赵幼安 褚衍六 孙成刚 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第24期2880-2883,共4页
目的:利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达的质粒.方法:分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至带有U6启动子的质粒载体pEGFP中,构建重组体,转化DH5α菌株... 目的:利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达的质粒.方法:分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至带有U6启动子的质粒载体pEGFP中,构建重组体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析.结果:CTGF的sRNA片段被成功克隆到pEGFP质粒载体中,3个重组质粒shRNA编码序列与设计的片段完全一致,经酶切与测序证实构建成功.结论:成功构建了能表达CTGFshRNA的重组体,为下一步探索肝纤维化基因治疗的新途径打好基础. 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 RNA干扰 短发夹RNA 质粒
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影响经皮经肝食管胃曲张静脉组织胶栓塞术远期疗效因素分析 被引量:6
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作者 解天华 刘锋 +4 位作者 张春清 刘福利 许洪伟 徐麟 冯凯 《医学影像学杂志》 2009年第4期416-420,共5页
目的:探讨提高经皮经肝曲张静脉栓塞术(PTVE)治疗食管胃底静脉曲张出血远期疗效的相关因素。方法:192例肝硬化合并食管胃底静脉曲张出血的患者,经皮经肝穿刺向食管下段胃底部曲张静脉、食管下段周围静脉丛、胃底贲门周围静脉丛内注入永... 目的:探讨提高经皮经肝曲张静脉栓塞术(PTVE)治疗食管胃底静脉曲张出血远期疗效的相关因素。方法:192例肝硬化合并食管胃底静脉曲张出血的患者,经皮经肝穿刺向食管下段胃底部曲张静脉、食管下段周围静脉丛、胃底贲门周围静脉丛内注入永久性栓塞剂TH胶(a-氰基丙烯酸酯)。结果:192例患者中188例成功施行了PTVE,成功率达97.8%。168例患者随访期6~64月,根据注入的TH胶分布的范围,168例患者分为3种栓塞类型:食管-胃底型82例,胃底型67例,主干型19例,135例患者PTVE后同时施行部分脾动脉栓塞,42例随访中施行了内镜下套扎或硬化治疗。静脉曲张复发率15.5%(26/168)。胃食管栓塞组静脉曲张复发率明显低于胃底贲门型及冠状静脉主干型(P<0.0001,log-ranktest)。随访期间21例患者再出血,总出血率12.5%(21/168)。其中食管胃底型再出血率3.7%(3/82);胃底型再出血率10.4%(7/67);主干型再出血率58.1%(11/19)。联合内镜治疗者再出血为2.4%(1/42),联合脾动脉栓塞组再出血8.9%(12/135)明显低于单纯PTVE治疗的27.3%(9/33)。结论:TH胶栓塞范围与远期疗效密切相关,联合部分脾动脉栓塞和内镜下套扎治疗能明显降低食管胃静脉曲张复发和再出血。 展开更多
关键词 食管胃底静脉曲张 经皮经肝静脉栓塞术 a-氰基丙烯酸(TH胶)
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慢性乙型肝炎病毒感染相关基因多态性的研究进展 被引量:2
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作者 朱明明 孙成刚 《临床肝胆病杂志》 CAS 2008年第2期133-136,共4页
关键词 慢性乙型肝炎病毒感染 基因多态性 乙型肝炎病毒(HBV) HBV感染患者 人类白细胞抗原 甘露糖结合凝集素 肿瘤坏死因子Α 维生素D受体
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银杏叶提取物EGb761对慢性乙型肝炎患者肝纤维化的影响 被引量:1
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作者 梁斌 张春清 +1 位作者 任万华 主余华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第6期585-590,共6页
目的:探讨银杏叶提取物(EGb761)对慢性乙型肝炎患者肝组织纤维化的影响.方法:将60例慢性乙型肝炎患者分为EGb761治疗组(n=32)及对照组(n=28),治疗前后分别检测肝功能、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、... 目的:探讨银杏叶提取物(EGb761)对慢性乙型肝炎患者肝组织纤维化的影响.方法:将60例慢性乙型肝炎患者分为EGb761治疗组(n=32)及对照组(n=28),治疗前后分别检测肝功能、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、血小板活化因子(PAF)、内皮素(ET-1)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)水平.两组中分别有26例和21例患者于治疗前后进行肝活检术,肝组织行HE、胶原纤维、网织纤维染色观察组织学变化.结果:治疗后两组的肝功能水平均较治疗前显著好转,但两组比较无差异.EGb761组治疗后ALT (621.8±271.7 nkat/L vs 1258.6±308.4 nkat/L,P<0.05),TBIL(17.1±9.5μmol/L vs 39.3±21.2μmol/L,P<0.01),PT(13.2±2.1 s vs 15.2±3.4 s,P<0.05),PCⅢ(168±48μg/L vs 307±93μg/L,P<0.95),CⅣ(102±35μg/L vs 191±35μg/L,P<0.01),HA(94±39μg/L vs 178±57μg/L,P<0.05),LN(101±31μg/L vs 193±21μg/L,P<0.05),PAF(7.62±6.54μg/L vs 13.23±9.79μg/L,P<0.05),ET-1(47.61±15.34μg/L vs 68.13±21.71μg/L,P<0.01)及TGF-β_1(17.61±5.06μg/L vs 58.43±11.04μg/L,P<0.05)水平与治疗前相比均显著下降,而ALB水平显著升高(38.2±5.9g/L vs 34.9±4.4g/L,P<0.05).与对照组相比,EGb761组治疗后血清TGF-β_1(17.61±5.06μg/L vs 61.17±11.45μg/L,P<0.05),PAF(7.62±6.54μg/L vs 11.65±8.96μg/L,P<0.05),ET-1(47.61±15.34μg/L vs 61.17±16.45μg/L,P<0.01),PCⅢ(168±48μg/L vs 298±86 ug/L,P<0.05),CⅣ(102±35μg/L vs 178±61 ug/L,P<0.05),HA(94±39μg/L vs 179±82μg/L,P<0.05)及LN(101±31μg/L vs 190±39 ug/L,P<0.01)指标改善更为明显.治疗组肝活检证实,治疗后肝脏细胞损伤减轻,纤维化程度减轻,而对照组治疗前后均无明显变化.结论:银杏叶提取物EGb761对慢性乙肝有明显的抗肝纤维化作用. 展开更多
关键词 银杏叶提取物 慢性乙型肝炎 肝纤维化
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