临沂烟区烟草病毒病防治策略探讨

烟草病毒病害是临沂烟区的最主要病害。由于气候等因素的影响,烟草病毒病在临沂烟区发生日益严重,已成为阻碍生产的主要因素之一。笔者分析了近年烟草病毒病严重发生的原因,并通过试验和经验提出了临沂烟区烟草病毒病的主要防治措施。

烟草及土壤中吡虫啉的残留分析方法研究

采用固相萃取技术(SPE-C18小柱)对烟草中吡虫啉进行了残留分析方法研究。并对固相萃取SPE-C18小柱的再生使用也进行了研究。采用本方法,具有回收率高(回收率为88.35%～98.57%)、重现性好(标准偏差为2.30%～8.07%)、操作方便、速度快、安全、节省成本、对环境污染少的特点。

烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆、原核表达及抗血清的制备

从山东省感病的烟草上分离获得了一烟草蚀纹病毒(TEV)分离物,命名为 TEV-SD1。根据已报道烟草蚀纹病毒外壳蛋白(coat protein CP)基因序列设计并合成2条引物,通过 RT-PCR 扩增得到长度约800 bp 的目的片段。将目的片段与质粒 pET-22b(+)连接,构建了包含 TEV CP 基因的原核表达载体 pETEV-CP,并导入大肠杆菌 BL21中。序列分析表明:TEV-SD1的 CP 基因全长789bp,编码263个氨基酸;与 GenBank 中已报道的 TEV 5个分离物 CP 基因相比,核苷酸及推导的氨基酸序列同源性为94.1％～98.6％。37℃培养条件下,BL21/pETEV-CP 经 IPTG 诱导表达,SDS-PAGE 结果显示,表达的 TEV CP 融合蛋白的相对分子质量约为33 kDa。以表达的融合蛋白为抗原,免疫家兔,制备的抗血清的效价为1/2048,且具有良好的特异性。