黄鸡源沙门菌分离鉴定及毒力和耐药性分析

【目的】探究规模化黄鸡孵化场鸡沙门菌流行株的毒力和耐药情况。【方法】采集弱雏卵黄拭子,接种选择培养基分离细菌,挑取疑似菌落进行革兰氏染色镜检,并对沙门菌属特异性基因invA进行PCR扩增鉴定。采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行药敏试验,并通过PCR扩增耐药基因对其进行耐药性分析。利用SPF昆明小鼠对分离株进行致病性试验,并采用PCR法扩增相关毒力基因。【结果】分离菌株中有5株(JSS-Q3、JSS-Q4、JSS-Q5、JSS-Q8和ZJS-C1-11)疑似沙门菌,在伊红-美蓝培养基上形成无色透明的小菌落,在沙门菌显色培养基形成紫色透亮的小菌落,且镜检为短杆状革兰氏阴性菌。沙门菌特异性基因invA PCR扩增阳性,测序比对结果显示与沙门菌相似性达99%;鸡伤寒沙门菌特异性基因(IpaJ)PCR扩增阳性,分离到的5株菌株均为鸡伤寒沙门菌。分离菌株共检出15种毒力基因,其中11种毒力岛基因检出率为100%。耐药性分析表明,5株分离菌株耐药性较强,仅对部分抗菌药敏感,分离菌株对头孢吡肟、氟苯尼考、恩诺沙星表现敏感;另JSS-Q5、JSS-Q8分别对多黏菌素B、新霉素敏感,JSS-Q3对头孢他啶、大观霉素敏感性较好,ZJS-C1-11对头孢克洛、大观霉素以及多黏菌素B敏感性较好。部分菌株携带bla SHV、bla TEM、tet(A)、tet(B)等耐药基因。致病性分析发现JSS-Q8和ZJS-C1-11菌株毒性较强,对小鼠具有致死性。【结论】本研究涉及的黄鸡孵化场沙门菌分离株为鸡伤寒沙门菌,均表现多重耐药且部分致病性较强,可能是影响该孵化场孵化率和弱雏率的重要原因之一。研究结果为沙门菌病的检测、诊断及治疗提供一定的试验依据。