研究生病原分子生物学技术优质课程建设探索

为了提高研究生的培养质量,系统地对研究生病原分子生物学技术进行优质课程建设和实践,包括师资队伍、课程目标、课程设计理念、课程内容、教学方法、教学手段、教学评价、教材建设、课程资源、课程管理、课程实践条件等,探索出提高研究生培养质量的优质课程模式。

人乳头瘤病毒早期癌蛋白E6/E7稳定表达细胞系的构建及其对Rab12表达的影响

目的探究人乳头瘤病毒(HPV)编码的早期癌蛋白E6/E7对小GTP酶蛋白Rab12表达的影响。方法利用逆转录病毒包装系统获得含p Babe-Vector质粒和p Babe-16E7质粒的高滴度病毒颗粒,感染细胞,并用嘌呤霉素筛选获得稳定表达HPV16E7的UMSCC 10A-16E7细胞系,Western blotting检测E7相关蛋白p53和E2F1的表达变化,比较UMSCC 10A-Vector细胞系和UMSCC 10A-16E7细胞系的Rab12蛋白表达水平。用同样方法在Ha CaT、RPE1细胞系中进一步验证。用siRNA干扰SiHa、Caski细胞(HPV-16阳性的宫颈癌细胞)中16E6/E7及He La细胞(HPV-18阳性的宫颈癌细胞)中18E6/E7的表达,通过Western blotting比较siRNA干扰前后E6和E7相关蛋白(E2F1、p53和Rab12)的表达差异。结果利用逆转录病毒包装系统成功构建稳定表达的细胞系,过表达E6/E7的细胞系中Rab12表达升高,干扰E6/E7的细胞系中Rab12的表达降低。结论 HPV编码的早期癌蛋白E6/E7可调控Rab12的表达。