文昌鱼profilin同源基因的胚胎发育表达图式

本研究利用胚胎整体原位杂交技术结合系列组织学切片技术,以及Northern blot 分析,对进化上处于特殊地位的模式动物文昌鱼profilin 基因不同发育时期的表达图式进行了系统研究,揭示了该基因的动态表达图式与肌肉分化的过程一致,文昌鱼profilin 基因可能与胚胎早期肌肉的发育相关。同时,通过Southern blot 检测对青岛文昌鱼profilin 基因可能存在的同源体进行了探讨,试图为弄清文昌鱼肌肉发育分化的分子机制提供资料。

心血管系统中内皮细胞向间充质细胞转分化的研究进展

细胞的转分化是一种细胞在某些理化因素作用下转化为另一种细胞的现象。在胚胎发育期或某些病理及压力条件下,心血管系统中内皮细胞会转分化成间充质细胞,并带来不同的生物学意义。本文就心血管系统中内皮细胞向间充质细胞转分化的机制及检测方法进行了综述。

AmphiSox1/2/3-like基因的系统进化学分析和在文昌鱼胚胎发育中的表达

为了研究文昌鱼胚胎发育中神经管发育的分子机制和脊椎动物中枢神经系统的起源,我们筛选和分析了与佛罗里达文昌鱼AmphiSox1/2/3基因同源的青岛文昌鱼AmphiSox1/2/3-like 基因,对其推测的氨基酸序列与17个脊椎动物和无脊椎动物的同源基因进行了系统的进化学分析,并利用胚胎整体原位杂交技术结合系列组织学切片技术,对该基因在青岛文昌鱼胚胎发育中的时空表达模式进行了系统的研究.AmphiSox1/2/3-like在原肠胚早中期开始在背部上胚层和预定神经外胚层中明显表达.在神经胚早期其表达定位于神经板.此后,表达区域位于形成中的神经管和胚胎中、后部分化中的神经管的两侧,其表达的水平从前向后逐渐下调和终止.此外,该基因在神经胚晚期和幼虫期的消化道壁中也有明显表达.研究结果显示,该基因与文昌鱼的神经分化和消化道分化密切相关.

对NM32的研究

根据我校生命科学院发育生物学研究所张红卫教授与美国肯塔基大学李雷博士签订的《联合培养博士研究生协议》，我于2000年8月到美国肯塔基大学Dr．Kaetzel实验室开始博十论文实验研究工作，并于2002年2月12日回同，为期将近2年。实验中主要从事关于NM23-H1和NM23-H2的结构和功能性方面研究工作。NM23-H1被认为是一种有肿瘤迁移抑制活性的蛋白，最初因它在高度迁移性鼠黑瘤细胞比非迁移性黑瘤细胞中的表达显著降低而被发现。NM23-H1和NM23-H2基因属于一较大的基因家族，目前已发现了8个成员。

血小板生成素在毕赤酵母中的表达

以人胎肝cDNA文库为模板 ,用PCR和DNA重组技术 ,将TPOcDNA克隆到pGEM○R T载体并测序 ,再将目的片段亚克隆到分泌型表达载体上获得重组质粒pPIC9K/TPO ,并通过PCR引物设计、扩增和DNA连接使毕赤酵母α 因子的信号肽序列取代TPO固有的信号肽序列 ,使之与毕赤酵母的α 交配因子(MFα)融合 ,该表达载体受AOX1强启动子的调控 .经电转化和G4 1 8筛选获重组酵母KM71 /pPIC9K/TPO ,并用甲醇进行诱导表达 .经甲醇诱导后 ,酵母重组子可高效分泌表达TPO .经SDS PAGE和WesternBlot分析 ,显示重组人TPO(rhTPO)分子量约为 65ku ,与文献报道的 68～ 85ku基本一致 ,表明该蛋白是经过正确加工和糖基化的蛋白 .薄层扫描分析显示 ,重组蛋白占菌体分泌总蛋白的1 0 .1 4% .由此表明我们用毕赤酵母 (Pichiapastoris ,Pp)表达体系成功地表达了TPO .

青岛文昌鱼hedgehog基因表达图式的研究

Ｈｅｄｇｅｈｏｇ（ｈｈ）家族基因编码一类分泌性信号分子，在果蝇的体节和成虫盘等的图式形成和脊椎动物脊索、神经管、体节和肢等的发育中起着关键作用．探讨原索动物文昌鱼ｈｈ基因的功能，对于研究脊椎动物发育机制的进化具有重要意义．本文报道了用整体原位杂交方法，研究不同发育时期文昌鱼胚胎和幼体ｈｈ基因表达图式的结果，并对文昌鱼ｈｈ基因的功能和ｈｈ家族同源基因功能的演化进行了讨论．文昌鱼ｈｈ基因在脊索和神经管中的表达图式与脊椎动物Ｓｈｈ基因相似，其功能可能是介导脊索的诱导．

利用组织芯片检测肝细胞癌γ-连环蛋白的表达及意义

我们运用组织芯片技术，采用免疫组织化学（ABC-HRP法）对100例肝细胞癌（HCC）手术切除标本中的γ-连环蛋白（γ-Catenin）表达进行了检测，研究γ-Catenin与HCC临床病理因素表达的关系，探讨其在HCC的转移、复发及预后判断中的作用及意义。