山东省禽源产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的分子流行病学分析

【目的】分析山东省禽源产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠杆菌的耐药情况、耐药机制、毒力基因、多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)、亲缘性和Inc型质粒,为禽临床合理使用抗菌药物防治此类细菌病提供参考。【方法】复苏2021年4月-2021年7月分离自山东省禽泄殖腔拭子样本中的38株产ESBLs大肠杆菌,采用微量肉汤稀释法测定其对16种抗菌药物的敏感性,通过全基因组测序检测其携带的耐药基因、毒力基因、MLST、Inc型质粒,使用Parsnp构建菌株系统发育树。【结果】药敏试验结果显示,所有菌株对氨苄西林、头孢噻呋和头孢他啶耐药,对磺胺异噁唑(97.4%)、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(94.7%)、四环素(89.5%)、氟苯尼考(86.8%)、大观霉素(84.2%)耐药严重。全基因组分析结果显示,38株产ESBLs大肠杆菌的blaCTX-M型中blaCTX-M-55基因携带率为34.2%,blaNDM型中blaNDM-5和blaNDM-4基因携带率分别为21.1%和10.5%,其携带大量介导临床中常用抗菌药物的耐药基因和黏附类、侵袭类、血清抗性、铁转运类毒力基因。MLST结果显示,ST10(13.2%)为产ESBLs大肠杆菌最流行的ST型,其次是ST616(10.5%)和ST746(10.5%)。系统发育树分析表明,ST10、ST616和ST746分别属于同一起源。Inc型质粒结果显示,IncFIB(AP001918)携带率最高(68.4%),其次为IncHI2(42.1%)。【结论】山东省禽源产ESBLs大肠杆菌耐药状况严峻,blaCTX-M基因是导致大肠杆菌对超广谱β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要原因,且该类菌株携带大量毒力基因,亟需对其加强监测。

山东省畜禽源大肠杆菌的分离鉴定和药物敏感性调查

为查明山东省畜禽源大肠杆菌对常见抗菌药物的耐药性状况,本调查于2021年4—7月从10个地市14个畜禽养殖场随机采集432份泄殖腔/肛拭子,通过麦康凯琼脂分离培养和VITEK?2 Compact全自动微生物鉴定及药敏系统鉴定大肠杆菌,采用微量肉汤稀释法对其进行药物敏感性检测。结果显示,共分离鉴定获得379株大肠杆菌,阳性率为87.73%;141株大肠杆菌受试株对氨苄西林(83.69%)的耐药率最高,其次是四环素(80.85%)、磺胺异噁唑(77.30%)、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(1∶19)(68.79%)、氟苯尼考(67.38%)、头孢噻呋(65.25%)、大观霉素(60.99%)、恩诺沙星(51.06%)、氧氟沙星(46.10%)、庆大霉素(42.55%)、安普霉素(38.30%)、头孢他啶(29.08%)、黏菌素(23.40%)、阿莫西林/克拉维酸(2∶1)(19.15%)、美罗培南(10.64%)和乙酰甲喹(7.09%);氨苄西林-头孢噻呋-庆大霉素-大观霉素-安普霉素-四环素-氟苯尼考-磺胺异噁唑-甲氧苄啶/磺胺甲噁唑-恩诺沙星-氧氟沙星是最流行的耐药谱(5/141,3.55%);84.40%(119/141)受试株对3种及以上抗菌药物耐药,51.06%(72/141)受试株对8种及以上抗菌药物耐药。结果表明,山东省畜禽源大肠杆菌对常见抗菌药物的耐药率高且多重耐药现象严重。本调查可为指导山东省畜禽养殖场临床合理用药提供科学依据。

兽用抗病毒中药复方制剂对小鼠的急性毒性试验

为评价兽用抗病毒中药复方制剂的毒性,本文采用小鼠急性毒性试验,从死亡率、各器官毒性检查、体重影响、最大耐受量等方面进行评测。结果显示,此中药复方制剂未造成小鼠死亡,毒性检查无异常,体重无显著影响,其最大耐受量为160000 mg/kg。结果表明,本试验的兽用抗病毒中药复方制剂安全、无毒副作用,为临床用药提供了一定的理论依据。

山东省减抗背景下的中兽药产业调研分析

基于对山东省兽药生产企业和养殖企业中兽药生产和使用情况的调研,深入分析山东省中兽药发展现状和存在的问题,针对性地提出了中兽药产业发展的对策建议:需着力构建全产业链发展格局;不断释放市场创新创业活力;快速实现山东省中兽药产业现代化;充分发挥好政策对产业引领作用;着力打造专业化人才队伍.并不断推进兽用抗菌药减量化示范行动等综合措施,从根本上遏制兽用抗菌药滥用,提倡使用中兽药等绿色高效产品的减抗行动,以期降低细菌耐药性的发生和发展,保障畜禽产品质量安全.

山东省中兽药发展的现状、问题与对策

我国传统中兽药有几千年的历史,不仅积累了丰富的临床经验,也形成了独特的中兽药理论体系与诊疗方法,具有显著的临床疗效。同时,中兽药以其药源的天然性、功效的整体性、低毒副作用、低残留、不易导致病原微生物产生抗药性等特点,在近年来赢得了中外兽药界和畜牧界的广泛认同和欢迎。大力研究开发中兽药及中兽药饲料添加剂是我省兽药产业发展的重要领域,也是保障我省畜产品质量安全,促进畜牧业持续健康发展的重要途径。

新版兽药GMP检查常见问题分析及改进建议

自2020年6月实施新版兽药GMP验收标准以来,对山东省验收兽药企业中发现的常见缺陷项,从质量管理、机构人员、厂房与设施、设备、物料与产品、确认与验证、文件管理、生产管理、质量控制与质量保证、产品销售与召回、自检共11个部分给予总结和归纳,对问题产生原因进行了分析,并提出改进建议,以期为兽药生产企业更好地实施GMP工作提供借鉴和参考。

兽药监督抽检质量现状与对策分析

分析了近八年来(2008-2015年)全国兽药监督抽检质量现状,探讨了产生问题的原因,并从兽药监督抽检体系建设和提升企业能力建设这两方面提出建议,力求加强监管力度,提高兽药产品质量。

山东省畜禽养殖用药现状及对策

在对山东省畜禽养殖管理情况和用药现状的调研中,一方面看到了近几年在饲养管理和兽药等投入品监管中的进步,另一方面也发现,在畜禽养殖场中不规范用药是影响畜产品质量的重要风险之一。同时,深刻分析了兽药残留和耐药性的产生原因并提出了规范用药、保障畜产品安全的对策,以提升畜产品质量安全监管水平,促进畜牧业科学发展。

山东省蛋鸡产蛋期安全用药情况的调研分析

基于对山东省鸡蛋兽药残留情况的调研,对蛋鸡产蛋期用药情况进行了现状分析,具体分析了蛋鸡产蛋期发病原因、用药和残留现状,探讨了影响蛋品质量安全的风险因素和问题,并针对性的提出了产蛋期安全用药的意见建议。为科学、正确、合理的使用兽药,规范蛋鸡养殖环节用药行为,降低鸡蛋中兽药残留风险,提供了有力的数据支撑和技术指导。

山东省出台措施推动肉鸭产业高质量发展

山东省是全国肉鸭养殖生产第一大省,经过20年的发展起步、数量扩增,现已形成数量市场、物质技术、经验模式三大优势,2020年肉鸭出栏占全国近一半,占世界35%以上。山东肉鸭产业作为全国肉鸭产业化发展的探路者、引领者以及全国鸭业发展资源的核心积聚地,在先行先试、蹚路子过程中也正面临着种禽经营不规范、生产方式粗放、产能扩张无序.

畜产品质量安全检测机构考核评审中常见问题及改进建议

根据《农产品质量安全检测机构考核评审细则》,笔者对山东省畜产品质量安全检测机构现场考核评审中发现的常见问题,从机构与人员、质量体系、仪器设备、检测工作、记录与报告、设施与环境等六个方面进行梳理,对问题产生的原因进行分析,提出改进建议,以期为畜产品质量安全检测机构更好合规运行提供借鉴参考。

茯苓多糖散质量控制研究

茯苓多糖是茯苓多糖散调节免疫功能的主要活性成分。为准确控制该制剂质量,应用分光光度法中苯酚-硫酸法测定茯苓多糖散中茯苓多糖的含量,分别从溶剂、测定波长、反应温度、反应时间、5%苯酚溶液加入量、硫酸加入量6个方面进行优化,筛选出最佳试验条件,并进一步开展线性关系、精密度、稳定性、重复性、加样回收率等方法学验证。结果显示,测定茯苓多糖最优试验条件为溶剂采用50%硫酸溶液,测定波长490 nm,25℃水浴条件反应40 min,5%苯酚加入量为1.8 mL,硫酸加入量为6.0 mL;D-无水葡萄糖在10.19~61.14μg/mL范围内线性关系良好(R^(2)=0.9994,n=6),平均回收率为99.31%。本法灵敏度高,精密度、稳定性、重复性良好,且准确可靠,可作为茯苓多糖散多糖含量的控制方法。

山东省动物源细菌耐药性的现状、问题及应对措施

基于对山东省动物源细菌耐药性和兽用抗菌药使用情况的调研,分析了山东省动物源细菌耐药性现状和存在的问题,并提出了防控策略。需深化绿色生态产品新制剂的研究;加强高效、低毒新型抗菌药研制,优化畜禽养殖环境生态系统控制;加快完善细菌耐药性监测体系构建,严格落实兽用抗菌药分类和科学精准使用药物;推进兽用抗菌药减量化示范行动等综合措施,从根本上遏制兽用抗菌药滥用,以期降低细菌耐药性的发生和发展,保障畜禽产品质量安全。

七清败毒颗粒质量标准研究

为完善七清败毒颗粒的质量标准,为其质量评价提供依据,采用反相高效液相色谱法建立七清败毒颗粒特征图谱,标识方中黄芩、虎杖、板蓝根、大青叶各种组分群体特征。通过查阅相关文献及预分析试验,确定以黄芩(黄芩苷)、虎杖(虎杖苷与大黄素)、板蓝根(靛玉红)、大青叶(靛玉红)为指标测定成分。采用Waters XBridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,3.5μm),以乙腈为流动相A,以0.4%磷酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱,采用PDA检测器,3D扫描190~450 nm范围,2D检测波长为288 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃。供试品色谱中呈现4个特征峰,并与对应的对照品色谱峰保留时间一致,经过精密度试验、稳定性试验、耐用性试验证明该方法灵敏度高,专属性强,结果重复性好。将混合对照品溶液及6批七清败毒颗粒样品的色谱图数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”,以S1为参照图谱,采用平均数相关系数法进行多点校正,时间窗为0.1 s,进行自动匹配,计算得6批七清败毒颗粒与对照图谱之间的相似度均大于0.993;通过色谱图与光谱图比对,对照品溶液与七清败毒颗粒样品中相应的4个共有峰均有良好的重合性,符合《中华人民共和国兽药典》要求。该方法节约了试剂、时间,操作简便、环保,可以更有效地对七清败毒颗粒内在质量进行控制。

兽药残留快速检测试纸卡的质量验证方法探讨

兽药残留快速检测试纸卡法由于其简便、快速等优点，常用于大量样品的快速筛选和现场检测。对试纸卡进行质量验证是确保试纸卡检测结果准确有效的重要手段。本文作者根据多年的检测经验，从检测限、假阳性率、假阴性率和与仪器方法的符合率四个方面，探讨了试纸卡的质量验证方法，供同行参考。

2016年-2018年中兽药双黄连口服液质量现状分析

对近3年176批双黄连口服液按照《中华人民共和国药典》要求进行检测。结果表明,176批双黄连口服液中157批合格,19批不合格;不合格项包括性状和主成分含量;主成分含量低主要是生产工艺或原药材达不到要求,含量过高可能存在浓缩过度或者添加了相应的提取物。因此,为提高和保证产品质量,建议生产企业采用合格的原药材,优化生产工艺,严格按照GMP要求进行生产。

近3年我国兽药质量监督抽检情况分析

本文介绍了农业农村部办公厅发布的近三年(2017—2020年)我国兽药质量监督抽检情况:总体情况,不同抽检环节兽药的不合格产品情况,不同产品类别兽药的不合格产品情况;分别分析了各自情况产生的原因;讨论了比较突出问题的对策。以期为监管部门更有效地监督执法和净化市场环境提供参考。

山东省畜产品质量安全的现状、问题及建议

畜产品是食品的重要来源,政府对畜产品质量安全高度重视,食品药品及畜牧监管部门加强了系统化、法治化的立体监管,出台了《中华人民共和国食品安全法》、《中华人民共和国农产品质量安全法》、《乳品质量安全监督管理条例》、《山东省农产品质量安全条例》、《山东省畜禽屠宰管理办法》等法律法规。目前在社会各界的共同努力下,山东省的畜产品安全整体状况正在持续向好。本文报告如下以供参考。

兽药内服制剂的微生物污染对食品动物健康及兽药临床疗效的影响研究

为考察兽药中实际存在的微生物对动物健康的影响,对山东省兽药GMP企业生产的粉散剂、颗粒剂产品的微生物污染状况进行抽样调查检测,发现不同的内服给药制剂,其微生物污染水平结果差异显著。在此基础上选择微生物限度严重超标的中药散剂,从中分离细菌、霉菌,拟定不同菌量的污染水平对健康鸡进行饲喂试验。结果表明:试验期间各用菌组试验鸡的精神状况、饮水和采食均未发现异常,试验结束后剖检各用菌液组及空白对照组鸡的心、肝、肾、肠道等,均未发现异常,各组鸡均未出现发病与死亡情况,且各组间增重无显著性差异(P>0.05)。为进一步考察兽药被微生物污染后对临床疗效的影响,选用微生物限度严重超标的中药散剂鸡康灵微粉,开展对鸡慢性呼吸道病治疗试验,将自然感染鸡随机分为两组,每组1600只,一组鸡服用微生物限度超标的鸡康灵微粉,另一组服用辐射灭菌后的鸡康灵微粉。结果表明:两组治愈率均达90%以上,经x2检验,无显著性差异(P>0.05),产蛋率均恢复到90%以上。由上述试验可见,兽药不同内服制剂的微生物污染差异显著,且不同的微生物污染水平对动物健康及兽药临床疗效无显著影响,其相关性有待进一步研究。

高效液相色谱法同时测定兽药复方酮康唑软膏中的酮康唑和甲硝唑的含量

建立了同时测定兽药复方酮康唑软膏中酮康唑、甲硝唑含量的高效液相色谱(HPLC)法。采用C_(18)色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,检测波长239 nm。结果表明,酮康唑和甲硝唑2种成分线性关系良好(r>0.999)。在3个不同浓度水平下酮康唑和甲硝唑平均加样回收率分别为97.8%和100.0%,溶液稳定性和方法重复性的RSD均小于1%。应用该方法对三个不同厂家的样品中两种成分的含量进行了测定,结果与《兽药质量标准》(2017年版)方法一致。本方法简便,可靠,专属性强,重现性好,为兽药复方酮康唑软膏的质量控制提供了技术支撑。