低氧预适应大鼠脑脊液减轻氧糖剥夺对培养新生鼠海马神经元的损伤及可能的机制

本文旨在观察低氧预适应(hypoxic preconditioning,HPC)Wistar大鼠脑脊液对新生鼠海马神经元氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)损伤的影响及机制。原代培养大鼠新生鼠(出生12h)海马神经元,随机分为正常对照组、OGD组(OGD培养1.5h)、正常脑脊液组(正常大鼠脑脊液培养1d+OGD培养1.5h)和HPC脑脊液组(HPC大鼠脑脊液培养1d+OGD培养1.5h),各组n=6。用含1mmol/L Na2S2O4的无糖Earle's液培养大鼠新生鼠海马神经元1.5h建立OGD模型。应用激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测各组神经元凋亡情况,用免疫荧光染色法检测各组神经元Bcl-2/Bax表达水平。结果显示,正常对照组偶见凋亡早期细胞,OGD组见大量中晚期凋亡细胞;与OGD组和正常脑脊液组相比,HPC脑脊液组细胞凋亡显著减少(P<0.01),细胞生存率提高(P<0.01)。OGD组和正常脑脊液组细胞Bcl-2蛋白荧光强度分别为0.040±0.003,0.457±0.044,而HPC脑脊液组细胞Bcl-2表达荧光强度增至1.923±0.078(P<0.01),且阳性细胞数量亦明显增加(P<0.01);Bax表达则呈相反趋势,相对OGD组(1.548±0.068)和正常脑脊液组(1.072±0.219),HPC脑脊液组荧光强度(0.411±0.039)明显降低(P<0.01),且阳性细胞数量亦明显减少(P<0.01)。以上结果提示,HPC脑脊液能减轻OGD损伤诱导的神经元凋亡,该神经保护效应与上调Bcl-2表达、下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax有关。