高脂饮食对非酒精性脂肪肝影响机制研究进展

本文从高脂饮食容易引起胰岛素抵抗,影响脂质代谢的关键核转录因子从而调控相关蛋白酶的表达和活性,以及氧化过程中可能导致的脂质过氧化三个方面,综述了高脂饮食对肝脏脂质氧化代谢的影响。

环状RNA:潜在的新型miRNA活性调控分子

环状RNA(circular RNA,circRNA)是近年来RNA领域最新的研究热点.它是一类由特殊的选择性剪切产生且在真核细胞中广泛表达的环形内源性RNA分子.研究发现,circRNA富含microRNA(miRNA)结合位点,可以发挥竞争性内源RNA作用,作为miRNA"海绵"来解除对其靶基因的抑制效应.近年来,circRNA作为一种新型调控分子调控miRNA功能的发挥,受到众多研究者的青睐.本文综述circRNA的产生机制,及其调控miRNA的最新研究进展与研究方法等.

蟾酥对蟾蜍坐骨神经电生理特性的影响

目的观察蟾酥对蟾蜍坐骨神经电生理特性的影响。方法将剥制的蟾蜍坐骨神经干分为4组,分别在林格溶液和浓度为0.1%,0.2%,0.4%的蟾酥溶液中浸泡,测定各组不同浸泡时间坐骨神经干动作电位的幅度、宽度、传导速度、引起动作电位的阈强度及不应期等电生理指标。结果经不同浓度蟾酥溶液处理后,引起神经干动作电位的阈强度和动作电位的宽度均增大,不应期延长,传导速度减慢。结论蟾酥可降低神经的兴奋性,减慢传导速度。

马尾松花粉提取物对小鼠非酒精性脂肪肝的预防作用

目的研究马尾松花粉提取物对小鼠非酒精性脂肪肝的预防作用,并探讨潜在的作用机制。方法将60只小鼠随机分为空白对照组、高脂模型组、低剂量(20 mg/kg·d)、中剂量(40 mg/kg·d)和高剂量(80 mg/kg·d)马尾松花粉提取物组及葵花护肝片组(0.7 g/kg·d),马尾松花粉提取物组灌胃相应剂量的马尾松花粉提取物,连续2周给予高脂鼠粮,同时灌胃相应受试物,空白对照组和模型组给予同体积生理盐水。实验结束后检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL-C)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL-C)、甘油三酯(triglycerides,TG)及总胆固醇(total cholesterol,TC)水平;并检测肝组织中还原性谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及SOD活性。结果松花粉提取物明显降低高脂饮食所致小鼠血清ALT、AST活性以及TG、TC、LDL-C水平(P<0.05),提高SOD活性及HDL-C含量;同时小鼠肝组织MDA含量显著下降,GSH含量提高,SOD活性升高(P<0.05)。病理学结果显示,MPPE能显著减轻肝脏病理学损伤程度,表现为肝细胞脂肪变性及炎症的减轻。结论松花粉提取物对小鼠非酒精性脂肪肝具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化有关,并且具有剂量依赖性。

石榴皮水提物的镇痛实验研究

探讨石榴皮水提物的镇痛作用。采用小鼠热板法、小鼠醋酸扭体法和小鼠热水甩尾法,观察经胃给予0.06、0.6、6和12 mg/ml四种浓度的石榴皮水提物的镇痛作用。结果表明:0.6、6和12 mg/ml三种浓度的石榴皮水提物均可使热板所致小鼠舔足反应潜伏期明显延长(P<0.01),与给药前相比,潜伏期提高率最高达71.12%;可使醋酸所致小鼠扭体潜伏期明显延长(P<0.05),扭体次数明显减少(P<0.01),对扭体次数的抑制率最高达64.74%;可使热水所致小鼠甩尾潜伏期明显延长(P<0.01),与给药前相比,潜伏期提高率最高达112.59%;0.06 mg/ml浓度组对三个疼痛模型均无明显影响。说明0.6~12 mg/ml浓度的石榴皮水提取物具有镇痛作用,但0.06 mg/ml浓度的作用则不明显。

尼古丁对小鼠应激性胃溃疡影响的研究

探讨尼古丁对小鼠应激性胃溃疡的影响。采用预先尼古丁处理后应激性胃溃疡造模法和先造模后尼古丁处理法,观察经腹腔注射生理盐水和1 mg/kg、3 mg/kg、9 mg/kg三种不同剂量的尼古丁对应激3 h后胃粘膜的预防保护作用及应激3 h后腹腔注射生理盐水和1 mg/kg3、mg/kg9、mg/kg三种不同剂量的尼古丁恢复2 h后对应激后胃粘膜的治愈作用。尼古丁对应激性胃溃疡的预防保护作用:与对照组相比,1 mg/kg尼古丁组溃疡指数降低,但无显著性差异;3 mg/kg尼古丁组胃溃疡指数显著降低(P<0.05);9 mg/kg尼古丁组胃溃疡指数显著增加。尼古丁对应激性胃溃疡的治疗作用:与对照组相比,尼古丁处理组胃溃疡指数显著降低。说明在一定浓度范围内,急性尼古丁处理能明显抑制束缚应激诱发的胃粘膜损伤,促进胃粘膜损伤的修复和治愈作用。

apoE/LDLR双基因缺失幼龄小鼠主动脉中动脉粥样硬化相关基因的表达

利用RT-PCR以及实时定量RT-PCR检测11个动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)相关基因在1、2和3月龄的载脂蛋白E (apolipoprotein E, aopE)/低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor, LDLR)双基因缺失(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠主动脉中的表达变化,同时应用血生化指标和病理形态学观察AS 早期病变特点,探讨apoE和LDLR 基因联合缺失引发的血脂代谢紊乱和血管炎症损伤的关系以及AS 的炎症反应机制。结果显示,apoE-/-/LDLR-/-小鼠IL-1β、TLR2、MCP-1、ICAM-1、VCAM-1、GM-CSF、CD36和 ET-1表达在1月龄时较同龄野生型(wild type, WT)小鼠显著上调(P<0.05, P<0.01),PDGF-α和TNF-α表达在2 月龄时较同龄WT 小鼠显著上调,除ET-1表达在2龄时以及TLR2、VCAM-1和ICAM-1表达在3月龄时降至WT小鼠水平以外,其余各基因表达随年龄增长继续升高(P<0.05, P<0.01),其中 MCP-1 表达在 2 月龄时达到峰值。NF-κB在各年龄段apoE-/-/LDLR-/-小鼠中的表达与同龄WT 小鼠相比均无显著差异。各年龄段apoE-/-/LDLR-/- 小鼠血清TC、TG、LDL、HDL、TNF-α、IL-1β和 ox-LDL含量均显著高于同龄WT小鼠(P<0.05, P<0.01),并随年龄增长逐渐升高。apoE-/-/LDLR-/-小鼠1月龄时主动脉内膜出现少量的散在的脂质沉积,随着年龄增长病变区域增多,脂质沉积增厚。上述结果提示:apoE 和LDLR 双基因缺失形成的高脂血症可能通过刺激主动脉中炎症基因时序表达,起始并扩大病变部位的炎症反应,共同促进AS的发生发展。

内质网应激对2型糖尿病小鼠脂肪肝发生的影响

目的:探讨内质网应激(ERS)在2型糖尿病(T2DM)小鼠脂肪肝发生中的作用机制.方法:应用实时定量RT-PCR技术检测T2DM与非糖尿病小鼠肝脏ERS和脂代谢相关基因表达差异,并进行血生化指标及肝脏形态学检测.结果:与同龄非T2DM小鼠相比T2DM小鼠表现为:(1)胰岛素抵抗、空腹血糖升高(30.76±4.52vs12.80±2.13,14.73±2.74vs4.61±1.12).(2)肝脏TG和FFA水平明显升高(P<0.01);脂肪肝病变明显.(3)肝脏GRP78、XBP1、CHOP、EDEM1、GSK3β、apoB100、SREBP1c、ACCα及FAS的mRNA水平均显著上调(P<0.05).(4)血清TG、TC、LDL-C、FFA、ALT及AST显著升高(P<0.01).血清apoB100水平先升高,后下降(P<0.05).结论:ERS参与调节肝脏脂质及apoB100的合成与代谢过程,在T2DM小鼠脂肪肝发生过程中起着重要作用.

马尾松花粉提取物对小鼠前列腺肥大的预防作用

目的探究马尾松花粉提取物对小鼠前列腺肥大(benign prostatic hyperplasia,BPH)的影响。方法雄性昆明小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、BPH模型组、20 mg/kg·d低剂量、40 mg/kg·d中剂量、80 mg/kg·d高剂量马尾松花粉提取物组和非那雄胺(0.8 mg/kg·d)组。预先灌胃松花粉提取物2周之后,在腹腔注射丙酸睾酮建模的同时连续灌胃3种剂量的马尾松花粉提取物或非那雄胺4周。实验结束后,用试剂盒测定IL-1?、IL-6、TNF-?、DHT、NO、NOS以及PACP的水平;另外剖取前列腺和脾脏,测定前列腺指数和脾脏指数。结果 3种剂量的松花粉处理均降低了BPH小鼠的前列腺指数、炎性细胞因子、DHT浓度及PACP、NOS的活性,并减少了NO的生成。结论马尾松花粉提取物可以明显降低BPH病理症状及相关生化指标,对BPH起到一定的保护作用,其作用机制可能与其抗炎抗氧化活性有关。

大鼠束缚-浸水应激不同时间段下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴c-Fos蛋白的表达

研究大鼠束缚-浸水应激过程中下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴c-Fos蛋白表达的时空模式.分别给予雄性大鼠束缚-浸水应激0、30、60、120、180min,0 min作为对照组,然后用免疫组化技术检测HPA轴中c-Fos蛋白的表达.与对照组相比,应激30、60、120、180min组下丘脑室旁核、腺垂体中的c-Fos阳性细胞数显著增多(P<0.05),但对每一部位来说,这4个不同时间段c-Fos舶蛋白的表达均无明显差异.5组大鼠的肾上腺皮质束状带中均未观察到c-Fos蛋白的表达.这些结果提示室旁核和腺垂体参与束缚-浸水应激反应.

不同n-6/n-3PUFA比率对载脂蛋白E缺失小鼠脂质成分的影响

目的探讨不同n-6/n-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)饮食对载脂蛋白E缺失(apolipoprotein E deficient,apo E-/-)小鼠血脂水平及脂质成分的影响,以冀为高脂血症患者的日常膳食提供参考。方法 8周龄雄性apo E-/-小鼠随机分为5组(n=12),在基础鼠粮基础上添加紫苏籽油和红花油,使n-6/n-3 PUFA比率为:组1 1.28,组2 5.03,组3 9.98,组4 68.26,总脂肪量5%,对照组饮食基础鼠粮,干预6周后检测血清脂质水平,气相色谱-质谱联用仪分析血清和肝脏组织中脂肪酸组成。结果与其余各组相比,组4血清甘油三酯(TG)水平升高;与对照组相比,4种饮食干预均显著降低血清低密度脂蛋白胆固醇酯(LDL-C)水平,其中组3饮食降低程度最大;组4与组1相比,血清和肝脏组织中n-6脂肪酸分别增加了28%和48%,花生四烯酸(arachidonic acid,AA)分别增加了118%和122%,亚油酸(linoleic acid,LA)分别增加了19%和29%;总n-3 PUFA分别降低了39%和44%,二十碳五烯酸(EPA)分别降低了63%和65%。结论随着饮食中n-6/n-3 PUFA比率的增加,血清和肝脏组织中n-6 PUFA含量增加,n-3 PUFA含量降低。n-6/n-3 PUFA比率9.98饮食可最大程度降低血清LDL-C水平,可作为高脂血症患者的日常膳食参考。

德国小蠊抗药性机理

德国小蠊(Blattella germanica)是一种重要的室内卫生害虫,化学防治是目前主要的防治手段,但抗药性已逐渐成为制约德国小蠊防治的关键因素。德国小蠊抗药性的产生存在多种机理,本文从行为抗性、表皮穿透性降低、代谢抗性、靶标抗性及微生物降解等方面对德国小蠊抗药性产生机理进行了综述,重点阐述了近年来德国小蠊抗药性机理最新的研究进展。

鲤鱼LGP2的基因克隆与表达

利用反转录-聚合酶链式反应和互补脱氧核糖核酸(cDNA)末端快速扩增技术克隆得到鲤鱼的遗传和生理学实验室蛋白2(LGP2)基因的cDNA全长,并对其在鲤鱼抵抗病毒和细菌感染过程中的免疫作用进行研究。结果表明:鲤鱼的LGP2的cDNA全长共2 978 bp,开放阅读框为2 037 bp,编码679个氨基酸;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测鲤鱼的LGP2的信使核糖核酸(mRNA)表达于所有被测组织中,且在鳃和脑中的表达量较大,而在性腺和血液中的表达量较小;采用poly I:C和嗜水气单胞菌腹腔注射刺激鲤鱼后,各组织中LGP2的mRNA表达量均有所增大;LGP2是鲤鱼以依赖维甲酸诱导基因I样受体(RIG-like receptors,RLR)信号通路的方式进行抗病毒和抗细菌天然免疫过程中的重要调节因子。

慢病毒载体感染人主动脉血管平滑肌细胞的效率

为探讨慢病毒载体感染人主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)株效率的最佳条件,培养人主动脉VSMCs,携带UbiEGFP-MCS-IRES-Puromycin报告基因表达元件慢病毒载体按0、1、10、50和100等不同病毒感染复数(MOI)或完全培养液、完全培养液加polybrene、感染增强液、感染增强液加polybrene等不同感染试剂进行细胞感染,48 h后荧光显微拍照,分析感染效率;MTT法测定不同MOI慢病毒载体感染48 h后细胞活性;荧光显微镜观察病毒感染后第2代和第10代细胞中荧光强度。结果显示,随MOI的增加,感染效率逐渐增加,细胞活力逐渐降低,MOI为100时,对VSMCs株具有接近90%的感染效率,添加polybrene后感染效率显著升高,完全培养液与感染增强液间无显著性差异。第10代细胞与第2代细胞相比荧光信号无差异。

饲粮中添加不同水平油菜花粉对蛋黄和鸡肉组织脂肪酸组成的影响

目的分析饲粮中添加不同水平油菜花粉对蛋黄和鸡肉组织脂肪酸组成的影响。方法选用210日龄的海兰褐壳蛋鸡540只,随机分为4组,基础饲粮中分别添加0%(A组)、3%(B组)、5%(C组)、8%(D组)的油菜花粉,预饲1周后,连续饲喂50 d后改喂基础饲粮,观察至第70 d。结果实验前期(0~50 d)蛋黄中ω-3PUFA、α-ALA、DHA含量随着饲粮中油菜花粉添加量的增加而增加,D组增加极显著(P【0.01)。蛋黄中ω-6/ω-3PUFA比值随着花粉添加量的增加而降低,其中D组在第5d至30d降低极显著(P【0.01)。实验后期(50~70d)蛋黄中ω-3 PUFA、α-ALA、DHA含量和ω-6/ω-3PUFA比值逐渐恢复至对照组水平。添加花粉对脑组织中脂肪酸组成无显著影响(P】0.05);胸肌中ω-3PUFA含量随着花粉添加量的增加而明显降低,其中C组差异极显著(P【0.01),D组差异显著(P【0.05);各花粉添加组鸡肝中ω-3PUFA含量分别为1.96%、1.89%、3.11%和3.28%,D组差异极显著(P【0.01),脂肪组织中ω-3PUFA含量分别为1.61%、1.84%、1.86%、2.27%,D组差异显著(P【0.05)。结论饲粮中添加油菜花粉能够提高蛋黄、肝脏和脂肪组织中ω-3PUFA的含量,在3%、5%和8%三个花粉添加水平中以8%花粉添加水平效果最好。

五种染色方法对小鼠圆形精子染色效果的比较

比较五种染色方法对小鼠圆形精子(round spermatid,ROS)染色的效果,寻找一种鉴定圆形精子简单、有效的染色方法。以性成熟的昆明白鼠为实验材料,制备睾丸细胞悬液,分别用瑞氏、瑞氏-姬姆萨、姬姆萨、改良品红、苏木精五种方法对小鼠生精细胞进行染色,比较不同染色方法下圆形精子的形态。相比于其它四种染色方法,瑞氏-姬姆萨染色后能清晰地观察到圆形精子细胞膜和核膜的边缘,核质分明,与其它时期生精细胞区别明显。瑞-姬染色法是一种简单、有效的鉴定圆形精子形态的染色方法。

不同比率n-6/n-3多不饱和脂肪酸对apoE基因敲除小鼠炎症相关因子表达的影响

目的研究不同比率n-6／n-3多不饱和脂肪酸饮食对模型小鼠脾脏和主动脉组织中炎症相关因子表达的影响。方法8周龄雄性apoE基因敲除小鼠分别经不同比率n-6／n-3（组1：1．28；组2：5．03；组3：9．98；组4：68．26）多不饱和脂肪酸分别饮食干预，全长主动脉经油红O染色显示动脉粥样硬化（AS）病变程度，用实时定量RT-PCR技术分析不同饮食组小鼠脾脏和主动脉中炎症相关因子的表达特征。结果随着饮食中n-6／n-3比率升高，小鼠动脉粥样硬化病变逐渐加重。与组4相比，组1，2，3饮食显著抑制AS病变（P〈0．05），并显著抑制主动脉组织中趋化因子MCP-1和黏附因子VCAM-1基因表达（P〈0．05）。与组4相比，组1饮食显著抑制脾脏促炎因子IL-6和TNFα表达（P〈0．05）。各组饮食均不影响脾脏和主动脉中抗炎因子IL-4表达（P〉0．05）。结论低比率n-6／n-3多不饱和脂肪酸（1．28～9．98）饮食可通过抑制促炎因子IL-6、TNFα和趋化因子MCP-1、黏附因子VCAM—1基因表达延缓apoE基因敲除小鼠AS的发展。

涡虫的基因沉默作用

涡虫具有惊人的再生能力,作为经典的模型生物应用于后生动物的研究工作。基因沉默是指生物体中特定基因由于外源性或内源性因素的作用而无法表达的现象。目前,RNA干扰作用作为诱导涡虫基因沉默的有效技术,在涡虫发育生物学和分子生物学的研究中发挥重要作用。对涡虫中的基因沉默作用进行了归纳总结,为理解涡虫再生的分子机制提供了基础资料。

涡虫整体原位杂交方法的优化改良

从原位杂交样品的预处理、固定液选择、杂交温度和时长选择、封闭时长等方面对日本三角涡虫整体原位杂交技术进行优化改良。实验表明,采用NAC处理10 min、w=4%的多聚甲醛溶液固定、56℃杂交48 h以及封闭3 h的改良方法可获得高特异性、低背景且着色清晰的实验结果。

涡虫神经再生相关基因及其调控通路

神经系统在调节动物生理功能、控制动物行为上发挥着重要作用。涡虫因其独特的再生特性,已被用作研究神经再生机制的模式生物。基于三种涡虫神经再生相关文献,着重对涡虫神经再生过程中相关基因的分布、作用机制及重要信号通路等内容进行综述,探讨涡虫神经再生的分子机制,为研究高等动物如人类神经系统的发育、神经相关疾病的治疗等提供背景资料。