灭瘢膏减少瘢痕形成的作用及其机制研究

目的探讨灭瘢膏减少瘢痕形成的作用及其机制。方法HPLC法分析灭瘢膏所含成分。建立小鼠创伤模型,给予灭瘢膏干预后观察创面愈合率,Masson、天狼猩红染色分析胶原纤维、I型胶原蛋白(Col1)在愈伤组织中的表达;MTT法检测隐丹参酮、丹参酮Ⅱ_(A)对人成纤维细胞(HFF-1)、人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)、角质形成细胞(HaCaT)增殖活性的影响,划痕实验检测隐丹参酮、丹参酮Ⅱ_(A)对HaCaT细胞迁移率的影响;ELISA法检测愈伤组织和HFF-1、EA.hy926、HaCaT细胞表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)水平,Western blot法检测愈伤组织和HFF-1细胞TGF-β_(1)、TGF-β_(3)、Col1表达。结果灭瘢膏中主要成分是丹参酮Ⅱ_(A)与隐丹参酮。灭瘢膏作用第3、7天时能促进大鼠创面愈合(P<0.05,P<0.01),作用第15天时能减少大鼠愈伤组织胶原纤维(P<0.01),升高VEGF-A和EGF水平(P<0.05);灭瘢膏作用第7、15天时均能抑制TGF-β1、TGF-β3蛋白表达(P<0.01)。灭瘢膏能抑制HFF-1、EA.hy926、HaCaT细胞增殖活性及HaCaT细胞迁移率(P<0.05,P<0.01),升高3种细胞VEGF-A水平(P<0.01),抑制Col1蛋白表达(P<0.01)。结论灭瘢膏中丹参酮类成分在伤口愈合过程中调节愈伤组织中TGF-β、EGF以及VEGF-A等相关生长因子的分泌,减少胶原纤维的沉积,从而减少瘢痕形成。