猪肌肉生长抑制素基因侧翼区新微卫星标记的鉴定及分析

提取包含猪肌肉生长抑制素基因的BAC克隆 ,以EcoRⅠ进行酶切并回收其中大于 4kb的酶切产物 ,连接到pGEM 3zf(+)载体后得到了亚克隆。测序分析表明 ,插入片段不属于猪肌肉生长抑制素基因的一部分 ,但其中包含 13拷贝的 (TG)n重复。以该重复序列的侧翼设计引物对猪的基因组进行分析 ,得到了PCR扩增产物。对一个“双肌臀”大白猪家系进行PCR扩增及非变性聚丙烯酰胺凝胶分析的结果表明 ,该位点以并显性方式遗传 ,是一个新的微卫星标记。对莱芜猪、长白猪、大白猪、杜洛克、皮特兰、民猪和二花脸 7个品种的 381个无关个体的检测均显示该基因座只有两个等位基因 ,重复数分别为 13和 19,是一种多态性较低的微卫星标记。与包含该基因的序列(AY2 0 812 1)比对分析表明 ,该微卫星属于肌肉生长抑制素基因 (MSTN)侧翼区的一个分子标记 ,在猪肉用性状QTL的精细定位和MSTN功能分析中将发挥重要作用。