HDM通过肺泡巨噬细胞TLR4诱导哮喘小鼠气道炎症的机制研究

目的:研究HDM通过肺泡巨噬细胞(AM)Toll样受体4(TLR4)的高表达及诱导AM的活化,探讨其对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组(OVA)A,HDM处理组(HDM+OVA)B,对照组(生理盐水)C。用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型;HE染色观察小鼠气道及肺组织病理变化;光学显微镜下观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的含量,实时定量PCR法测定AM的TLR4的表达,流式细胞技术(FCM)检测AM的CD80、CD86的表达。结果:与A组相比,B组BALF上清中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著增高(P<0.05),而IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,AM的TLR4mRNA表达明显增高(P<0.05),CD80的表达差异无统计学意义,CD86的表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HDM通过AM的TLR4的高表达诱导AM的活化,加重哮喘的气道炎症。

小鼠骨髓移植修复卵巢功能损伤

目的研究骨髓移植对化疗引起的小鼠卵巢功能损伤的修复作用。方法 48只小鼠随机分为3组:正常对照组(A组)、化疗并骨髓移植组(B组)和化疗组(C组)。B、C组小鼠每天给予环磷酰胺150 mg/kg腹腔注射,连续3 d。1周后,对B组小鼠进行骨髓移植。给药起第21、50天分两批处死小鼠,称量卵巢、子宫湿重,观察卵巢组织学变化。用Hoechest33342荧光染料标记骨髓细胞,移植入预先注射环磷酰胺的小鼠体内,2 d后取小鼠卵巢做冰冻病理切片,荧光显微镜下观察。结果给药第21、50天,B组小鼠的卵巢系数、各级卵泡数目明显高于C组而低于A组,均具有统计学意义(P<0.05)。受体鼠的卵巢内发现显示荧光的供体鼠骨髓细胞。结论骨髓移植对化疗药物引起的卵巢功能损伤具有修复作用。

再生障碍性贫血患者T细胞表面VLA-4和CX3CR1的表达

目的:探讨获得性再生障碍性贫血(AA)患者T细胞表面VLA-4、CX3CR1的表达在AA发病机制中的作用。方法:①流式细胞术分析46例AA患者(20例重型AA,26例非重型AA)骨髓和外周血中T淋巴细胞亚群的变化以及VLA-4、CX3CR1在T淋巴细胞亚群上的表达。②ELISA方法测定其骨髓和外周血浆中VCAM-1(VLA-4的配体)、Fractalkine(CX3CR1的配体)的含量。结果:①AA患者外周血中CD3+细胞比例基本正常(P>0.05),CD8+细胞比例明显上升,CD4+细胞比例明显下降(P<0.01);骨髓中CD3+、CD8+细胞比例均明显升高(P<0.01),CD4+细胞比例减低仅在重型AA患者中差异有统计学意义(P<0.05)。②AA患者骨髓和外周血T细胞亚群表面VLA-4的表达与对照组比较均差异无统计学意义(均P>0.05)。然而患者骨髓和外周血中CD3+/CX3CR1+细胞、CD3+/CD4+/CX3CR1+细胞以及CD3+/CD8+/CX3CR1+细胞比例均升高(P<0.05),尤其CD3+/CD8+/CX3CR1+细胞比例升高更为显著(P<0.01)。③AA患者骨髓和外周血浆中VCAM-1水平与对照组比较均无明显变化(P>0.05)。而Fractalkine水平在重型和非重型AA患者骨髓中以及重型AA患者外周血浆中均升高(P<0.05)。结论:获得性AA作为一种T细胞介导的免疫性疾病,存在T细胞亚群失衡。T细胞通过高表达CX3CR1,与Fractalkine相互作用,从外周血迁移到骨髓,并在骨髓中积聚导致造血干/祖细胞的破坏。

丹皮酚对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡及其Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察丹皮酚对缺血再灌注损伤心肌心肌细胞凋亡以及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:建立大鼠心肌缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、丹皮酚组,分别给予相应处理,采用免疫组化法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达,Tunnel法检测心肌细胞凋亡。结果:丹皮酚组Bcl-2蛋白表达升高和Bax蛋白表达下降,心肌细胞凋亡减少。结论:丹皮酚可以减少缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡,其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达以及下调Bax蛋白表达有关。

EXAKT硬组织切磨技术在含有植入物组织切片中的应用

目的用EXAKT硬组织切磨技术制作不同类型的软硬组织切片,探索该技术在不同类型组织中的应用及其效果。方法取含有钛合金螺纹种植钉的比格犬下颌骨组织(A组织)、含有钛合金直钉和螺纹种植钉的小鼠股骨组织(B组织和C组织)、含有多孔钛材料的兔股骨踝骨组织(D组织)、含有钴铬合金支架的兔心血管组织(E组织)、含有钙黄绿素和茜素络合复合物标记的大鼠上腭组织(F组织),均经多聚甲醛固定、乙醇上行脱水、光固化树脂浸润包埋后,用EXAKT硬组织切片系统粗切为厚片,再经磨片系统打磨至50μm左右的薄片,染色封片后在光学显微镜下进行观察。结果Ladewig染色后镜下观察显示,A和B组织中骨组织与种植钉结合紧密,种植钉无脱落,新生骨明显;苏木精-伊红染色后镜下观察显示,C和D组织中新生骨明显,与种植体结合紧密,结缔软组织保留完整,原旧骨无裂痕;E组织血管壁清晰可见,分层明显,支架无脱落;荧光显微镜下观察,F组织红绿荧光明显可见,叠加图可清晰看到荧光走向。结论EXAKT硬组织切磨系统可将不同类型的软硬组织制作成切片,且植入物无脱落现象,骨组织无裂痕,各种软硬组织及植入物清晰可见。