他莫昔芬对人肝癌细胞增殖及ER表达影响的研究

目的:研究他莫昔芬(Tamoxifen,TAM)对人肝癌HepG2细胞增殖和HepG2细胞ER表达的影响。方法:按照TAM的浓度不同分为7.5μmol/L、15μmol/L、30μmol/L3组,对照组不加TAM,每孔加入1×105mL-1细胞0.1mL,培养24、48和72h,采用MTT法测定抑制率;细胞免疫组化染色观察TAM对肝癌细胞ER的表达的影响。结果:TAM抑制人肝癌细胞增殖及ER表达,并具有时间-浓度依赖。结论:TAM可能通过影响肝癌细胞ER的表达抑制肝癌细胞增殖。

负载hTERT基因片段的慢病毒的包装及表达

目的构建编码人端粒酶逆转录酶(hTERT)的慢病毒载体,并测定其滴度,观察hTERT基因在体外的表达情况。方法采用RT-PCR获得hTERT基因片段,插入转移载体L166,用CaCl2法L166-hTERT、L205、L311共转染293T细胞包装慢病毒,测定病毒滴度,免疫细胞化学法检测慢病毒感染的293T细胞中hTERT的表达。结果测序结果显示成功构建了重组质粒L166-hTERT,测定未经浓缩的病毒滴度为5.25×106IU/mL,免疫细胞化学法检测到慢病毒感染的293T细胞中hTERT呈阳性表达。结论成功构建了负载hTERT基因片段的慢病毒,hTERT能在感染的293T细胞中高效表达,表达持续2个月以上。