信号转导与转录激活因子3在宫颈癌发生发展中的作用机制研究进展

信号转导与转录激活因子3(STAT3)是介导细胞内信号转导的经典转录因子,主要通过细胞因子受体/Janus激酶(JAK)/STAT3信号通路在细胞增殖、凋亡中发挥多种生理学功能。研究表明,异常活化的STAT3信号通路参与宫颈癌发生发展的各个阶段,并通过促进肿瘤微环境的形成,维持肿瘤细胞干性等促进宫颈癌的侵袭、转移和增强耐药性。采用多手段降低STAT3活性可显著抑制肿瘤细胞的恶性生物学行为,提示STAT3可作为宫颈癌潜在的治疗靶点。本文就STAT3信号通路的组成、调控特点及在宫颈癌发生发展中的作用机制、靶向肿瘤治疗等进行综述,以期对宫颈癌的临床治疗提供新思路。

清热药抗病毒作用研究进展

清热药是临床上常用的中药,包括清热泻火药、清热燥湿药、清热凉血药、清热解毒药以及清虚热药等。近年来,病毒感染性疾病严重危害了人体的健康,而清热药在治疗病毒性疾病中得到广泛应用,治疗效果好,安全可靠,具有广阔的应用前景。因此该文从单味清热药、清热药复方及其制剂对清热药的抗病毒作用进行总结,为进一步深入开展清热药抗病毒研究提供参考。

菊苣酸的研究进展

菊苣酸,即二咖啡酰酒石酸,主要是从菊科植物中分离的咖啡酸类衍生物,具有抗炎抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、提高机体免疫等多种药理作用,然而其药效物质基础及作用机制尚不明确,因此本文从菊苣酸的植物来源、物理化学性质、药代动力学及其生物活性研究进展方面进行综述,以期为菊苣酸的合理开发和新药研制提供科学依据。

高效液相色谱法同时测定奶味饮料中的香兰素和乙基香兰素

目的建立高效液相色谱法同时测定奶味饮料中的香兰素和乙基香兰素的检测方法。方法样品经含5%乙酸的乙腈溶液提取液提取,超声处理后,使用乙腈定容,高速离心后上清液过0.22μm微孔滤膜。使用高效液相色谱检测,检测波长308nm,外标法定量。结果本方法前处理简便易操作,香兰素和乙基香兰素在0.1~100μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,以3 S/N作为最低检出限,方法的检出限均为0.02μg/mL,加标回收率分别为97.0%~101.1%、96.0%~100.5%,相对标准偏差小于5%。结论该方法操作简便,准确度高,重现性好,适合奶味饮料中的香兰素和乙基香兰素的快速测定。

高效液相色谱-荧光检测法测定保健食品中的维生素K1和维生素K2

维生素K又称凝血维生素,包含维生素K_(1)、K_(2)、K_(3)、K_(4)等4种形式,最早于1929年由丹麦化学家达姆从动物肝脏和麻子油中发现。维生素K_(1)、K_(2)均为脂溶性化合物,属于2-甲基-1,4-萘醌衍生物。维生素K1存在于绿色植物中,是食物中维生素K的主要来源;维生素K_(2)主要由肠道细菌合成。维生素K_(1)、K_(2)主要参与肝脏凝血酶原和其他凝血因子的合成,当体内缺乏时可造成凝血障碍^([1-2]),可用于预防和治疗肝癌和白血病^([3-7])。此外,它们也参与骨代谢和细胞生长,在预防和治疗骨质疏松等方面的效果显著^([8-10])。

心脏疾病标志物cTnT和H-FABP联合检测微流体测试卡的开发及评价

目的建立一种在自驱动微流体测试卡上快速联合检测心脏疾病标志物心肌肌钙蛋白(cTn)T和心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的方法。方法使用激光切割的方式快速简便构建微流体结构,使用时间分辨微球作为标记,优化捕获抗体,标记抗体的浓度,评价测试卡的稳定性、特异性,并进行血清检测。结果该检测方法能够在10 min内完成2种心脏疾病标志物的联合检测,cTnT在0.1~100.0 ng/mL范围内有良好的线性关系,检出限为0.02 ng/mL(s/n=3);H-FABP在0.5~100.0 ng/mL范围内有良好的线性关系,检出限为0.05 ng/mL(s/n=3)。进行血清检测时,该方法与市场化检测方法比较,相关系数>0.95,相关性良好。结论该研究建立的检测方法有特异性良好、检测时间短、检测结果准确等优点,实现了心脏病标志物的联合检测,能够满足临床的需求,有良好的应用前景。

菊苣酸体外抗呼吸道合胞病毒的作用

目的 研究菊苣酸体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)活性的作用。方法 采用细胞病变法检测菊苣酸抗RSV的活性。通过观察菊苣酸不同给药方式的抗病毒作用以及菊苣酸对病毒吸附和穿入细胞的阻断作用,检测菊苣酸抗RSV的活性,通过药物半数中毒浓度(TC)、半数有效浓度(EC)以及治疗指数(TI)进行评价。RT-qPCR法检测菊苣酸对RSV基因组复制的影响。结果 菊苣酸对RSV诱导的细胞病变具有抑制作用,其TI值为2 071,对RSV吸附和穿入细胞的过程无抑制作用,对RSV基因组的复制增殖具有抑制作用。结论 菊苣酸具有较强的体外抗RSV作用,主要是发生在病毒穿入细胞后的某一阶段。

甲病毒蛋白的棕榈酰化研究进展

基孔肯雅病毒等甲病毒是一类有包膜的RNA病毒,主要以蚊虫为媒介,给人类健康和畜牧业生产造成重大损害。棕榈酰化是一种可逆的蛋白翻译后修饰形式。在棕榈酰基转移酶的催化作用下,棕榈酰基共价连接到蛋白的半胱氨酸上,形成硫酯键。棕榈酰化调节蛋白的运输、膜定位以及功能。甲病毒中的非结构蛋白1(nsP1)、TF蛋白等已被证明存在棕榈酰化修饰。修饰不仅影响了这些蛋白的定位,也影响了病毒粒子的包装和出芽释放。本文综述了甲病毒蛋白棕榈酰化的研究进展,包括修饰机制、检测方法和修饰对甲病毒的作用等,并对今后研究中有待解决的问题进行讨论。

基孔肯雅病毒疫苗研究进展

基孔肯雅热(chikungunya fever,CHIKF)是由基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)引起的以蚊虫作为传播媒介的急性传染性疾病。CHIKV呈地方周期性暴发且主要集中于非洲和亚洲,感染CHIKV的患者会出现高热、关节疼痛、皮疹等临床症状。近几年,该病毒开始在北美洲和南美洲等地重新大规模流行暴发,成为重要的全球性公共卫生问题之一。由于CHIKV疫情不断地重复暴发,对CHIKV疫苗的研制与开发产生了迫切的需要,越来越多的研究为CHIKV疫苗的研发提供了新途径和新方向,但目前还没有任何一款经过许可的疫苗能够有效地对抗CHIKV,本文对2016年至今针对CHIKV疫苗候选的研究进展以及不同的研发策略进行了综述,希望能够对CHIKV疫苗的发展提供有效参考。

过表达miR-153非小细胞肺癌细胞稳转株的构建及鉴定

目的:构建过表达miR-153的非小细胞肺癌的稳转细胞株,为进一步探讨miR-153在肺癌发生发展中的作用奠定基础。方法:构建具有嘌呤霉素抗性的miR-153慢病毒载体;体外培养非小细胞肺癌细胞系SPC-A-1和A549,加入浓度梯度的嘌呤霉素溶液,筛选出最佳浓度;使用慢病毒转染细胞株,并在转染72 h后用荧光显微镜检测绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,评价转染效率;体外实验使用PCR检测miR-153在稳转株的表达;稳转株移植裸鼠体内成瘤,取出瘤体后检测瘤体内EGFP和miR-153的表达。结果:完成过表达miR-153慢病毒载体及阴性对照载体的构建;确定嘌呤霉素最佳筛选浓度:在SPC-A-1细胞中的浓度为2.0 g/mL,A549细胞中的浓度为3.0 g/mL;目的基因miR-153被慢病毒成功导入SPC-A-1细胞和A549细胞中,荧光显微镜下能直接观察到EGFP。转染miR-153组和阴性对照组的PCR实验结果显示:在SPC-A-1细胞中,miR-153的表达量为92.9±20.6,明显高于阴性对照组(P=0.016);在A549细胞中,miR-153的表达量为2624.6±153.4,显著高于阴性对照组(P<0.001)。稳转株能在裸鼠体内形成移植瘤,瘤体内明显有EGFP的表达;与阴性对照组的瘤体相比,移植瘤组miR-153的表达量为显著上调(P=0.048)。结论:成功构建过表达miR-153的非小细胞肺癌的稳转细胞株。

比较可表达产生VLP颗粒的CHIKV DNA疫苗和减毒活疫苗在小鼠中的免疫效果

目的比较可表达产生病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的CHIKV DNA疫苗与CHIKV181/clone25减毒活疫苗在小鼠中的免疫应答与保护效果。方法C57BL/6n小鼠分别用CHIKV DNA疫苗20μg以肌肉注射加电转的形式免疫2次,CHIKV181/clone25减毒活疫苗10^(5) PFU以皮下注射的形式免疫2次,阴性对照以50μLPBS皮下注射免疫2次,在每次免疫后的第14 d进行体液免疫和细胞免疫检测。在末次免疫后第4周进行CHIKV Ross攻毒实验。结果CHIKV DNA疫苗免疫后诱导的特异性细胞免疫反应和特异性抗体反应均高于CHIKV 181/clone25减毒活疫苗。在CHIKV Ross致死性攻击后,DNA疫苗与CHIKV181/clone25减毒活疫苗均可保护小鼠免于死亡。结论DNA疫苗20μg与CHIKV181/clone25减毒活疫苗105 PFU均可有效预防小鼠CHIKV感染,但DNA疫苗诱导更高水平的体液免疫反应和细胞免疫反应。

肠道病毒71型2C蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

目的制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV-A71)2C蛋白的多克隆抗体并测试抗体的应用效果。方法分析EV-A712C的抗原性,设计合成1条EV-A712C蛋白多肽,偶联钥孔血蓝蛋白KLH作为抗原,免疫新西兰大白兔。ELISA测定免疫效价,达到要求后,收集血清并纯化。利用ELISA、免疫印迹、免疫沉淀和免疫荧光法对纯化后的2C蛋白抗体进行鉴定。结果设计的2C蛋白肽段刺激新西兰大白兔产生了特异性抗体,免疫印迹、免疫沉淀和免疫荧光法证明制备的抗体可特异性识别并结合2C蛋白。结论成功获得了EV-A71的2C蛋白抗体,为进一步研究2C蛋白功能提供了有效工具。