体外受精和孤雌活化过程中小鼠胚胎细胞骨架的动态变化

为研究微管在体外受精与孤雌活化过程中的动态变化，本实验比较了体外受精胚胎、SrCl2激活的孤雌胚胎和体内受精的原核期胚胎在体外发育的情况，采用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术检测卵母细胞孤雌活化过程中及体外受精后微管及核的动态变化，以分析微管在减数分裂过程中的作用及其对早期发育的影响。结果显示，体内受精胚胎的发育率显著高于体外受精和孤雌激活胚胎体外发育率（P〈0．05），而体外受精与孤雌激活胚胎在各阶段发育率差异均不显著。在体外受精中，精子入卵，激活卵母细胞，减数分裂恢复，纺锤丝牵拉赤道板上致密排列的母源染色体向纺锤体两侧迁移：后期将染色体拉向两极；末期时，微管分布于两组已去凝集的母源染色体之间，卵母细胞排出第二极体（the second polarbody，Pb2），解聚的母源染色体形成雌原核。同时，在受精后5—8h精子染色质发生去浓缩与再浓缩，形成雄原核。在原核形成的同时，胞质星体在雌、雄原核的周围重组形成长的微管，负责雌、雄原核的迁移靠近。孤雌活化过程中，卵母细胞恢复减数分裂，姐妹染色单体分离，被拉向两极，经细胞松弛素B处理后，活化4—6h，卵周隙中未见Pb2，而在胞质中出现两个混合的单倍体原核，之间由微管相连接，负责两个单倍体原核的迁移靠近。与体外受精相比较，孤雌活化时卵母细胞更容易被激活，减数分裂期间微管的发育早且更完善。

老化对卵母细胞孤雌发育和减数分裂期间微管动态变化的影响

目的研究老化对卵母细胞孤雌激活发育率的影响,以及老化对减数分裂期间微管的动态变化的影响。方法用孤雌激活的方法来观察不同老化时间胚胎的发育情况;用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术结合的方法研究小鼠卵母细胞微管的动态变化。结果从注射hCG后14h到18h,卵母细胞在体外老化过程中激活率和发育率呈上升趋势,但是差异不显著。体外老化至18h,卵母细胞更容易被激活,并且减数分裂期间微管的变化发生要早于14h。结论短时间的体外老化可以使细胞更容易被激活,且微管发育更完善。