2012年山东省肉鸡生产加工环节沙门菌污染水平及耐药分析

目的调查山东省肉鸡孵化、养殖、屠宰、流通等环节沙门菌的污染程度及抗生素耐药谱的分布情况。方法 2012年在济南和淄博选择种鸡场、孵化厂、养殖场、屠宰场、大型超市和农贸市场,共采集2496份样品,按照GB 4789.4—2010进行沙门菌鉴定和血清学分型,微量肉汤稀释法检测抗生素的耐药分布情况。结果肉鸡孵化环节阳性率为2.39%,养殖环节为12.67%,屠宰环节为27.00%,配送分销环节为22.72%。分离菌株共包含32种血清型,其中印第安纳沙门菌占42.25%,肠炎沙门菌占34.21%。95.51%的分离菌株至少对一种抗生素耐药,71.37%的分离菌株对3种以上的抗生素耐药,28.21%的分离菌株对10种以上的抗生素耐药,7株对14种抗生素全部耐药,均为印第安纳沙门菌。结论济南和淄博市肉鸡生产加工各环节沙门菌污染严重,其中屠宰环节和分销配送环节沙门菌污染率高于孵化环节和养殖环节;肉鸡中沙门菌耐药形势严峻。

2010年山东省环境污水中脊髓灰质炎病毒的监测及其基因特征分析

本研究在山东省开展了脊髓灰质炎病毒（Poliovirus,PV）的外环境监测,从济南、临沂两地采集污水标本,浓缩处理后进行病毒分离,对分离到的PV采用中和试验进行血清定型,并对其VP1及3D区进行序列测定,分析其基因突变和重组情况。2010年,共采集污水标本32份,PV阳性10份,阳性率31.3%;分离到18株PV（PV1型3株,PV2型9株,PV3型6株）,均为疫苗相关株,VP1完整编码区核苷酸变异数在0~4个之间,在3株PV2型病毒和4株PV3型病毒的基因组中发现重组;对VP1区影响神经毒力的减毒位点分析发现,PV1型病毒中有1株在nt 2 749发生突变（A→G）,PV2型病毒中有1株在nt2 908发生A→G突变,3株在nt2 909发生U→C突变,6株PV3型病毒全部在nt2 493发生C→U突变。环境污水中可以分离到PV,其基因重组率和主要减毒位点的回复突变率较高,未发现脊灰野毒株和疫苗衍生株脊灰病毒（Vaccine-derived poliovirus,VDPV）。

2006-2012年山东省急性细菌性脑膜炎哨点监测及病原学监测结果分析

目的分析急性细菌性脑膜炎（Acute Bacterial Meningitis，ABM）哨点监测及病原学监测结果，了解山东省ABM流行特征。方法对6所哨点医院监测的ABM病例开展流行病学调查，采用细菌培养、乳胶凝集、实时荧光定量-聚合酶链反应等方法对病例标本进行常见病原菌检测，并通过Epi Info 2003、SPSS13．0等软件对数据进行分析。结果2006—2012年共报告ABM病例309例，男女性别比为1．81：1，以儿童、学生和农民为主。其中实验室确诊病例61例，脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis，Nm）感染32例（B群2例，C群19例，W135群2例，不可分群9例），患者年龄主要为7～44岁（24例，75．00％），职业以学生和农民居多，4、5月为发病高峰期（15例，46．88％）；肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae，Sp）感染29例，以婴幼儿和老年人为主（18例，62．07％）；未检出流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae，Hi）。病例转归总体良好，痊愈或好转者占87．05％，实验室确诊ABM病例疗程显著低于非实验室确诊病例（t：2．762，P=0．006）。结论山东省哨点监测发现的ABM首要致病原是Nm，Sp次之，建议根据疾病的流行特征及病原谱分布，对ABM的防控策略做相应调整。病原体的检出对疾病治疗具有促进作用，需要进一步加强病原学监测。

柯萨奇病毒A组2、6、8、12型山东地方株型别鉴定及其基因特征分析

在前期研究中,对山东省1989～2011年急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)和手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)患者标本中分离到的部分人类肠道病毒(Human enteroviruses,HEVs)进行分子定型,发现了8个HEV-A血清型。为进一步探究HEV-A组病毒在山东省的基因型分布及分子进化特征,本研究继续对剩余分离株进行核酸提取,以HEV-A组特异性引物对VP1完整编码区进行序列扩增、测序和分子定型,又鉴定出4个血清型,分别为柯萨奇病毒A组(Coxsackievirus A,CVA)2、6、8、12型,共7株病毒。同源性分析显示,7株HEV-A山东分离株与其原型株核苷酸同源性介于80.8%～85.0%之间。系统进化树表明,CVA8、12型山东分离株与国内分离株存在一定亲缘关系,而CVA2、6型山东株同国内外分离株亲缘关系均较远,并且CVA2、6型在山东省内可能存在多个传播链。本研究将我省HEV-A组的血清型别增加至12个,进一步丰富了HEV-A山东地方株的遗传进化特征,并且发现CVA2、6、8、12血清型在山东省甚至全国范围内存在不同基因特征的传播链的共循环。

柯萨奇B5病毒所致无菌性脑膜炎暴发的病原学鉴定及基因特征分析

目的对2009年山东省临沂市一起无菌性脑膜炎暴发所分离的病原体进行鉴定，并分析其基因特征。方法采集无菌性脑膜炎患者脑脊液标本42份，分离病毒；RT—PCR扩增阳性分离物，测定VP1核苷酸序列，与GenBank中其他毒株进行同源性分析，并构建VP1基因亲缘进化树。结果分离到肠道病毒17株，经肠道病毒组合血清中和试验和分子分型鉴定为柯萨奇B5病毒（CVB5）。CVB5分离株之间核苷酸和氨基酸同源性分别为92．3％～100．0％和98．7％～100．0％，与CVB5原型株（Faulkner株）的核苷酸和氨基酸的同源性分别为81．0％～82．4％和96．6％～97．0％。VPl区亲缘进化树分析显示，全球CVB5可分为A、B、C、D共4个基因型，引起本次无菌性脑膜炎暴发的CVB5属于基因型D，但位于不同的传播链中。结论CVB5是此次临沂市无菌性脑膜炎暴发的病原体．分离株之间有较大的遗传差异，但均属于D基因型。

2011年济南市某污水河中肠道病毒的分离鉴定与序列分析

目的：监测济南市区地表河水中的人类肠道病毒（HEV），分析其基因特征。方法于2011年5、6、7月份对流经济南市中心城区的西泺河各采集1份河水标本，经过阴离子膜吸附的方法浓缩后，接种RD、HEp-2和L20b细胞进行病毒分离。测定分离株VP1编码区序列并进行序列分析。结果共分离到HEV 9株，其中埃可病毒6型（Echovirus 6，E6）4株，柯萨奇B2病毒（Coxsackievirus B2，CVB2）5株。VP1核苷酸序列分析显示，4株E6病毒与2010年山东省临沂市脑膜炎病例分离株的同源性较高（95．9％～96．7％），提示当地有发生E6引起的脑膜炎病例的可能性；与济南市2010年污水分离株的同源性为94．5％～99．7％。5株CVB2病毒之间有较高的核苷酸同源性（98．4％～100％），与往年山东省急性弛缓性麻痹病例分离株之间同源性为80．9％～95．2％。结论生活污水的排入河可作为HEV环境监测的采样点，我国无专门HEV病例监测系统，环境监测是了解一个地区HEV流行的重要途径。

新型人类肠道病毒的研究进展

随着人类肠道病毒(Human enteroviruses,HEVs)分子定型方法的广泛应用,越来越多的新型HEVs被发现。自1969年肠道病毒71型(EV71)首次报道后,新型HEVs已在世界范围内引起多次暴发流行,带来了严重的公共卫生问题,特别是自2007年以来在中国大陆发生的EV71所致手足口病的广泛流行,引起国内外学者的高度关注。本文对近些年有关新型HEVs分子分型、进化、流行病学特征、致病性等方面的研究进展进行了综述。