高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱分析紫甘蓝和羽衣甘蓝中花色苷

应用高效液相色谱-电喷雾/四极杆飞行时间串联质谱联用技术分析了紫甘蓝和羽衣甘蓝中的花色苷成分。选用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5 mm),二元线性梯度洗脱,柱后流出液采用电喷雾四极杆飞行时间质谱的正、负离子模式进行检测。根据一级质谱的分子离子和二级质谱碎片离子,获得化合物的准确分子量信息,与相关文献报道进行比较,分别从紫甘蓝和羽衣甘蓝中分离并检测到了16种和17种花色苷,且从紫甘蓝和羽衣甘蓝中发现了锦葵-3-(p-香豆酰基)-芸香苷。本方法快速、准确,无需标准品。

高速逆流色谱分离纯化连翘中的两对立体异构体(英文)

应用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化连翘果实中的两对木脂素类立体异构体。分别用乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水(体积比5∶0.7∶1∶5)和乙酸乙酯-正丁醇-甲醇-水(体积比5∶0.5∶1∶5)为两相溶剂体系,在转速为800 r/min、流速为1.5 mL/min、检测波长为254 nm的条件下进行分离,所得馏分经高效液相色谱(HPLC)检测纯度,电喷雾电离质谱(ESI-MS)和碳核磁共振波谱(13C NMR)鉴定化合物的结构。

基于四极杆-飞行时间质谱的非标记蛋白定量检测方法学研究

以四极杆飞行时间质谱检测的蛋白肽段的质谱信息为基础,开发了一种简单、准确的蛋白定性、定量检测方法,并用于牛血清白蛋白的定性、定量检测。对酶解肽段的梯度洗脱条件和流速等液相色谱条件进行了优化;进行蛋白样品的酶解及质谱检测,利用MassHunter定量软件对数据进行分析;为减少假阳性结果的出现,实验优化了数据处理软件中的设置参数,并对方法的重现性进行了考察。结果显示,重复检测的8个肽段峰面积的RSD均在3.0%以下。该方法对牛血清白蛋白的检出限为100 ng。实验发现,样品中蛋白的含量与检测到的肽段匹配率呈对数关系,并从检测到的丰度较高的8个肽段中确定可用于BSA蛋白定性检测的肽段为:HLVDEPQNLIK,定量检测的肽段为:ATEEQLK,方法的回收率为106%。该方法操作简便,检测快速,成本较低,专一性强,可用于蛋白特异性肽段的筛选及复杂生物样品中蛋白的检测。

pH精制区带逆流色谱分离制备红曲中的酸式莫那可林K

建立了pH精制区带逆流色谱分离制备红曲中功能成分酸式莫那可林K的新方法。首先用体积分数95%乙醇提取红曲中的莫纳可林K,然后经过碱化处理使内酯式莫那可林K转化为酸式,最后采用溶剂系统V（石油醚）：V（乙酸乙酯）：V（甲醇）：V（水）=5：5：4：6,上相添加HCl（10mmol/L）作为固定相,下相添加氨水（10mmol/L）为流动相进行pH精制区带逆流色谱分离。分离所得的酸式莫那可林K经HPLC检测纯度,并用UV,ESI-MS和~1H-NMR鉴定其化学结构。从2.0g粗提物一次分离得到纯度为93.4%的酸式莫那可林K147mg。

3类食品中沙门氏菌PCR快速检测方法的建立

建立了3类食品中沙门氏菌快速、敏感、特异的PCR快速检测方法。选取invA基因作为靶序列设计1对引物,在沙门氏菌中能扩增出198 bp的预期片段,而大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌的扩增结果均为阴性,表现出极好的沙门氏菌种特异性。通过对沙门氏菌标准菌种纯培养液PCR方法灵敏性的检测,发现纯培养的检测极限为72个细菌。用该方法对3类共计56份食品样品进行检测,检测结果与传统分离鉴定方法完全相符,表明该方法适用于食品中沙门氏菌的快速检测。

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测方法研究进展

单核细胞增生李斯特氏菌是一种重要的食源性致病菌,广泛分布于自然界。针对目前单核细胞增生李斯特氏菌的检测现状,总结了4种现行有效的常用检测方法,并对各种检测方法的优缺点进行了分析比较。实时荧光定量PCR检测技术,可精确定量、反应迅速、信号重复性好、灵敏度和特异性高,不需要凝胶电泳过程,避免了扩增产物对环境造成的污染问题,将是未来分析检测发展的一个主要趋势。

食品中单核细胞增生李斯特氏菌快速检测方法的建立

建立了食品中单核细胞增生李斯特氏菌快速、敏感、特异的PCR快速检测方法。选取hlyA基因作为靶序列设计1对引物,在单核细胞增生李斯特氏菌中能扩增出356 bp的预期片段,大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌的扩增结果均为阴性,表现出极好的单增李斯特菌种特异性。纯培养的检测极限为46个细菌。用该方法对36份食品样品进行检测,检测结果与分离鉴定方法完全相符,表明该方法可适用于食品中单核细胞增生李斯特氏菌的快速检测。

白果内酯标准样品的研制

建立了银杏叶中白果内酯标准样品的制备方法。以银杏的干燥叶为原料,采用硅胶柱色谱结合凝胶柱色谱富集和制备液相精制的方法,制备白果内酯单体,采用紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振等技术进行结构确证与表征,按照GB/T 15000.3—2008/ISO Guide 35:2006的规程,进行了均匀性、稳定性检验和8家实验室协作联合定值。结果表明,制备的白果内酯国家标准样品纯度标准值为99.88%,置信度95%的不确定度为0.22%,均匀性符合标准,在2~8℃条件下贮藏24个月稳定性良好。该方法具有制备成本低、操作简便、效率高的特点,解决了白果内酯国家标准样品缺乏的问题,为白果内酯及相关产品的生产质量控制及分析检测提供了物质基础。

高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱分析生姜中的姜辣素类化合物

建立高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱快速分析鉴定生姜中姜辣素类化合物的方法。采用Inertsil ODS-SP色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析,二元线性梯度洗脱,柱后流出液采用电喷雾四级杆飞行时间质谱正离子模式检测。根据电喷雾四级杆飞行时间质谱给出的母离子及二级碎片离子精确相对分子质量信息,结合相关文献,从生姜中分析鉴定了25种姜辣素,并用对照品对方法进行了验证。本方法快速、准确,可用于生姜中姜辣素类化合物的快速分析。

人工水草在重污染河流生态修复中的应用进展

传统的河流生态修复技术一般为物理修复技术、化学修复技术和生物-生态修复技术,但是在实际应用中尤其是在重污染河流生态修复中存在很多局限性,因此探寻新的技术和手段并结合实际情况进行河流生态系统修复已迫在眉睫。人工水草技术采用耐酸碱、耐污、柔韧性很强的仿水草材料,不受透明度、光照等限制,具有投资低、效果好、二次污染小的特点,在我国污水处理和河流生态修复中具有广泛的应用前景。详细介绍了人工水草的类型及研究应用现状,以期为人工水草技术在重污染河流生态修复中的广泛应用提供理论依据。

暴雨型湿地孔隙水中铁锰的时空变化特征

为了进一步探究湿地的净化机制和生物地球化学循环过程,2004～2006年通过连续3 a对武汉动物园暴雨型人工湿地进行原位定期监测,主要研究了湿地孔隙水中铁锰的时空分布特征及其对氧化还原电位(oxidation reduction potential,ORP)的影响.结果表明,暴雨型湿地水位出现周期性的波动,水位的变化范围是-10～30 cm,孔隙水中ORP的变化范围是-120～220 mV,主要发生了硫、铁和锰体系的氧化和还原.全锰、全铁和亚铁离子的浓度变化范围分别是0.60～2.35、0.75～1.89和0.20～1.25 mg·L-1,春夏季大于秋冬季,而硫酸盐的浓度在秋冬季大于春夏季,亚铁与全铁的比值季节性差异较小.在湿地孔隙水垂直方向上,ORP和pH沿垂直方向由表层10 cm到地下50 cm逐渐减少,全铁、亚铁和全锰的离子浓度则不断升高(表层上覆水除外).通过相关性分析表明,湿地孔隙水中的ORP与亚铁和全锰的浓度相关性极显著,与全铁的相关性不显著(R=-0.169,p<0.000 1),均为负相关,其相关系数的大小顺序依次为全锰、亚铁和全铁.

忍冬叶化学成分及其保肝活性研究

目的研究忍冬Lonicera japonica叶化学成分及其保肝活性。方法采用硅胶柱色谱、反相C_(18)柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、半制备型高效液相色谱等方法进行分离与纯化,并根据理化性质和波谱学数据分析鉴定化合物结构;利用体外肝细胞损伤模型,采用MTT法检测化合物单体抵抗对乙酰氨基酚(APAP)诱导的人肝癌HepG2细胞损伤的作用。结果从忍冬叶醇提物中分离得到19个化合物,分别鉴定为断氧化马钱苷酸(1)、8-表番木鳖酸(2)、马钱苷酸(3)、咖啡酸(4)、绿原酸(5)、隐绿原酸(6)、新绿原酸(7)、6′-O-β-D-呋喃芹糖基獐牙菜苷(8)、demethylsecologanol(9)、獐牙菜苷(10)、断马钱子苷半缩醛内酯(11)、表断马钱子苷半缩醛内酯(12)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(13)、异绿原酸A(14)、异绿原酸B(15)、木犀草苷(16)、木犀草素-7-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(17)、木犀草素-7-O-木糖(18)、忍冬苷(19);其中化合物2~11、1~15、17具有较好的抗APAP肝损伤作用。结论化合物1、2、8、11、12、18均首次从忍冬叶中分离得到,其中化合物18首次从忍冬植物中分离得到,化合物2~11、13~15、17具有明显的保肝活性。