氯胺酮对结直肠癌患者Th1和Th2细胞影响的研究

目的辅助性T淋巴细胞(Th)在抗肿瘤免疫中发挥重要作用,尤其Th1/Th2比值降低与胃肠道恶性肿瘤转移复发有关。本研究拟在体外佛波醇-十四酸酯-乙酸酯(PMA)和离子霉素刺激下,探讨不同浓度的氯胺酮对结直肠癌患者Th1和Th2细胞的影响。方法选取山东省肿瘤医院2014-10-01—2015-05-31收治的20例结直肠癌患者和20名健康体检者的外周静脉血。健康体检者每份血样分离出的外周血单个核细胞(PBMCs)加入等容积0.9%氯化钠为正常对照组(C0组,n=20);结直肠癌患者每份血样分离出的PBMCs随机分为C1组、K1组、K2组和K3组,分别加入0.9%氯化钠、25、50和100μmol/L氯胺酮(n=20)。各组均加入PMA和离子霉素混合溶液2μL孵育4h后收集细胞。采用三色荧光流式细胞技术测定Th1及Th2细胞亚群比例,并计算两者比值(Th1/Th2)。结果 C0组Th1细胞比例为9.36%,C1组为6.39%,差异有统计学意义,P<0.001;C0组Th1/Th2比值为2.48,C1组为1.63,差异有统计学意义,P<0.001。与C1组比较,K1组中Th1细胞、Th2细胞和Th1/Th2比值均无明显变化,均P值>0.05;K2组中Th1/Th2比值由1.63升高至1.71,P<0.001;K3组中Th1细胞、Th2细胞比例降低,Th1/Th2比值升高,P值均<0.01。随着氯胺酮浓度的增加,Th1/Th2比值不断增高,P值均<0.01。结论结直肠癌诱导免疫应答,使Th1/Th2平衡向Th2偏移。在体外PMA和离子霉素的刺激下,小剂量氯胺酮对结直肠患者的Th1、Th2和Th1/Th2比值影响不大。高浓度氯胺酮能抑制Th细胞分化,但增加Th1/Th2比值,且随着浓度的增加,对Th细胞分化的影响越大。