单抗捕捉ELISA检测AEV抗体方法的研究

本研究初步建立了检测ＡＥＶ抗体的单抗捕捉ＥＬＩＳＡ 方法。ＡＥＶ腹水单抗（腹水效价为１ ∶１×１０６）最佳稀释度为１∶２００，ＡＥＶ抗原工作浓度为１６．０８ μｇ／ｍＬ，血清稀释度为１∶１ ００， 兔抗鸡酶标抗体工作浓度为１∶５００。经阻断试验、交叉试验、重复试验，以及与进口试剂 盒 进行平行检测４０份血清，总符合率为９２．５％，表明该方法特异性强、重复性好、敏感性高， 是一种有应用前景的方法。

抗禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的研究——禽脑脊髓炎病毒抗原的培养和纯化

为获得用于制备AEV单克隆抗体的抗原 ,将禽脑脊髓炎病毒 (AEVVR)接种于鸡胚成纤维细胞 (CEF)盲传 ,通过间接免疫荧光试验 (IFA)监测AEV增殖情况 ,以第六代CEF培养物作为种毒扩大培养 ,将其培养物经差速离心后的半提纯物接种 6日龄SPF鸡胚、1日龄SPF鸡 ,再将半提纯物经密度梯度离心后进行PAGE -SDS电泳 ,电镜观察。结果证实 。

单抗间接Dot-ELISA检测禽脑脊髓炎病毒抗原的研究

利用制备的禽脑脊髓炎病毒 (AEV)单抗建立了检测AEV抗原的间接Dot ELISA方法 ,对AEV最低检出量为 1 6 0 8μg/mL。人工感染 1日龄SPF鸡 ,取发病鸡 (6～1 3日龄 )相应病料 ,各病料样本阳性检出率分别为 :脑 1 0 0 % ,胰 96 % ,十二指肠 98% ,腺胃 98%。对 40份临床自然发病鸡病料检测 ,阳性检出率为 92 %。对 1 0份AEV病原分离阳性样品 ,检测阳性率为 1 0 0 % 。

复方中药制剂预防IBD的研究

将８０只３５日龄的ＳＰＦ鸡随机分为４组，每组２０只。Ⅰ组为复方中药制剂组、Ⅱ组为中药配方组、Ⅲ组为ＩＢＤ病变组织裂解物组、Ⅳ组为对照组。用药后第１０ｄ对４组鸡同时用ＩＢＤ强毒攻击，结果各组的保护率分别为Ⅰ组９５％（１９／２０）、Ⅱ组６０％（１２／２０）、Ⅲ组７０％（１４／２０）、Ⅳ组１５％（３／２０）。Ⅰ组保护率比Ⅱ组和Ⅲ组高２５～３５％，差异显著；比Ⅳ组高８０％，差异非常显著。说明复方中药制剂对ＩＢＤ有很好的预防效果。

核酸探针检测山东省鸡群中马立克病毒、传染性贫血病毒、网状内皮增生病病毒和呼肠孤病毒的流行状况

为对山东家禽业免疫抑制病的流行情况进行调查,从烟台、滨州、临沂、泰安、聊城、青岛大型养殖场共随机收集600只病死鸡的肝脏和脾脏病例组织样品,用斑点杂交的方法检测样品中鸡马立克病毒(Marek's disease virus,MDV)、传染性贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)、网状内皮增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)和呼肠孤病毒(reovirus,REOV)的感染情况。结果发现,MDV、CAV、REV、REOV的感染率分别为5.17%、8.17%、1.17%、2.5%,检出率较以前的研究报道有降低趋势,有多种双重感染和三重感染,表明山东家禽业在免疫抑制病方面总体控制较好,但不同的养殖场发病情况差异极显著,管理水平参差不齐,个别地区发病情况严重,检出率超过其他地区的总和。

复方中药制剂预防IBD的研究

将８０只３５日龄ＳＰＦ鸡随机分为四组，每组２０只。Ⅰ组为复方中药制剂组，Ⅱ组为中药配方组，Ⅲ组为ＩＢＤ病变组织裂解物组，Ⅳ组为对照组。用药后第１０天对四组鸡同时用ＩＢＤ强毒攻击，各组的保护率为Ⅰ组９５％（１９／２０），Ⅱ组６０％（１２／２０），Ⅲ组７０％（１４／２０），Ⅳ组１５％（３／２０）。Ⅰ组保护率比Ⅱ组和Ⅲ组高２５～３５％（ｐＨ＞０．０１），比Ⅳ组高８０％（Ｐ＜０．０１）。然后选择ＩＢＤ多发地区不同品种的１５～２０日龄雏鸡４４０００只进行临床应用，结果保护率达１００％。说明复方中药制剂对ＩＢＤ有很好的预防效果。

壳聚糖应用研究进展

壳聚糖是由甲壳素（主要存在于虾壳、蟹壳）脱钙、去除蛋白质和脂肪后经脱乙酰基过程制备的天然高分子聚合物，其学名“聚氨基葡萄糖”，又称“可溶性甲壳质”，在自然界中含量十分丰富。由于壳聚糖粘合性和成纤成膜性能好，且具有无毒、良好的生物相溶性、生物可降解性及可被吸收利用等特点，现已广泛应用到医药、化工、饲料、农业、环保和生物技术等各领域，尤其在免疫缓释技术方面的应用引起了人们的极大关注，

抗IBD中药制剂治疗IBD的研究

将６０羽３２日龄ＳＰＦ鸡随机分为３组，每组２０羽，Ⅰ组为抗ＩＢＤ中药制剂治疗组，Ⅱ组为ＩＢＤ卵黄囊抗体治疗组，Ⅲ组为对照组。对３组ＳＰＦ鸡同时接种ＩＢＤＶ强毒０．２ｍｌ。待全部出现ＩＢＤ临床症状后，Ⅰ组鸡口服抗ＩＢＤ中药制剂２ｍｌ／羽，Ⅱ组鸡肌肉注射ＩＢＤ卵黄囊抗体１ｍｌ／羽（抗体效价１：１２８），Ⅲ组鸡注射生理盐水１ｍｌ／羽。然后观察鸡的病情变化、死亡情况和死鸡病理变化。结果表明，Ⅰ组治愈率为９０％（１８／２０），Ⅱ组治愈率为７５％（１５／２０），Ⅲ组仅存活２０％（４／２０），Ⅰ组比Ⅱ组治愈率高１５％，Ⅰ组比Ⅲ组死亡率低７０％。说明抗ＩＢＤ中药制剂治疗ＩＢＤ有很好的疗效。同时对鸡的法氏囊、心、肝、脾、肾、胃肠道等器官有明显的保护作用。

怎样提高家禽的免疫效果

疫苗接种是当前家禽养殖中预防鸡病的主要方法,但是在生产中却时常发生以下几种情况:免疫过的鸡抗体效价很低、鸡群仍然发病;疫苗副作用比较强,影响家禽产蛋或增重;有些弱毒疫苗毒性不稳定。

禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

选用AEV(VR株 )CEF适应毒制备抗原 ,免疫Balb/c小鼠。应用杂交瘤技术以间接ELISA方法筛选获得一株分泌抗AEV(VR)单克隆抗体的杂交瘤细胞。制备细胞上清及腹水进行单抗特性鉴定 ,经染色体计数、免疫球蛋白类及亚类测定、特异性试验、稳定性试验、SDS PAGE电泳 ,表明该杂交瘤细胞染色体数目介于 90～ 110之间 ,该单克隆抗体亚类为IgG2a,分子量为 142KD ,ELISA测定细胞上清效价为 1∶1× 10 4 ,腹水效价为 1∶1× 10 6,与其它病原无交叉反应 ,抗体分泌稳定。

鼻气管鸟疫杆菌中国株的鉴定

通过形态特征检验、常规生长实验、API-20NE生化试剂盒检验、PCR检验和血清学检验从疑似副鸡嗜血杆菌的野外分离株中鉴定出2株鼻气管鸟疫杆菌。

一株新城疫强毒株的分离鉴定

从昌吉市肉种鸡发病鸡群中分离到1株病毒,对其进行了SPF鸡胚接种试验,HA及NDV和AIVH5、H9单因子血清HI试验,动物回归试验,MDTI、CPI和IVPI毒力学指标测定,分离株与NDV Lasota株交叉HI试验,鸡胚半数感染量(EID50)测定。结果表明,分离株的MDT为55 h;ICPI为1.78;IVPI为2.41,第6代病毒EID50为3.98×10-8/0.1 mL。分离株能被NDV La-soda株阳性血清中和,动物回归试验鸡出现典型的新城疫症状。证明该毒株为新城疫强毒株。

马立克氏病血清I型致瘤株病毒感染的早期检测

马立克氏病 (MD)是养禽业最重要的疫病之一 ,一直缺少有效的早期诊断方法。根据血清I型马立克氏病毒(MDV1)meq基因的核酸序列设计了一对寡苷酸核引物 ,分别对MDV1致瘤株 (京 - 1株 )、非致瘤株 (MD11/ 75C株、CV1988株 )、MDV2 (SB 1株 )、HVT(Fc 12 6株 )的核酸进行扩增。结果表明 :京 - 1株扩增到约 1 15kb核酸片段 ,MD11/ 75C株和CVI988株扩增到约 1 0kb核酸片段 ,而SB 1株、Fc 12 6株没得到任何扩增产物。PCR产物Dotblot结果显示 ,京 - 1株、MD11/ 75C株和CVI988株的扩增产物都与Digoxigenin标记的meq基因探针杂交 ,说明都是特异性的扩增产物。对MSB1细胞DNA及MDV感染鸡的血液及肝、肾肿瘤等DNA扩增都得到 1 15kb条带。将京 - 1株和CVI988株感染的细胞DNA混合再扩增 ,同时得到 1 15kb和 1 0kb的核酸条带 ,所以根据扩增产物大小可以区别致瘤株京 - 1株及非致瘤株CV1988株 ,这表示可从CVI988株病毒免疫鸡体内检测到MDV强毒 ,适于早期确诊强毒感染。

伏球及三种常用离子载体药物抗鸡柔嫩艾美耳球虫效果试验

伏球及三种常用离子载体药物抗鸡柔嫩艾美耳球虫效果试验原培勋宋敏训（山东省畜牧兽医总站济南２５００２２）（山东省家禽研究所）抗球虫药的效力大小一般用抗球虫指数来衡量，也可以卵囊产量来判定。当感染用药组的卵囊总数感染不用药组的卵囊总数×１００％＜５％时...

抗禽脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

利用提纯的禽脑脊髓炎病毒 (AEV)VR株CEF适应毒制备抗原 ,免疫BALB/c小鼠 ,应用杂交瘤技术以间接ELISA筛选获得 1株分泌抗AEV(VR)单克隆抗体的杂交瘤细胞。对制备的细胞上清及腹水进行单克隆抗体特性鉴定 ,经染色体计数、免疫球蛋白类及亚类测定、特异性试验、稳定性试验、SDS PAGE电泳 ,表明该杂交瘤细胞染色体数目介于90— 110条 ,该单克隆抗体亚类为IgG2a,分子质量为 14 2ku ,ELISA测定细胞上清效价为 1∶1× 10 4 ,腹水效价为 1∶1× 10 6,与其它病原无交叉反应 ,抗体分泌稳定。

肉仔鸡双氯芬酸钠中毒的诊治

双氯芬酸钠，又名双氯灭痛，是第三代强效非甾体解热镇痛药物，其作用较扑热息痛、阿司匹林强大，在人药中广泛使用。近些年来，某些兽医或兽药厂也将该药用于禽病的防治。笔者于2006年2月在山东某地诊治了3例肉仔鸡双氯芬酸钠中毒的病例，现报告如下，以引起兽医工作者和养鸡户注意。

新嘉系猪选育效果的灰色预测

选用新嘉系猪０—５世代的育种材料，利用ＧＭ（１，ｌ）模型对６月龄体重、活体膘厚、臀腿围、体长指数和瘦肉率等性状的选育效果进行动态模拟和预测。结果表明，至６世代时，各主要经济性状值都将达到或超过原定的育种目标。