2016—2017年山东省济南市犬布鲁氏菌病血清流行病学调查

为初步了解山东省济南市犬布鲁氏菌病流行情况,2016—2017年,在济南市5个辖区采集502份犬血样,利用竞争ELISA抗体试剂盒、虎红平板凝集试验,分别检测光滑型(猪、牛、羊种)和粗糙型(犬种)布鲁氏菌抗体。结果显示,济南市犬布鲁氏菌光滑型、粗糙型抗体阳性率分别为8.76%、1.99%。结果表明,济南市宠物犬中的光滑型布鲁氏菌感染率较高,潜在传播风险较大,应引起高度重视。

山东省禽源致病性大肠杆菌流行病学监测及耐药模式分析

禽大肠杆菌病是养禽业广泛存在的细菌性疾病,是造成禽肉产品废弃及药物治疗费用高的重要原因。为了解近年来山东省禽源致病性大肠杆菌的流行及其耐药性演化情况,对2016—2020年疑似患病禽进行致病性大肠杆菌分离鉴定和耐药性检测。从山东省12个地市的105份病料中共分离到93株致病性大肠杆菌。PCR检测发现,禽致病性大肠杆菌与其他呼吸道病原的混合或继发感染较严重,其中与H9亚型禽流感病毒等病原的二重感染率为67.74%,多重感染率为11.83%,而禽致病性大肠杆菌单一感染率仅为20.43%。耐药检测发现:分离菌株对阿莫西林、氨苄西林和多西环素的耐药率较高,分别为100%、98.21%和94.59%;对丁胺卡那霉素和阿奇霉素的耐药率较低,分别为20.43%和13.33%;对复方药物氨苄西林/舒巴坦和阿莫西林/棒酸的耐药率也相对较低,分别为40.91%和17.86%;94.62%的分离菌株对3种及以上药物产生耐药。研究表明,山东省禽源致病性大肠杆菌流行形势严峻,且耐药程度严重,应加快新抗菌药物及复合型抗菌药物研发,减少并合理使用抗菌药物,禁止滥用。

2018~2021年传染性喉气管炎在山东商品肉鸡中的发生和防控

2018~2021年间,山东部分地区的商品肉鸡等陆续发生了278例传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)疑似病例。经实验室PCR检测和病原分离鉴定,初步确诊为传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis virus,ILTV)。利用SPF鸡胚,进行绒毛尿囊膜接种,结果分离到23株ILTV。选取10株ILTV毒株,对其结构蛋白gB基因进行了测序,比较了其核苷酸同源性,绘制了系统发育树,揭示了ILTV分离株及其与疫苗株的关系。此外,本文还分析了疫苗免疫在防控过程中所起的关键作用,对于如何预防和控制ILT具有重要的指导意义。

复合生物肽制剂提高肉鸡生产性能的研究

用全价配合饲料添加复合生物肽制剂饲喂肉仔鸡47天。试验结果表明,高剂量组(4 g/kg饲料)、中剂量组(2 g/kg饲料)与低剂量组(1 g/kg饲料)和空白对照组相比,体重平均增重、平均增长率差异显著(t>1.96,P<0.05)。低剂量组与空白对照组差异不显著(t<1.96,P>0.05),表明在同样情况下高、中剂量组饲喂效果较好。

复合生物肽制剂促进草鱼生长的效果

将复合生物肽制剂混饲连续添加30天,研究其对草鱼生长的影响.结果表明,每公斤饲料添加1～2g药物的高、中剂量组鱼体平均增重、平均增长率与其它各试验组差异显著(t＞1.96,P＜0.05),低剂量组、对照药物组与空白对照组差异不显著(t＜1.96,P＞0.05).安全剂量组试验鱼生长发育正常,未出现中毒现象.

从芦花鸡分离的J亚群ALV病毒及其gp85基因演化

采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒（Avian leucosis virus,ALV）的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞（C/E）进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SDJN2012。用PCR方法扩增其囊膜蛋白gp85基因并测序,与GenBank中的ALV参考毒株进行核苷酸或氨基酸同源性比较。结果表明：SDJN2012与山东较早发现的J亚群ALV代表株SD0001的核苷酸（氨基酸）同源性最高,达93.4%（92.6%）,与J亚群不同年代的代表株同源性为88.6%～93.3%（88.2%～90.6%）,而与A,C,D,E亚群ALV毒株的同源性仅为19.7%～32.2%（10.2%～32.2%）,进一步确证分离到的病毒为J亚群ALV。对种蛋的跟踪监测证实：ALV蛋清P27抗原阳性率为37.6%,而血清学监测则呈现多样性的变化：鸡群发病前J亚群ALV抗体检测为阴性,发病后阳性率仅为9.35%,而A/B亚群阳性率则由发病前的9.8%,攀升到发病后的75.4%,彰显出ALV病原学、血清学和分子流行病学的复杂性。

鸡传染性支气管炎病毒地高辛标记探针检测方法的的建立和应用

根据GenBank中已经发表的IBV N基因的保守序列,设计合成一对引物,利用RT-PCR技术扩增IBVN基因的582 bp的核酸片段,并制备出地高辛标记的IBV核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与不同毒株的IBV核酸发生特异性杂交,而与对照的NDV、鹅副粘病毒的核酸杂交反应为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对IBV的最低检出量为10 pg,显示所制备的核酸探针用于IBV的检测是可行的。

动物微生态制剂的最新研究进展

饲料中抗生素滥用问题日益突出．造成养殖动物的抗病性降低、致病菌耐药性增强、产品中药物残留、危害食品安全等问题，严重制约了养殖业的发展。当前西方发达国家对使用抗生素的限制越来越严，对我国出口动物产品的药物残留限制提出了更严格的要求，特别是动物源性食品中抗生素残留的检出，已成为世界肉类贸易中重要的技术指标和技术壁垒之一。因此，开发应用无药残的新型饲料添加剂已拍在眉睫．

鸡脾转移因子对鸡肠道抗炎因子和致炎因子分泌的影响

为研究鸡脾转移因子对蛋雏鸡肠道细胞因子分泌的影响,试验选取200只SPF白来航蛋鸡,随机均分成4组。各组从5日龄开始分别灌服0.1 mg/只·d、0.25 mg/只·d及1 mg/只·d剂量的鸡脾转移因子(灌服1周,停喂1周);对照组灌服生理盐水。40日龄屠宰称重,取十二指肠、空肠、回肠及直肠组织,ELISA方法检测TNF-α、IL-10的表达水平。结果表明,1 mg剂量组鸡的体重显著高于对照组(P<0.05)。0.25 mg和1.0 mg剂量组十二指肠内TNF-α水平显著降低(P<0.05);0.25 mg/d剂量组十二指肠、直肠的IL-10含量显著提高(P<0.05);1 mg剂量鸡脾转移因子显著提高十二指肠IL-10含量(P<0.05),极显著提高空肠、回肠和直肠的IL-10含量(P<0.01)。综上结果表明,鸡脾转移因子可提高鸡肠道抗炎因子表达,抑制促炎因子分泌,改善肠道黏膜免疫屏障功能。

疫苗免疫压力下新城疫病毒的动态演化

国内大量新城疫病毒(NDV)血凝素基因F和HN的测序表明,NDV主要免疫原HN和F基因与生产中广泛应用的经典疫苗La Sota株的核苷酸同源性不足80%,而NDV流行株之间则高达94.4%～100%,从分子遗传学角度证实了VIId型NDV是导致新城疫免疫失败的重要原因。HI交叉抑制和鸡胚中和试验等则从抗原性的角度证实了NDV在免疫压力下抗原性的变化,尽管NDV不同毒株间抗原性变异的程度已出现明显差异,但仍局限在同一个血清型中。

传染性支气管炎病毒受体及其纤突蛋白受体结合域研究进展

传染性支气管炎(IB)是一种由冠状病毒科γ属传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种高度接触性传染病,有多个临床致病型。位于冠状病毒囊膜上的纤突蛋白(S)是病毒组织嗜性和致病性的主要决定因素,S1蛋白上受体结合域(RBD)与宿主细胞受体的结合是病毒感染的第一步,α和β属多种冠状病毒纤突蛋白(S)与宿主受体相互作用机制已研究得比较清楚,目前IBV受体及受体结合域是研究的热点。论文就近几年来IBV S蛋白的受体结合域、受体多样性、S1蛋白变异对RBD的影响及S2蛋白对IBV细胞嗜性的影响等方面研究进展进行综述,以期为揭示其致病机制,研制更有效的疫苗、抗病毒药物及诊断制剂等提供参考。

鸡滑液支原体病的防控应引起高度重视

近年来,国内外有鸡关滑液支原体(Mycoplasma Synovias,MS)感染鸡群发病的报道屡见不鲜,危害的品种包括商品肉鸡、肉种鸡,甚至商品蛋鸡屡有发病报道。究竟是什么原因导致MS肆虐鸡群?MS感染率为什么会居高不下?药物防控和疫苗防控出现了哪些问题?本文从MS的流行现状、发病原因、综合防控等方面进行阐述,以使大家得到更多了解。

抗菌药污染对生态环境的影响及防制措施

本文阐述了当前抗菌药的污染状况,污染来源,污染的危害性,以及防制抗菌药污染的措施。提出用切断污染源,应用微生态制剂,用肠菌和微生态制剂联合中药或用其发酵中药来替代或减少抗菌药的应用。

疑有禽白血病病毒混合感染的肉种鸡大肝大脾病

山东某父母代肉种鸡开产后死淘率突然升高，死亡鸡肝脏、脾脏、腺胃等内脏器官肿大，高峰期周产蛋率仅为72%，明显低于同场区未发病鸡群的83%，更显著低于其标准产蛋率（87%）。利用RT-PCR技术对肿大的脏器分别进行分子病原学诊断，禽网状内皮增生症病毒、戊型肝炎病毒和马立克氏病毒等PCR检测结果阴性，而ALV pol基因检测阳性，经测序与GenBank 已发表的ALV E 亚群毒株的核苷酸同源性高达97.5%-99.5%。血清学检测证实， ALV-AB亚群在发病前阳性率为8.3%，而发病后的抗体阳性率则攀升为70%。鸡群发病后的种蛋蛋清p27抗原检测ALV阳性率为5.3%。综上所述，鸡群可能混合感染ALV。

转移因子的组成和作用机制研究

转移因子(Transfer Factor,TF)是白细胞中具有免疫活性的T淋巴细胞所释放的一类可透析和传递"信使"小分子物质,它携带有致敏淋巴细胞的特异性免疫信息,在受者体内能够诱导T细胞转变为致敏性淋巴细胞,并能够特异地将供者的细胞免疫力被动的转移到受者体内,使受者获得细胞免疫功能,即转移和扩大细胞免疫力。

中国传染性喉气管炎的发生和流行暨美国防控经验

近年来,我国家禽行业的生物安全措施不断加强,疫苗免疫的水平不断提高,家禽的主要疫病得到了较好的控制,但传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)依然在我国部分家禽高密度饲养地区持续发生和流行,给家禽业造成了一定的危害和经济损失。本文从流行病学的角度出发,初步分析和探讨了ILT在我国的流行现状、危害特点、疫苗免疫和诊断以及防控过程中存在的问题。同时,详细介绍了美国在商品肉鸡ILT防控方面的成功经验,对我国养禽业如何防控ILT具有极其重要的借鉴意义。

单重PCR鉴别犬4种布鲁氏菌检测方法的建立

为建立适合犬布鲁氏菌病临床检测的单重PCR方法,通过对比粗糙型(犬种)与光滑型(羊种、牛种和猪种)布鲁氏菌基因组DNA的序列差异,设计1对引物并优化反应条件,建立了可初步鉴别犬4种布鲁氏菌的PCR方法,然后对该方法的特异性和灵敏度进行评价,并对20份犬布鲁氏菌血清学阳性的血液样品进行临床检测。结果显示,利用建立的PCR反应体系对牛种、羊种和猪种布鲁氏菌均能扩增出717 bp的目的条带,对犬种布鲁氏菌能扩增出366 bp的目的条带;最低可检测到犬种、羊种、猪种和牛种布鲁氏菌基因组DNA浓度分别为5.07×10^(-2)、6.20×10^(-2)、7.80×10^(-3)和5.50×10^(-2) ng/μL;20份血液样品中共检测到3份犬种布鲁氏菌阳性样品,与使用GB/T 18646—2018引物的PCR检测结果一致。结果表明,本试验建立的单重PCR方法简捷、特异、敏感,适合基层兽医实验室对犬布鲁氏菌病的检测与鉴定。

复合健鸡散超微粉促进雏鸡生长的临床试验

本试验将雏鸡分为6组,每组50只。药物混饲添加,分别为高剂量组(2 g/kg饲料)、中剂量组(1g/kg饲料)、低剂量组(0.5 g/kg饲料)、健鸡散剂对照组(1 g/kg饲料)、安全剂量组(5 g/kg饲料)、空白对照组(不用药)。本品连续试验添加21天。结果表明,试验药物高、中剂量组雏鸡平均增重、平均增长率与其它各试验组相比差异显著(t>1.96,P<0.05)。低剂量组、对照药物组与空白对照组差异不显著(t<1.96,P>0.05)。安全剂量组试验鸡生长发育正常,未出现中毒现象。

传染性支气管炎病毒S1和N基因遗传变异频率的分析

旨在探讨中国北方地区传染性支气管炎病毒(IBV)的流行和分子变异,进而探讨IBV的遗传演变规律。利用生物信息学方法对IBV纤突蛋白(S1)和核蛋白(N)编码基因进行分析比较。结果显示:2012—2013年发生在山东、天津等北方地区的IBV流行株高度同源,其S1基因核苷酸(氨基酸)相似性为94.0%~100%(93.1%~100%),N基因为98.4%~99.1%(98.1%~99.8%),而与经典疫苗株H120相似性均较低,且至少在S1基因的3个高变区产生了较多的点突变、缺失和插入,且变异集中在第53—150和250—290位,以高变区HVR I居多,GM/13在62—65位缺失4个氨基酸。进一步的分析表明:IBV流行株S1基因与1998年在我国北方流行的A2株核苷酸相似性最高,为94.9%~97.2%,年核苷酸(nt)变异频率平均为2.4nt×10-3;而N基因则与LX4株相似性最高,为93.0%~93.5%,年变异频率平均为5.1nt×10-3。IBV流行株可能是A2-like和LX4-like毒株的重组,且N基因的变异频率明显高于S1基因。

转移因子在家禽疫病防控中的应用

转移因子（Transfe Factor,TF）是动物白细胞中具有免疫活性的T淋巴细胞所释放的一类小分子可透析物质。TF携带有致敏淋巴细胞的特异性免疫信息,在受者体内能够诱导T细胞转变为特异性致敏淋巴细胞,因此,它能够特异地将供者的细胞免疫被动地转移到受者体内.