DC/C6融合瘤苗防治C6胶质瘤的实验研究

目的:探讨DC/C6融合瘤苗防治C6胶质瘤的疗效及作用机制。方法:采用PEG化学融合方法制备融合瘤苗,应用GFAP-FITC免疫荧光检查进行瘤苗的鉴定;立体定向制备大鼠颅内C6肿瘤模型,于种瘤后5 d经尾静脉注射107融合瘤细胞、107DC以及100μL PBS,分设为A、B、C 3组,采用Log-rank对数秩检验进行生存分析,并行肿瘤标本HE染色及抗CD8M cab免疫组化染色。结果:融合瘤苗GFAP-FITC免疫荧光检查阳性;Log-rank生存分析对数据进行对数秩检验,结果表明A组与B、C组进行比较均有统计学意义(P<0.01);A组晚期死亡大鼠(>31 d)HE染色见较多的炎性细胞浸润,CD8M cab免疫组化染色阳性。结论:DC/C6融合瘤苗能够有效的发挥抗原提呈、活化T淋巴细胞的功能,CD8+T细胞参与抗胶质瘤免疫反应。

Wistar大鼠树突状细胞的体外培养、扩增与鉴定

目的:探讨体外分离、培养和扩增大鼠骨髓来源树突状细胞(DC)的有效方法。方法:采用改良的Chen-WoanDC培养方法,梯度离心提取骨髓单核细胞中的非粘附细胞,加入GM-CSF 5 ng/mlI、L-45 ng/ml进行诱导扩增,对培养的目的细胞进行形态学、OX62-FITC免疫荧光检查以及功能学鉴定。结果:DC前体细胞培养10 d呈典型树突状结构,表面标志物染色阳性,流式细胞学检查OX62单抗阳性率86%,不同培养时段的DC诱发混合淋巴细胞反应以培养10 d的DC最强,培养10 d的DC诱发混合淋巴细胞反应对同源淋巴细胞有更好的活性。结论:改良的Chen-Woan法为体外诱导扩增大鼠骨髓来源DC的有效方法。

树突状细胞融合瘤苗抗胶质瘤的实验研究

目的观察树突状细胞(dendritic cells,DC)融合瘤苗防治C6胶质瘤的疗效,对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。方法采用PEG化学融合方法制备融合瘤苗,流式细胞技术分选瘤苗,对融合瘤苗进行免疫组化和功能学鉴定；立体定向制备大鼠颅内C6肿瘤模型,荷瘤后5d经尾静脉注射10~7融合瘤苗、10~7DC以及100μl PBS,分别设为A、B、C三组,采用Log-rank对数秩检验进行生存分析,对肿瘤标本进行病理学检查。结果实验中DC具有典型的树突状结构,OX_(62)特异性标志物阳性表达；融合瘤苗GFAP-FITC免疫荧光检查阳性；Log-rank生存分析数据对数秩检验表明A组与B、C组比较均有统计学意义(P＜0．01)；A组晚期死亡大鼠(＞31d)HE染色见较多的炎性细胞浸润,CD_8^+ Mcab免疫组化染色阳性。结论PEG法可有效制备DC/C6融合瘤苗,融合瘤苗能够有效的发挥抗肿瘤效果,CD8^+ T细胞参与颅内抗胶质瘤免疫反应。