实验用食蟹猴的生物学指标

目的提供实验用食蟹猴有关的生理学、血液学指标。方法选取24只3～5岁食蟹猴,雌雄各半,分别测量其心电图、体温、血压、呼吸率、心率、尿常规、骨髓象、体重、脏器重量、脏器系数、肠道长度和相关的血液生理生化指标。结果雌雄相比凝血:TT差异有显著性(p<0.05),其余差异无显著性(p>0.05);血生化GLU差异有显著性(p<0.05),其余差异无显著性(p>0.05);心电图、体温、血压、呼吸率、心率、尿常规、肠道长度:雌雄之间差异无显著性(p>0.05);骨髓象:晚幼红细胞、粒红比差异有显著性,其余差异不显著;脏器重量、脏器系数:雌雄之间体重、肺和胸腺的脏器系数差异有显著性(p<0.05),肺、胸腺的重量差异有极显著性(p<0.01),其余指标差异无显著性(p>0.05)。结论本实验所测得的各项指标为相关的研究提供基础资料。

实验用猕猴生物学指标的测定

目的提供实验用猕猴的正常生理学、血液学指标。方法选取24只3～5岁猕猴,雌雄各半,分别测量其生理学指标(心电图、体温、血压、呼吸率、心率、尿常规、骨髓象、体重、脏器重量、脏器系数、肠道长度)、血液学(血常规、凝血酶原时间)和血生化指标。结果雌雄相比血常规:RBC、Hb、HCT有显著性差异(P<0.05);血生化:GLU有显著性差异(P<0.05);心电图、体温、血压、呼吸率、心率、尿常规、骨髓象、肠道长度:雌雄之间无显著性差异(P>0.05);雌雄之间肺的脏器系数有显著性差异(P<0.05),胸腺重量及脏器系数有极显著性差异(P<0.01)。结论不同性别猕猴的某些生理生化等指标有显著差异,进行各种生物医学实验时应注意。

紫杉醇纳米粒注射液在荷瘤小鼠体内的组织分布及抗肿瘤作用

目的:研究抗癌药物紫杉醇纳米粒注射液在荷瘤小鼠体内的组织分布及抗H22肝癌的作用。方法:将昆明种小鼠前肢腋皮下接种H22肝癌细胞,待瘤体长到1 g,分别尾静脉注射紫杉醇纳米粒注射液及市售紫杉醇注射液,采用液相色谱-质谱-质谱联用的方法测定荷瘤小鼠体内不同组织中紫杉醇的含量。结果:两种不同制剂的紫杉醇主要分布于胰腺、卵巢、脾脏,其抗肿瘤作用以2.5 mg/kg的紫杉醇纳米粒注射液更有效;紫杉醇纳米粒注射液在胰腺、卵巢、脾脏、实体瘤中的分布明显高于紫杉醇注射液(P<0.05);其它组织器官分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:两种紫杉醇注射液均有明显抗肿瘤作用,但紫杉醇纳米粒注射液在胰腺、卵巢、实体瘤的靶向性高于紫杉醇注射液,其分布与疗效有一定关联性。

紫杉醇纳米制剂的药动学、荷瘤小鼠组织分布及系统毒性

目的研究紫杉醇纳米制剂的药动学,荷瘤小鼠的组织分布及系统毒性。方法对紫杉醇纳米制剂与市售紫杉醇注射液进行系统比较研究。结果(1)药动学:相同剂量的紫杉醇纳米制剂与紫杉醇已上市注射液静脉注射自身前后交叉设计,犬血药浓度采用HPLC法测定。PK结果表明,纳米制剂AUC、CL比同剂量注射液低(3.710±0.961vs 6.984±1.694μg.h/ml,9.032±2.051 vs 4.964±1.599ml/h.kg),其它参数比较无明显差异;(2)荷瘤小鼠组织分布:昆明种小鼠腋皮下接种H22肝癌细胞,瘤长至约1g后,随机分为2组(2.5mg/kg、4.0mg/kg),腹腔注射给药。两制剂均对H22肝癌细胞显示出良好的肿瘤治疗效果,且以2.5mg/kg纳米制剂组疗效更优;采用LC-MS/MS方法测定了二制剂在H22肝癌细胞荷瘤小鼠体内的主要组织分布,皆以小鼠胰腺、脾脏、卵巢分布最多,但纳米制剂明显高于注射液,血液分布低于注射液;(3)系统毒性:比格犬30只,♀♂各半,随机分为纳米制剂与注射液各2组(40mg/m2、80mg/m2),1个辅料对照组,单次静脉给药。给药后一般毒性反应症状与程度、血常规、血生化2组比较无明显差异;给药后14d处死动物,大体解剖无肉眼可见改变,脏器系数无明显异常;病理检查发现肝、肺有明显的病理改变,病理改变形式基本一致,但80mg/m2组病变程度明显比40mg/m2组重;40mg/m2给药时纳米制剂引起的病变程度比注射液轻。结论紫杉醇制成纳米制剂后,其体内药动行为发生明显变化,其组织分布快,有靶向趋势;以少于等剂量注射液的给药剂量即可达到相同的肿瘤治疗效果,而所引起的毒副反应明显轻于同剂量的注射液;值得对紫杉醇纳米制剂进行更深入的开发研究。

重组人脑钠肽对急性心衰犬血管紧张素Ⅱ和内皮素-1的影响

目的研究重组人脑钠肽（rhBNP）对普萘洛尔诱导比格犬急性心力衰竭后血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、内皮素-1（ET-1）、尿量、尿钠、尿钾及血钠、血钾含量的影响。方法静脉推注普萘洛尔诱导急性心力衰竭，静脉滴注普萘洛尔维持心衰，股动脉插管监测血流动力学指标变化，电磁流量计测量心输出量，输尿管插管测量尿量，模块式全自动生化仪测定尿钠、尿钾、血钠和血钾含量，放免法测定血浆AngⅡ和ET-1的含量。结果心衰犬静脉滴注重组人脑钠肽后，AngⅡ和ET-1的含量较基础值降低（P〈0．05～0．01），尿量、尿钠明显增加（P〈0．05），尿钾含量减少（P〈0．05～0．01）。结论rhBNP降低普萘洛尔所致比格犬急性心力衰竭血浆AngⅡ和ET-1的浓度，并具有明显的利钠利尿的作用，对急性心衰产生保护作用。

复方制剂中头孢哌酮与他唑巴坦在犬体内药动学的相互影响

目的考察不同给药剂量的头孢哌酮(CFP)/他唑巴坦(TAZ)复方制剂(简称CFP/TAZ)中CFP与TAZ在犬体内药动学行为及相互影响。方法取Beagle犬4只,单次静脉注射CFP(110mg/kg)、TAZ(56mg/kg)及3种不同剂量(31mg/kg、125mg/kg、500mg/kg)的CFP/TAZ,RP-HPLC测定其血药浓度,拟合药动学曲线及计算药动学主要参数。结果单次静脉注射CFP、TAZ及CFP/TAZ在Beagle犬体内的处置都符合二室模型。单次静脉注射CFP与等剂量CFP/TAZ中CFP的血药浓度方差分析无差异,与3种不同剂量CFP/TAZ的药动学参数(T1/2α、T1/2β、Vc、CLS)比较亦无差异,其代谢皆符合线性代谢关系。单次静脉注射TAZ与等剂量CFP/TAZ中TAZ在Beagle犬体内处置亦符合二室模型,其血药浓度及药动学参数比较皆无明显差异。结论CFP、TAZ及CFP/TAZ中的CFP、TAZ在犬体内药动学行为无相互影响,提示CFP/TAZ具有药动学理论的可行性。

豨莶草胶囊对比格犬凝血功能及血液流变学的影响

目的:观察豨莶草胶囊对比格犬凝血功能及血液流变学的影响。方法:32只比格犬随机分为4组,分别为豨莶草胶囊250、500和1 000mg.kg-1剂量组和溶媒对照组,各组每日灌胃给药1次,连续10周。末次给药后1h,采血测定各项指标,观察豨莶草胶囊对比格犬凝血功能及血液流变学的影响。结果:豨莶草胶囊低、中和高剂量均能降低比格犬血小板凝集率、红细胞压积、全血粘度及血浆粘度,加快血沉,且呈剂量依赖性。结论:豨莶草胶囊可改善血液流变学,抑制血小板聚集,具有抗血栓形成和抗凝血作用。

重组瑞替普酶对体内诱发形成血栓的快速溶栓作用

目的建立以胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成与角叉菜胶诱发大鼠尾部血栓形成模型,评价重组瑞替普酶(Reteplase)对体内诱发血栓形成的快速溶栓作用,为临床应用提供依据。方法将Reteplase与诱导剂混匀后给小鼠作尾静脉注射,观察给药后5min内小鼠死亡数和15min内小鼠偏瘫恢复数,计算药物对小鼠形成脑血栓的保护率;大鼠足跖皮下注射角叉菜胶使尾部形成血栓后给药,观察血栓平均长度及再通率。结果Reteplase对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓有迅速溶栓、急救效应;对角叉菜胶诱发大鼠尾部混合血栓有显著溶栓作用。结论溶栓作用呈现明显的剂量-效应关系。本文首次报道了Reteplase对体内诱发血栓的溶栓作用。

葡膦酰胺在实验动物体内的药代动力学、组织分布及排泄

目的:研究葡膦酰胺在实验动物体内的药代动力学(PK)、排泄及组织分布特征。方法:Beagle犬iv给药,剂量为60,30,15 mg.kg-1,LC-MS/MS测定血药浓度,3P97软件计算药代动力学参数。18只小鼠分为3组,尾iv给予300 mg.kg-1葡膦酰胺,断头处死,测定葡膦酰胺组织分布。10只大鼠分为2组,分别给予300和100 mg.kg-1葡膦酰胺,给药后收集不同时间段的尿和粪样品,评价葡膦酰胺的排泄过程。结果:葡膦酰胺在Beagle犬体内代谢分布呈二室模型,60,30,15 mg.kg-1各组T1/2β和AUC值分别为614.8,544.0,596.3 min和37173.1,21760.0,10741.7μg.mL-1.min。小鼠给药4 h后,在肾脏中的药物浓度最高(2780.2μg.g-1);在卵巢和子宫中分布亦较高,分别为2684.5和2369.4μg.g-1。大鼠尾静脉注射300 mg.kg-1葡膦酰胺后,原型药物经尿排泄量为26.9%,排泄速率在5～8 h达到峰值,为1.36 mg.h-1;经粪排泄量为0.12%,排泄速率在2～5 h达到峰值,为4.3μg.h-1;剂量为100 mg.kg-1时,原型药物经尿排泄量为46.8%,排泄速率在8～12 h后达峰值,为1.29 mg.h-1;经粪排泄量为0.21%,经粪排泄速率在5～8 h达峰值,为6.1μg.h-1。结论:葡膦酰胺静脉给药后血药浓度、AUC与给药剂量呈线性关系;在小鼠各组织分布广泛,以肾、卵巢、子宫、肺、脾分布较多;1～24 h内25%～50%以原型药物从尿排出。

17-烯丙氨基格尔德霉素体内外抗肿瘤作用研究

目的研究17-烯丙氨基格尔德霉素的体内外抗肿瘤作用。方法 MTT法评价17-烯丙氨基格尔德霉素对人肿瘤细胞株的体外抑制作用;荷瘤小鼠静脉注射20,40,80 mg/kg剂量的17-烯丙氨基格尔德霉素,观察小鼠对异种移植实体瘤、腹水瘤及P388白血病的抗肿瘤作用。结果 17-烯丙氨基格尔德霉素对人小细胞肺癌细胞、BEL-7402肝癌细胞、MCF7乳腺癌细胞均有明显抑制作用,可明显抑制皮下移植的S180肉瘤、Lewis肺癌、B16黑色素瘤的生长,并明显延长EAC腹水瘤、H22肝癌腹水瘤、P388白血病小鼠的生存时间。结论 17-烯丙氨基格尔德霉素具有显著的体内外抗肿瘤作用。

重组人粒细胞集落刺激因子对食物中毒致白细胞减少症的试验治疗

目的T-2毒素是最常见的食物中毒毒素之一,它可致严重的中毒症状,如呕吐、腹泻、造血组织损伤等。为探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对食物中毒致模型动物白细胞(WBC)减少症的有效性,对以T-2毒素中毒致WBC减少症的模型进行了研究。方法以猫为受试动物,设rhG-CSF30μg/kg、150μg/kg给药组(s.c.,×7次)和模型对照组,各组T-2毒素隔日给药1次,至WBC减少至30%为止。测定给药后动物体重、主要脏器系数、血常规等。结果rhG-CSF给药后可明显减轻中毒症状和改善造血机能。结论rhG-CSF对食物中毒致WBC减少症有效。

两种美托洛尔缓释片在比格犬体内的药代动力学对比研究

目的研究富马酸美托洛尔缓释片的药物代谢动力学行为和缓释特性,并与已上市琥珀酸美托洛尔缓释片对比。方法采用随机交叉自身对照试验设计,对12只健康比格犬(雌雄各半)先后单次和多次灌胃富马酸美托洛尔缓释片(T药)和琥珀酸美托洛尔缓释片(R药)。采用LC-MS/MS法测定血药浓度;采用DAS 2.0药代动力学软件求算药代动力学参数;采用Excel软件进行统计分析。结果统计结果表明单次和多次口服给药,两种缓释片的AUC,t1/2,T max以及C max无显著性差异,生物等效.结论富马酸美托洛尔缓释片具有良好的缓释性。

聚乙二醇修饰的蓖麻毒蛋白A链的免疫原性和在小鼠体内急性毒性研究

目的研究单甲氧聚乙二醇(mPEG)与蓖麻毒蛋白A链(RA)偶联后RA免疫原性和毒性的改变。方法从天然蓖麻籽中提取纯化的RA,经与含活性马来酰亚胺基团的mPEG反应偶联,得到纯化的mPEG偶联RA。用蛋白质印迹方法比较RA修饰前后的免疫原性,通过测定半数致死量(LD50)比较RA修饰前后的毒性。结果mPEG偶联RA后免疫原性和毒性均明显下降。偶联前RA链的LD50为2.37 mg.kg-1,经mPEG修饰后RA的LD50为6.15mg.kg-1。结论聚乙二醇能遮蔽RA,降低其免疫原性和毒性。

注射用依托泊苷纳米粒临床前的药动学及组织分布

目的比较试验制剂注射用依托泊苷纳米粒与参比制剂依托泊苷注射液的生物等效性及组织分布特征。方法比格犬随机交叉单次静脉注射给予试验制剂与参比制剂各10 mg.kg-1进行药动学试验,评价生物等效性。荷瘤小鼠(雌性)静脉注射给予25 mg.kg-1试验制剂与参比制剂,测定不同时间点各组织器官中的药物含量。药物浓度采用以替尼泊苷为内标的荧光检测法测定。结果试验制剂与参比制剂主要药动学参数分别为tmax:(1.500±0.000)、(1.500±0.000)h;ρmax:(3.033±0.644)、(3.323±0.552)mg.L-1;AUC(0-9.5 h):(5.566±0.592)、(7.173±0.920)h.mg.L-1。给药后5 min,注射用依托泊苷纳米粒在肝、肠、肌肉、脾及实体瘤中分布量较高,给药后3 h在实体瘤的含量显著高于参比制剂。结论试验制剂与参比制剂生物不等效,试验制剂在实体瘤中的含量高于参比制剂,静脉注射后3 h差异显著。

洛伐他汀烟酸缓释片在比格犬体内的药代动力学

目的研究洛伐他汀烟酸缓释片在Beagle犬体内的药动学变化。方法6只Beagle犬采用两周期随机交叉实验设计,口服500mg洛伐他汀烟酸缓释片或烟酸片,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)内标定量法测定烟酸血药浓度及药代动力学参数。结果Beagle犬口服给予洛伐他汀烟酸缓释片和烟酸片后,两者在犬体内的代谢均表现为一室模型,主要药动学参数:T12(Ke)64.99min vs.106.09min,T(peak)75.67min vs.112.20min,C(max)52.95μg.ml-1vs.28.50μg.ml-1,AUC 10831.10 vs.9086.42μg.ml-1。结论RP-HPLC内标定量测定烟酸,该方法操作简便、准确灵敏、重现性好,可用于烟酸在体内的药动学研究。单剂量口服洛伐他汀烟酸缓释片后测得的T12(Ke)、T(peak)和C(max)与烟酸组相比,差异性显著;AUC基本一致。缓释片的T12(Ke)、T(peak)明显长于烟酸片,Cmax低于烟酸片,这表明我们制备的复方洛伐他汀烟酸缓释片在Beagle犬体内具有缓释作用,相对生物利用度基本一致。

葡膦酰胺静脉给药对比格犬的毒性作用

目的:评价葡膦酰胺对比格犬的安全性。方法:观察葡膦酰胺单次静脉注射和连续静脉注射3个月对比格犬的毒性作用。结果:葡膦酰胺单次静脉注射比格犬最低致死剂量为100 mg/kg,最高非致死剂量为50 mg/kg,近似致死剂量范围为75～100 mg/kg。连续静脉注射20,40,60 mg/kg,每周1次,连续3个月,无严重不良反应症状,但组织病理学检查发现中、高剂量组出现广泛组织脏器损伤,低剂量组个别脏器出现轻微病理改变。结论:在本实验条件下,40,60 mg/kg剂量葡膦酰胺每周1次,连续3个月静脉给药可造成比格犬广泛的脏器损伤。每周1次,连续3个月静脉给药剂量应低于20mg/kg。

4~5周龄D_2BF1小鼠的血液学参考值、主要脏器重量及脏器系数的测定

目的测定4~5周龄D2BF1小鼠血液学参考值,且与同龄DBA/2、C57BL小鼠比较,并提供D2BF1小鼠主要脏器重量、脏器系数的参考值。方法随机选取4~5周龄D2BF1小鼠雌雄各10只,分别称重,摘除眼球采血后,颈椎脱臼处死,摘除主要脏器称重,并将测定的血液学值与同龄的C57BL和DBA/2小鼠进行比较分析。结果D2BF1小鼠雌雄之间血液值MCV有显著性差异(P<0.05),其余无显著性差异(P>0.05)。与同龄的C57BL小鼠相比,血液值WBC、Lymph%、Gran%有极显著性差异(P<0.01)。其余无显著性差异(P>0.05)。与同龄的DBA/2小鼠相比,WBC、Mid%、RBC、MCH有极显著性差异(P<0.01),Mid有显著性差异(P<0.05)。其余无显著性差异(P>0.05)。结论D2BF1代小鼠白细胞及分类明显低于C57BL和DBA/2小鼠,值得进一步研究。

重组人EGF-IL-18融合蛋白直接竞争ELISA方法的建立

目的：建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18 （rhEGF-IL-18）融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学.方法：用棋盘法确定包被抗体和酶标抗原工作浓度,建立直接竞争ELISA方法,并对其进行方法学评价.结果：包被抗体和酶标抗原的最适工作浓度为4 μg/mL和1∶1 000.建立的标准曲线的曲线范围为100～ 900 ng/mL,R2为0.9898;日内精密度和日间精密度的最大变异系数分别为2.42％和2.20％;回收率95.3％ ～103.0％;样品在室温放置1 h、冻融2次和冻存20 d三种条件下检测结果均较稳定,相对标准差均小于15％;定量下限为20.0 ng/mL.结论：本研究建立的ELISA方法稳定且可行.

食蟹猴骨髓采集穿刺方法及其骨髓象测定

为探索采集食蟹猴骨髓的操作方法及其正常骨髓象指标,试验采集了60只食蟹猴的髂骨骨髓,并测定其骨髓象、测得的骨髓象及采集过程中的注意事项。结果表明,可以顺利的采出骨髓,雌雄之间晚幼红细胞、粒红比有显著性差异(P<0.05),其余无显著差异。