乳腺癌细胞蛋白质O-GlcNAc糖基化水平与紫杉醇抗肿瘤作用的关系研究

目的研究紫杉醇对乳腺瘤细胞蛋白质O-Glc NAc糖基化水平的影响及其机制,探讨蛋白质O-Glc NAc糖基化水平变化对紫杉醇抗肿瘤活性的影响。方法使用Western blot检测紫杉醇对乳腺癌细胞蛋白质O-Glc NAc糖基化水平及多种相关酶蛋白表达水平的影响;RT-q PCR检测紫杉醇对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetylglucosaminidase,OGA)和N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(β-N-acetylglucosaminyltrans-fevase,OGT)mRNA水平的影响;采用OGA/OGT抑制剂PUGNAc/alloxan改变蛋白质O-Glc NAc糖基化水平,磺基罗丹明B法测定紫杉醇对肿瘤细胞增殖的影响。结果紫杉醇可诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231蛋白质O-Glc NAc糖基化水平升高(P<0.05),且具有时间和浓度依赖性;紫杉醇还可同时诱导OGA和OGT mRNA和蛋白水平的升高(P<0.05),且具有浓度依赖性;采用OGA的抑制剂PUGNAc提高蛋白质O-Glc NAc糖基化水平后,细胞对紫杉醇的敏感性升高;采用OGT的抑制剂alloxan降低蛋白质O-Glc NAc糖基化水平后,细胞对紫杉醇的敏感性降低。结论紫杉醇可诱导蛋白质O-Glc NAc糖基化水平升高,蛋白质O-Glc NAc糖基化水平的改变也会影响乳腺癌细胞对紫杉醇的药物敏感性。