左旋肉碱在经皮附睾穿刺取精-卵细胞胞质内单精子注射治疗中的应用

目的:探讨左旋肉碱在经皮附睾穿刺取精-卵细胞胞质内单精子注射(PESA-ICSI)治疗中的应用。方法:随机将2008年9月至2009年8月间本中心就治的79例梗阻性无精子症患者分成2组:未服药组(A组36例)和服药组(B组43例)。B组ICSI治疗取卵前3个月口服左旋肉碱(1g,2次/d)治疗,A组未作任何治疗作为对照,比较A、B两组间PESA-ICSI的获卵数、受精数、受精率、优质胚胎数和优质胚胎率。结果:A、B两组间受精数和受精率无显著性差异,但B组获得优质胚胎数及优质胚胎率明显高于A组(P<0.05)。结论:ICSI治疗前不育男性口服左旋肉碱3个月能显著提高PESA-ICSI的优质胚胎数及优质胚胎率,为将来获得良好的妊娠结局奠定基础。

代谢综合征合并不育患者的甲状腺超声以及功能状况与性激素分析

目的探讨代谢综合征合并不孕症患者甲状腺结构和功能异常的特点,并寻求合理的治疗方案,以提高助孕成功率以及新生儿出生质量。方法 2002年3月至2010年12月在本院就诊的代谢综合征合并不孕患者共322例,这部分患者来自全国各地,以山东省内各地为主。根据病史、体征对可能存在胰岛素抵抗的患者进行糖耐量及胰岛素释放试验、血脂等检查确定代谢综合征(metabolic syndrome,MS),对这类患者进行相关的体格检查、生化测定指标及辅助检查。根据甲状腺超声及甲状腺功能和抗体测定将患者分为超声正常组、结节性甲状腺肿组(结甲组)及桥本氏甲状腺炎组(桥本组)。对三组的一般情况、基础生殖内分泌水平及甲状腺功能各项指标进行比较和分析。结果代谢综合征患者按甲状腺超声结果分为正常组54.04%(174/322)和异常组45.96%(148/322),各种异常占甲状腺超声异常总数(148)百分比分别为:结节性甲状腺肿66.89%(99/148);桥本氏甲状腺炎14.86%(22/148);甲状腺滤泡囊肿6.76%(10/148);甲状腺癌0.68%(1/148);甲状腺腺瘤2.03%(3/148);其他异常8.11%(12/148)。将超声正常组(174),结甲组(99)及桥本组(22)各项指标进行比较后发现桥本组的脂肪肝患者比例(95.45%)较高,高雄激素血症患者比例(40.91%)较低(P<0.05);基础生殖内分泌测定各组间并无统计学差异;桥本组TSH升高,与正常超声组及结甲组相比有统计学差异(P<0.05),结论代谢综合征合并不孕不育患者是甲状腺结构异常的高发人群,应该做甲状腺结构以及功能的筛查,以做到早期诊断及治疗。

子宫内膜异位症患者生育问题的解决

子宫内膜异位症(内异症)发病率在青春期及生育年龄妇女中较高,由于此病影响生育,所以从青春期开始,应对疑为内异症者尽早作出诊断和积极治疗;育龄妇女内异症患者应指导其尽早妊娠,已发生不孕者应积极治疗,以防止生育力进一步下降。目前的研究不支持单纯药物治疗。手术可提高各期患者的自然妊娠率,但手术对卵巢储备可能造成影响。体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)对中、重度内异症患者及手术治疗失败者有效。IVF前使用3～6个月的促性腺激素释放激素类似物(gonadotropin releasing hormone agonist,GnRHa)似可提高临床妊娠率。超促排卵(controlled ovary hyperstimulation,COH)对内异症病程的影响则需要进一步研究。

形态正常发育滞后胚胎冻融后的临床妊娠结局

目的：探讨形态正常但发育滞后胚胎的临床妊娠结局。方法：2006年10月至2007年10月在山东大学附属省立医院生殖中心接受体外授精-胚胎移植（IVF-ET）或卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）的患者于第3天将形态正常（卵裂球均匀或轻度不均匀,无核碎片≤25%）但发育缓慢的胚胎（受精后64~66h胚胎卵裂球数3~5个）慢速冷冻,复苏后行胚胎移植,移植时按照第2天发育阶段的胚胎对待,随访其妊娠情况。结果：胚胎移植104例患者,冷冻复苏胚胎348个,复苏成活303个（成活率87.17%）,继续培养后121个胚胎（39.93%）继续发育。移植后获得生化妊娠35例,生化妊娠率33.65%,临床妊娠30例,临床妊娠率28.84%。过夜培养后至少有一个胚胎继续发育61例,临床妊娠率37.70%,过夜培养无胚胎继续发育43例,临床妊娠率16.27%,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：形态正常但发育滞后的胚胎有冷冻保存价值,可以在冷冻胚胎融解周期作为第2天胚胎融解,过夜培养后优先选择有发育生长的胚胎移植。

磷酸化细胞外信号调节激酶1/2和基质金属蛋白酶-9在宫颈鳞状细胞癌癌变过程中的表达及相关性

目的探讨宫颈鳞状细胞癌中磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)1/2和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达与临床病理关系。方法采用免疫组织化学方法检测P-ERK1/2和MMP-9在30例慢性宫颈炎、45例宫颈上皮内瘤变(CIN)和58例宫颈鳞癌患者组织中的定性表达情况。结果 P-ERK1/2和MMP-9在慢性宫颈炎、CIN及宫颈鳞癌组织中的阳性率分别为0和0、28.9%和24.4%及77.6%和65.5%,3组间差异均有统计学意义(χ2=54.393,P=0.003;χ2=40.968,P=0.005)。宫颈鳞癌患者中,P-ERK1/2和MMP-9在临床Ⅱ～Ⅲ期组、G3组、有淋巴结转移组和肿瘤直径>4 cm组的阳性率分别明显高于临床Ⅰ期组(P=0.015,P=0.002)、G1～G2组(P=0.013,P=0.017)、无淋巴结转移组(P=0.017,P=0.021)和肿瘤直径≤4cm组(P=0.008,P=0.004)。P-ERK1/2与MMP-9在宫颈鳞癌组织中的阳性表达呈正相关(χ2=8.955,P=0.006)。结论 P-ERK1/2和MMP-9的阳性率随宫颈病理改变的程度加深而增加。P-ERK1/2和MMP-9在宫颈鳞癌中过表达可能促进了宫颈鳞癌的浸润及其淋巴结转移,二者在宫颈鳞癌浸润转移过程中可能有协同作用。

细胞极性与卵子成熟和胚胎发育的关系

细胞极性与许多细胞功能的行使关系密切。卵母细胞在发育至具备受精能力的成熟状态时,在很大程度上已经成为一个高度极性化的细胞,许多分子机制参与其极性形成。卵子发育、成熟和受精过程中极性形成的三条重要途径与早期胚胎发育的极性关系密切并起到重要的作用。

大Y染色体对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的研究大Y染色体对体外受精-胚胎移植结局的影响。方法选取2006年1月至2008年12月在山东大学附属省立医院生殖医学中心完成体外受精-胚胎移植的新鲜胚胎移植周期。其中,男方染色体G显带示为大Y(Y≥18号染色体)且其妻排除已知的影响体外受精-胚胎移植结果疾病的治疗周期为大Y组(33例患者,47个治疗周期),同期在本中心行体外受精-胚胎移植治疗的其他所有治疗周期为群体对照组(6620个周期)。结果大Y组与群体对照组比较,其受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、妊娠率、早期流产率等各项指标的差异均无统计学意义(P>0.05),但在畸形率、出生性别比例方面,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),即大Y组畸形儿出生与女孩出生所占比例有较明显升高。结论大Y染色体对体外受精-胚胎移植的胚胎发育及近期妊娠结果均无显著性影响,但在大Y染色体患者的妻子行体外受精-胚胎移植时,女孩更易出生。

基于鹿特丹标准诊断的多囊卵巢综合征患者月经类型及其意义

目的分析基于鹿特丹标准诊断的中国人多囊卵巢综合征（PCOS）患者不同月经类型的临床资料及内分泌代谢指标，以指导临床治疗。方法将符合鹿特丹标准的2100例PCOS患者按闭经、月经稀发、月经规律进行分组，分别进行代谢及内分泌等指标的比较。结果（1）闭经组多毛、多囊卵巢发生率均高于月经稀发组（P〈0．01）。（2）闭经组的血清睾酮最高，月经稀发组最低（P〈0．01）；黄体生成素（LH）在闭经组最高（P〈0．01），在月经稀发组和月经规律组间差异无统计学意义（P〉0．05）；黄体生成素／卵泡刺激素（LH／FSH）在月经规律组增高明显（P〈0．01）。（3）口服葡萄糖后2h血糖在闭经组显著增高（P〈0．01）。结论符合鹿特丹标准的不同月经类型的PCOS患者具有不同的临床表现及代谢、内分泌特点，对于不同月经类型PCOS患者的治疗也应该个体化。

血清抵抗素、C-反应蛋白及IL-6与PCOS的相关性研究

目的:探讨血清脂肪细胞因子抵抗素(resistin)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)水平与PCOS发生的相关性。方法:收集PCOS患者45例,再根据体质量指数(BMI)分为肥胖亚组(≥25kg/m2,22例)和非肥胖亚组(<25kg/m2,23例)。正常对照组45例,同样按BMI分为肥胖亚组(14例)和非肥胖亚组(31例)。空腹采集血清,采用酶联免疫分析法测定抵抗素、免疫比浊法测定CRP、放射免疫法测定IL-6,全自动生化分析仪测定血糖、血脂、化学发光法测定内分泌水平和血清胰岛素水平,同时测量身高、体质量、腰围、臀围,计算BMI和腰臀比值(WHR)。结果:与对照组非肥胖者相比,PCOS组肥胖、非肥胖者及对照组肥胖者抵抗素水平均显著增高(P<0.05);PCOS组和对照组肥胖者的CRP水平均高于对照组非肥胖者(P<0.05);PCOS组肥胖和非肥胖者的IL-6水平高于对照组非肥胖者(P<0.05)。抵抗素和CRP均与BMI、WHR、HOMA-IR呈显著正相关(P<0.05);IL-6与BMI、WHR有显著相关性,与HOMA-IR无相关性。结论:脂肪细胞因子抵抗素、CRP及IL-6参与PCOS患者肥胖和胰岛素抵抗的发生发展。

GM-1对人胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞的作用

目的探索外源性神经节苷脂(GM-1)对人胚胎干细胞(hESC)诱导分化成神经细胞的作用,为临床治疗提供理论依据。方法将人胚胎干细胞(SDU-hESm-1)悬浮培养形成拟胚体(EB),EB再贴壁培养诱导分化神经细胞,分别于悬浮培养EB阶段和EB贴壁培养阶段的神经分化培养基中加入浓度为0、0.5、5、50μg/mL的GM-1,观察EB的形成,计数神经标记性抗原Nestin和β-Tubulin阳性细胞百分率。结果含GM-1的神经分化培养基诱导生成"透亮EB",分化出Nestin和β-Tubulin阳性细胞明显多于不含GM-1培养基诱导出的神经细胞数量,不含GM-1形成的EB发黑;在悬浮培养形成EB开始加GM-1比EB贴壁培养开始加GM-1产生Nestin和β-Tubulin阳性细胞数目更多,但2个加GM-1阶段产生的神经细胞百分率均随GM-1浓度增加而增大。结论首次发现GM-1可以诱导hESC定向分化神经细胞,定向产生神经前体细胞(Nestin阳性),在hESC定向分化神经细胞的过程中,悬浮培养EB阶段加入GM-1更有利于hESC的定向分化。

冷冻对人精子氧化应激水平、核DNA损伤的影响

目的研究冷冻储存对精子形态、氧化应激水平和核DNA损伤的影响。方法根据WHO的标准(1999年),随机选取正常精液样本、异常精液样本各30例。分别检测精子冷冻前后正常形态率、丙二醛(MDA)浓度和DNA损伤率。结果①两组精液精子冷冻前后变化:冷冻后正常精液组中精子正常形态率降低明显,MDA值升高显著(P<0.05);DNA损伤率升高,但差异无统计学意义。而冷冻后异常精液组中精子正常形态率明显降低,MDA值显著升高,DNA损伤率升高(P<0.05);②两组精液之间冷冻损伤的比较:冷冻对异常精液正常形态精子损伤、DNA损伤明显高于正常精液组(P<0.05);③精子正常形态率与MDA浓度呈负相关(r=-0.525),MDA浓度与DNA损伤率呈正相关(r=0.692)。结论冷冻可导致异常精液的正常形态率下降,脂质过氧化损伤、DNA损伤率升高。而在正常精液中则导致精子正常形态率的下降,脂质过氧化损伤的增加。