肝肾联合移植六例临床分析

自从1983年奥地利Innsbruck大学实施了全球首例肝肾联合移植（combined liver-kidney transplantation，CLKT），CLKT已被证明是一种治疗终末期肝、肾疾病的良好方法。我院自2005年1月至2008年12月共行6例CLKT，现将临床经验总结分析如下。

慢病毒介导的miR-34a过表达增强阿霉素对人肝癌细胞的抑制作用

目的构建miR-34a重组慢病毒载体，观察其转染后对肝癌细胞活力、细胞周期和凋亡的影响．并观察转染后对阿霉素体外抑制肝癌细胞生长的影响。方法构建含miR-34a基因的重组慢病毒载体，转染人肝癌细胞并阿霉素干预后，测定细胞活性、检测细胞周期、凋亡及相关蛋白表达水平的变化。结果成功构建了miR．34a的重组慢病毒载体LV-hsa—mir-34a（元件顺序：Ubi—MCS—SV40-EGFP—IRES-puromycin）。经质粒酶切和测序鉴定正确。与对照组比较，重组慢病毒载体转染肝癌细胞后miR-34a表达上调，差异有统计学意义（HepG2：t=15．36，P〈0．01；Hep3B：t=36．75，P〈0．01：Bel-7402：t=24．17，P〈0．01）。与对照组比较，miR-34a表达上调并阿霉素干预后肝癌细胞活力下降（HepG2：t=7．12，P〈0．01；Hep3B：t=8．89，P〈0．01；Bel-7402：t=13．62，P〈0．01），G1期细胞显著增多（HepG2：F=137．65，P〈0．01；Hep3B：F=143．39，P〈0．01；Bei-7402：F=1306．47，P〈0．01），细胞凋亡增加（HepG2：F=386．14，P〈0．01；Hep3B：F=881．94，P〈0．01；Bel-7402：F=885．89，P〈0．01），差异有统计学意义，细胞周期蛋白和凋亡蛋白发生相应改变。结论构建miR．34a重组慢病毒载体并转染肝癌细胞后可高效表达miR-34a，miR-34a高表达可以降低肝癌细胞的恶性生物学行为。miR-34a重组慢病毒载体感染肝癌细胞后，阿霉素对肝癌细胞的抑制作用显著增强。