脉动真空清洗机清洗眼科器械效果的研究

目的研究脉动真空清洗消毒器对眼科器械的清洗效果,为医院消毒供应工作提供实际数据支撑,通过与国外设备进行对比,促进国产医疗器械发展。方法在实验中选取本供应中心2020年1—5月清洗的眼科器械结果作为统计样本,分别采用脉动真空清洗消毒器与传统方法清洗,比较器械的清洗效果;同时调查本市内其他医院的其他厂家设备对比器械损坏率、干燥效果。结果传统方法清洗1021件,脉动真空清洗1058件,清洗效果目测与生物荧光检测法相结合,其中传统清洗方法器械合格率为92.73%,真空清洗合格率为97.14%;ATP检测:传统清洗阳性率为15.23%,真空清洗阳性率为5.11%;器械破损率三个厂家基本相同;干燥差别较大:真空清洗为95.0%,国外设备为81.0%。结论真空清洗消毒器对眼科器械的清洗具有良好的效果,可减少手工处理强度,提高工作效率,并降低器械损坏率,用户满意度优于同类型对照国内外品牌。

单纯疱疹病毒Ⅰ型在三叉神经节潜伏复发机制的研究进展

单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)感染引起的单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)是全球性的致盲性眼病。病毒在眼表发生原发感染后,转运并终生潜伏在三叉神经节内,反复复发引起角膜病变。在对HSV潜伏机制方面的研究过程中,人们逐渐认识到病毒自身和宿主反应两方面共同调控了病毒的潜伏过程。近年来,嗜神经病毒的侵袭、免疫、潜伏复发等各方面的分子机制研究取得大量研究成果,为HSK的防治提供了新思路。本文将主要对HSV-1角膜初发感染后在三叉神经节内潜伏分子机制方面的研究进展进行介绍,并对目前HSK的基础研究和临床治疗存在的问题进行探讨。

关注哺乳动物晶状体再生及“晶状体干细胞”的研究

一些哺乳动物的晶状体摘出后，在囊袋存在的情况下可以再生出新的晶状体。目前普遍认为囊袋内不能被完全清除而残留的晶状体上皮细胞（LECs）是晶状体再生的来源。但是哺乳动物的晶状体再生并非晶状体发育的简单重复，残余LECs的无序增生、移行和转化会影响再生晶状体的透明性。大量研究围绕LECs异常增生的机制进行，而近年来“晶状体干细胞”理论被逐渐提出。总结国内外关于哺乳动物晶状体再生研究的现状，提出一些观点和看法，希望为临床预防后发性白内障以及对其进行药物治疗提供新的靶点和思路。

不同剂量链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠角膜病变模型的对比研究

目的 比较研究单次高剂量和多次低剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔内注射诱导糖尿病小鼠角膜病变的成模情况及其病理表现的异同. 方法 正常6～8周龄雄性C57BL/6小鼠80只,随机分为正常对照组、多次低剂量1个月组、多次低剂量3个月组（60 mg/kg STZ连续腹腔内注射5次）和单次高剂量1个月组（150 mg/kg STZ腹腔内注射1次）,每组20只.比较各模型组小鼠成活率、糖尿病成模率、平均体质量、糖化血红蛋白（HbA1c）水平.各组小鼠均行角膜上皮刮除术,采用荧光素钠染色法检测角膜上皮的缺损面积百分比.采用免疫荧光染色法检测角膜上皮p-Akt、Sirt1和Ki67的表达情况.采用Cochet-Bonnet触觉测量器检测角膜上皮刮除前、刮除后3、7、10和14 d角膜敏感度,采用免疫荧光染色检测角膜上皮刮除前、刮除后14 d角膜神经密度.结果 多次低剂量1个月组、多次低剂量3个月组和单次低剂量1个月组小鼠糖尿病成模率分别为90％、80％和70％.各糖尿病模型组小鼠血液HbA1c水平较正常对照组明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;各糖尿病模型组间小鼠血液HbA1c水平比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）.角膜上皮刮除后24 h和48 h,多次低剂量3个月组和单次高剂量1个月组小鼠角膜上皮缺损面积百分比均高于正常对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.多次低剂量3个月组和单次高剂量1个月组小鼠角膜上皮p-Akt、Sirt1和Ki67的荧光强度均低于正常对照组.角膜上皮刮除前和刮除后14d,多次低剂量1个月组小鼠角膜敏感度、角膜神经密度与正常小鼠相比,差异均无统计学意义（均P＞0.05）;但多次低剂量3个月组和单次高剂量1个月组小鼠角膜神经敏感度、角膜神经密度明显下降,与正常对照组相比差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 低剂量STZ注射1个月不能诱导糖尿病小鼠出现角膜病变特征,而高剂量STZ注射后1个月和低剂量STZ注射后3个月的糖尿病小鼠出现典型的角膜上皮和神经病变,可作为研究1型糖尿病性角膜病变的理想动物模型.

神经营养因子促进角膜上皮损伤修复的研究进展

神经营养因子是一类由神经所支配的组织和星形胶质细胞产生的且为神经元生长与存活所必需的蛋白质分子,可支持神经元生长、发育和功能完整性,在神经系统的发育和生理功能维持中起着重要作用。神经营养因子除了对其所支配的组织发挥调节和功能性作用外,对其生理、生长及代谢也起着重要的神经营养性作用。角膜是人体神经纤维分布最密集的组织,丰富的神经增强了角膜的感觉功能,同时通过分泌多种营养和调节因子维持角膜的正常生理功能和损伤后的再生。近年来,关于神经营养因子促进角膜上皮愈合的研究取得了很大的进展。本文对近年来不同神经营养因子促进角膜上皮损伤后修复研究进展进行综述。

先天性白内障手术后计划外再手术原因及相关危险因素研究

目的探讨先天性白内障手术后计划外再手术的原因及相关危险因素,为先天性白内障手术提供参考。方法回顾性研究。收集2009年1月至2018年12月于青岛眼科医院就诊并行先天性白内障手术后计划外再次入院手术治疗的患者资料,分析患者再手术发生率、再手术时间以及发生原因等。结果将白内障手术后计划外再手术36例(42眼)患者纳入本研究。计划外再手术占前三位的疾病分别为后发性白内障(54.76%,23/42)、继发性青光眼(21.43%,9/42)、瞳孔闭锁(14.29%,6/42);其他原因有人工晶状体异位(7.14%,3/42)、视网膜脱离(2.38%,1/42)。计划外再手术发生率在0~3个月龄组为13.29%,显著高于4~12个月龄组(3.82%)和>12个月龄组(1.96%),组间差异有统计学意义(P=0.00);低月龄(≤3个月)白内障手术、一期未植入人工晶状体与后发性白内障、继发性青光眼和瞳孔闭锁均高度相关(均为P<0.05)。结论后发性白内障、瞳孔闭锁和继发性青光眼为先天性白内障手术后计划外再手术的主要原因,低月龄(≤3个月)患者行白内障手术与计划外再手术高度相关。

免疫刺激剂CpGODN防治烟曲霉菌引起的变态反应性结膜炎的实验研究

背景研究证实免疫调节剂CpGODN对蛋白类过敏原引起的变态反应性结膜炎有防治作用，但其对真菌引发的变态反应性结膜炎是否有类似作用尚不清楚。目的研究局部应用CpGODN是否能够预防或减轻烟曲霉菌引发的变态反应性结膜炎。方法建立烟曲霉菌变态反应性结膜炎小鼠模型，用CpGODN或对照ODN（GpCODN）对其进行干预，PBS干预作为阴性对照。实验分为预防实验（模型动物在变态反应原再次激发前给药）和治疗实验（激发后给药），对小鼠眼部临床症状进行评分。取小鼠结膜组织进行组织病理学检查，并计数标本中的炎性细胞。应用实时定量聚合酶链反应（real-timePCR）法动态观察小鼠结膜组织中TLR4mRNA的变化；将烟曲霉菌免疫原与眼部回流淋巴结和脾脏的细胞进行共培养，流式细胞分析培养细胞中调节性T淋巴细胞的比例和活化状态。结果预防实验中，结膜下注射CpGODN组与GpCODN对照组、PBS对照组比较，小鼠眼部过敏症状评分差异均无统计学意义（P〉0．05）；CpGODN组与GpCODN对照组、PBS对照组比较结膜组织中性粒细胞数降低，差异均有统计学意义（21．25±11．59vs30．75-4-_11．44，21．25±11．59vs69．00±9．90；t=5．140，t=3．210，P〈0．01）；TLR4mRNA表达上调。在治疗实验中，CpGODN组与GpCODN对照组、模型对照组比较，跟部过敏症状评分降低（t=4．000，t=2．750，P〈O．05）；中性粒细胞数显著减少（t=4．870，t=3．829，P〈0．01）。CpGODN治疗组小鼠眼部回流淋巴结CD4^＋CD25^＋细胞以及CD4^＋CD25^＋CD69’细胞所占的比例均显著高于GpCODN组和PBS对照组（P〈0．05）。结论CpGODN通过上调结膜TLR4的表达、活化Treg细胞来预防和治疗烟曲霉菌引起的变态反应性结膜炎，预先结膜下注射和点眼均可减轻小鼠眼部过敏症状和晚期结膜炎性细胞的聚集。

根痛平片微生物限度检查方法研究

目的建立根痛平片的微生物限度检查方法。方法根据2015年版《中国药典》的规定,用平皿法、中和剂法对根痛平片进行微生物限度检查法的研究。结果利用聚山梨酯80和卵磷脂的中和作用,可消除根痛平片对枯草芽孢杆菌的抑制作用。通过加入中和剂,可采用平皿法检查根痛平片需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数。采用常规法检查控制菌。结论该方法适用于根痛平片的微生物限度检查。

小梁网细胞氧化应激在青光眼发病中的研究进展

青光眼是一种常见的不可逆性致盲眼病,病理性眼压升高为主要临床特征。眼压的形成与房水循环密切相关,房水动力学异常,会引起病理性眼压升高。小梁网是房水外流通道的主要组成部分,对维持正常眼压起到非常关键的作用。氧化应激是导致青光眼眼压升高的直接危险因素,表现为氧化与抗氧化作用的失衡。小梁网细胞氧化应激可能导致细胞外基质的沉积与退行性变,使细胞发生自噬和衰老,造成小梁网细胞功能障碍,最终导致房水外流阻力增大,引起病理性眼压升高。本文将针对小梁网细胞氧化应激与青光眼关系的研究进展进行综述,以期为进一步的临床研究提供依据,为探讨青光眼的发病机制、预防及治疗青光眼提供参考。

ATP生物荧光检测仪在眼科精密器械清洗质量控制中的应用效果

目的探讨ATP生物荧光检测仪在眼科精密器械清洗质量控制中的应用效果。方法医院于2019年1月开始对眼科精密器械开展全面清洗管理,将ATP生物荧光检测仪应用在器械清洗中,开展清洗质量控制工作,以最大程度提高眼科精密器械清洗质量,减少院内感染风险。对管理前后器械清洗质量进行对比。结果将ATP生物荧光检测仪应用到眼科精密器械清洗工作中后,有齿类、无齿类、管腔类器械的清洗合格率均明显提高,与全面管理前相比差异显著(P<0.05);ATP监测表面采样、水质采样检测结果显示,器械外表和管腔内细菌检测数量相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论将ATP生物荧光检测仪应用到眼科精密器械清洗中,可显著提高器械清洗效果,在清洗质量控制中发挥重要作用。

睑板腺功能障碍发病机制的研究进展

睑板腺功能障碍(meibomian gland dysfunction,MGD)是一种慢性、弥漫性的睑板腺病变,通常以睑板腺终末导管的阻塞或分泌的睑脂数量或质量发生改变为特征,临床上可以引起泪膜异常、角膜上皮损害、眼部刺激等干眼表现。MGD病因复杂且受多种因素影响,因此MGD发病机制的研究对于指导临床工作至关重要。本文对研究MGD的动物模型进行了介绍,并根据一些基础研究对MGD相关的细胞及分子机制等方面进行综述。

进口角膜保护剂与国产角膜保护黏弹剂对眼科手术患者角膜上皮的保护作用和安全性的对比分析

目的对比分析进口角膜保护剂与国产角膜保护黏弹剂对眼科手术患者角膜上皮的保护作用和安全性。方法选取2021年1月至7月在山东第一医科大学附属眼科医院拟行单眼白内障手术或眼底手术的患者52例(52眼)为研究对象。采用随机数字法将患者分为试验组和对照组,每组各26眼。试验组使用国产角膜保护黏弹剂,对照组使用波兰产角膜保护剂。主要保护作用评价指标为光学清晰度保持成功率,次要保护作用评价指标包括产品在术前、术后的保护剂眼表覆盖厚度、光学清晰度保持时间及光学清晰度评分。术前和术后对患者行泪膜破裂时间(TBUT)、泪液分泌试验(SIt)检查以及角膜荧光素钠染色(CFS)评分,并对产品安全性进行评价。结果试验组和对照组的光学清晰度保持成功率分别为100.00%、96.15%,率差为3.85%(95%可信区间为-3.55%~11.24%)。两组患者术前和术后保护剂眼表覆盖厚度比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。两组患者光学清晰度保持时间、光学清晰度评分差异均无统计学意义(均为P>0.05)。两组患者术后1 d、7 d的TBUT及术后7 d的SIt,差异均无统计学意义(均为P>0.05);试验组患者术后1 d的CFS评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者术后7 d的CFS评分,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组和对照组不良事件发生率分别为34.62%(9/26)和26.92%(7/26),差异无统计学意义(P=0.349)。结论国产角膜保护黏弹剂在防止术中因角膜干燥而导致的角膜上皮损伤方面安全有效,与已上市的进口角膜保护剂疗效相当。

荧光染色法对组织病理诊断棘阿米巴性角膜炎价值的研究

目的:将荧光染色技术应用于组织病理诊断棘阿米巴性角膜炎(AK),并将阅片结果与HE染色和PAS染色的阅片结果进行比较,分析这3种染色方法的敏感性与特异性,探究荧光染色技术在角膜组织活检中检测阿米巴病原体的应用价值。方法:回顾性研究。收集2015-05/2020-06于山东第一医科大学附属眼科医院就诊的感染性角膜炎患者的手术切除标本74例75眼。根据角膜刮片、培养和组织病理诊断结果,将感染性角膜标本分为AK组和非棘阿米巴性角膜炎(NAK)组。将连续切片的组织分别行HE染色、PAS染色和荧光染色,分析3种染色方法对AK诊断的敏感性与特异性,使用受试者工作特征(ROC)曲线计算曲线下面积(AUC),并进一步分析在同一部位相同倍率视野下,计数三种染色方法找到棘阿米巴病原体的数量,明确荧光染色法对AK的诊断价值。结果:HE染色的敏感性为69%(27/39)、特异性为92%,PAS染色的敏感性为62%(24/39)、特异性为97%,荧光染色的敏感性为95%(37/39)、特异性为97%,3种染色方法对AK诊断的敏感性存在差异(χ^(2)=19.857,P<0.001);进行两两比较发现,HE染色、PAS染色与荧光染色诊断AK的敏感性有差异(P=0.003、<0.001),HE染色与PAS染色诊断AK的敏感性没有差异(P=0.978);AUC最大为荧光染色(0.960),其次分别为HE染色(0.804),PAS染色(0.794)。计数在同一部位相同倍率视野下,HE染色、PAS染色和荧光染色查见棘阿米巴包囊数量的中位数分别为4(0,11)、2(0,9)、12(3,33)个(χ^(2)=56.561,P<0.001);进行两两比较发现,HE染色和荧光染色、PAS染色和荧光染色找到棘阿米巴包囊的数量有差异(P<0.001),HE和PAS两种染色方法找到棘阿米巴包囊的数量没有差异(P=0.210),荧光染色的组织病理切片更容易辨别阿米巴病原体。结论:荧光染色技术应用于组织病理诊断AK的敏感性比HE染色和PAS染色高,可显著提高阿米巴病原体检测的阳性率。

人工智能技术在眼科问诊中的探索与应用

目的:探索人工智能技术在眼科门诊问诊方面的应用。方法:本研究结合眼科专家共识和诊疗常规,建立思维导图,导入脱敏数据,训练人工神经网络模型,通过人机对话实现既往史、现病史、过敏史以及家族史的智能采集。临床实践采用人-机对照实验对系统进行验证。结果:29367例患者中,干预组(人工智能组)患者3850例,对照组(医生人工采集组)25517例,在等候时间上,干预组平均等候847 s,比对照组减少108s,差异有统计学意义(P<0.05),在问诊耗时上,干预组平均162 s,比对照组减少9 s;在门诊病历完整性方面,干预组为96.62%,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:人工智能技术应用在问诊环节可提高门诊医生工作效率,缩短患者的候诊时间,系统准确度高,医生认可度高,在病历完整性上与医生人工采集无统计学差异。

某眼科专科医院2014年—2019年出院患者来源分析

目的了解医院的服务范围和患者来源特点,掌握医疗病源信息,为医院管理者提供参考依据。方法2014年—2019年某眼科专科医院病案管理系统中的所有出院患者,共计30774人次,利用SPSS19.0版统计学软件对其基本信息和相关住院信息进行统计分析,了解该院的住院患者来源分布。结果2014年—2019年济南地区患者占全院住院患者的28.40%;省内其他地区患者占61.75%,且主要集中在济宁、菏泽、德州、泰安等鲁西南、鲁西北地区;省外患者主要来自安徽、江苏、河北三省,特别是上述三省与山东交界地区。结论根据医院患者来源分布的特点,对确定医院服务范围的中心和半径、医疗市场开拓方向具有重要参考意义。

视网膜神经纤维层的定量评估在视网膜疾病中的应用

视网膜神经纤维层是视网膜的最内层,主要由来自视网膜神经节细胞的无髓鞘轴突组成,此外还有神经胶质细胞与视网膜血管,其厚度与年龄、眼球增长、眼底结构改变等因素相关。光学相干断层扫描可以清晰展示角膜、视网膜、脉络膜、视神经等高分辨率断层图像,可以在活体上显示生物学组织的细微结构,在临床与科研中已获得广泛应用。在青光眼视神经病变中,光学相干断层扫描可以发现视野异常前的视网膜神经纤维层损害,已成为青光眼早期诊断与视神经损伤程度检测的重要手段。除视神经病外,越来越多的研究表明许多视网膜血管疾病、神经元变性疾病等视网膜疾病也有视网膜神经纤维层的损伤。探讨视网膜疾病与神经纤维层的关系,将有利于进一步推进对视网膜疾病发病机制及病理改变的认识。本文就视网膜神经纤维层的定量评估与多种视网膜疾病的关系展开综述,为其在视网膜疾病中的应用提供参考。

角膜光密度值评估和指导钱币状角膜炎药物治疗的临床观察

目的分析角膜地形图光密度值在钱币状角膜炎药物治疗过程中的变化特点以及对药物治疗的指导作用。方法回顾性病例研究。对2017年11月至2021年12月山东省眼科医院明确诊断的14例(21只眼)钱币状角膜炎进行随访,随访时间为6~15个月,平均(9.50±3.82)个月。观察钱币状角膜炎患者的临床表现、裸眼视力、角膜激光共焦显微镜的扫描图像特点、确诊前钱币状上皮下浸润存在时间与浸润消退所需用药时间的关系,以及钱币状角膜炎在药物治疗过程中角膜地形图光密度值的变化特点及其治疗转归。采用SPSS统计学软件分析。结果14例患者中男性6例(6/14),女性8例(8/14);年龄17~69岁,平均(39.00±14.9)岁;单眼发病7例(7/14),双眼发病7例(7/14);14例患者角膜上皮下浸润出现前均有流行性角膜结膜炎诊断,裂隙灯下角膜病变相似,表现为角膜上皮下浅基质层内有散在或密集的圆形钱币状浸润,荧光素染色阴性;确诊时裸眼视力(UCVA)均值(0.46±0.28),治疗8个月后UCVA均值(0.64±0.30)(P<0.05),治疗后患者裸眼视力有所提高,较治疗前差异有统计学意义;14例(21只眼)在确诊前角膜钱币状上皮下浸润存在时间(T1)为0.5~8个月,平均(2.51±2.11)个月,角膜浸润消退治疗所需时间(T2)2.5~10个月,平均(5.93±2.17)个月,相关系数0.082(P>0.05),钱币状角膜炎上皮下浸润存在时间与浸润消退治疗时间二者相关性无统计学意义;14例(21只眼)钱币状角膜炎患者治疗3个月、8个月后角膜光密度值平均值分别为(19.78±5.00)、(17.11±3.50);经治疗后,14例(21只眼)患者最终9例(13只眼)完全恢复透明(角膜光密度值<16),4例(7只眼)好转,无效1例(1只眼)。结论钱币状角膜炎是一种慢性上皮下浸润角膜炎,多为急性流行性角膜结膜炎的伴随体症。上皮下浸润存在时间与药物治疗消退时间二者相关性无差异统计学意义。角膜地形图光密度值可作为评估钱币状角膜炎在药物治疗过程中角膜混浊消退的客观指标。

激光角膜屈光术后继发圆锥角膜的临床特征及治疗预后分析

目的分析激光角膜屈光术后继发圆锥角膜的发病特征和临床表现,并评估其治疗预后。方法回顾性病例研究。收集2013年1月至2021年12月于山东第一医科大学附属眼科医院(山东省眼科医院)就诊的激光角膜屈光术后继发圆锥角膜的患者27例(54只眼),其中男性患者22例,女性患者5例,4例单眼发病,23例双眼发病,患者年龄为19~48岁,平均(28.6±5.9)岁。分析其发病特征、临床分期、角膜地形图的参数资料、治疗方法和疗效。结果27例继发圆锥角膜患者术前的屈光手术方式为:准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)24例,准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(LASEK)1例,经上皮准分子激光屈光性角膜切削术(Trans PRK)1例,飞秒激光基质透镜切除术(FLEx)1例。患者接受角膜屈光手术的年龄为15~34岁,平均(19.4±3.6)岁。27例(54只眼)患者中,潜伏期4只眼,初发期16只眼,完成期34只眼。完成期患者均表现出角膜前突变薄,8只眼(24%)可见Fleischer环、7只眼(21%)可见Vogt线。角膜地形图中角膜后表面形态表现为:初发期患者以桥型递增型(38%)和桥型递减型(25%)为主,完成期患者则以岛型(64%)和不完全岛型(18%)为主。初发期患者主要采用框架眼镜(50.0%)和透气性角膜接触镜(RGP)(31.3%)治疗,而完成期患者多数需行角膜交联术(CXL)(29.5%)或板层角膜移植术(LKP)(50.0%)手术治疗,17例接受LKP术的患者均为LASIK术后继发圆锥角膜患者。结论激光角膜屈光术后继发圆锥角膜以LASIK术后多见,初发期患者的角膜地形图后表面形态较少进展为岛型,完成期患者多数需行角膜交联术或角膜移植术手术治疗。

组织工程人角膜内皮的体外重建及其形态结构

目的:组织工程人角膜内皮(tissue-engineered human corneal endothelia,TE-HCE)的体外重建及其形态结构。方法:用有限稀释法从HCE细胞系筛选出单克隆细胞(mcHCE细胞),用常规染色体标本制作和核型分类学方法进行核型分析。用羊膜的胰酶倒置消化和细胞外基质蛋白包被方法制备去上皮层修饰羊膜(mdAM)。以核型正常的对数期mcHCE细胞为种子细胞,以平铺于24孔培养板孔底的mdAM为载体支架,用200mL/L胎牛血清-DMEM/F12培养液在37℃,50mL/LCO2培养箱中进行TE-HCE的体外重建。用茜素红染色、冰冻切片HE染色、倒置显微镜和扫描电镜观察种子细胞的形态、细胞连接的形成情况、细胞单层的完整性及其与mdAM结合的紧密程度。用透射电镜方法鉴定种子细胞的超微结构以及细胞连接的形成情况。用免疫荧光技术检测种子细胞对不同细胞连接蛋白的表达模式。结果:从非转染HCE细胞系中筛选出了7个核型正常(2n=46)的单克隆细胞株。在启动重建30h后,mcHCE种子细胞在mdAM上形成了完整的细胞单层,细胞密度高达3413/mm2。HCE细胞呈多角形细胞形态,形成了完整的细胞单层,且在细胞-细胞以及细胞-mdAM间形成了多种细胞连接,种子细胞在超微结构上与在体HCE细胞类似,胞质中含有许多线粒体,并具有紧密连接蛋白-1、钙黏蛋白、间隙连接蛋白-43和整联蛋白αv/β5的阳性表达。结论:体外重建的TE-HCE在结构和功能上与在体HCE相似,有望作为HCE的替代物用于临床角膜内皮移植。

体外重建组织工程人角膜内皮在新西兰兔角膜内皮移植中的应用

目的:验证体外重建组织工程人角膜内皮(TE-HCE)在角膜内皮移植中的作用。方法:以非转染人角膜内皮细胞(HCE细胞)为种子细胞,以去上皮层修饰羊膜为载体支架体外重建的TE-HCE,经CM-DiI标记后对撕除内皮层和后弹力层(DM)的新西兰兔进行了兔穿透性角膜内皮移植。用裂隙灯显微镜观察移植眼角膜的透明度。用荧光显微镜观察种子细胞荧光标记。用茜素红染色和冰冻切片HE染色和扫描电镜观察种子细胞的形态、细胞连接的形成情况、细胞单层的完整性及其与DM结合的紧密程度。用透射电镜方法鉴定种子细胞、DM和角膜的超微结构。结果:TE-HCE可使新西兰兔角膜保持透明39d以上。角膜内皮层移植区的细胞均带有CM-DiI荧光标记。绝大多数种子细胞为六角形,细胞间连接紧密,重建出了完整的角膜内皮层,且内皮层与DM结合紧密。种子细胞重建出了连续的角膜内皮层,种子细胞、DM和角膜的形态结构与正常对照眼的几乎相同。结论:移植后的TE-HCE在种子细胞形态、连续单层状态、细胞连接形成及超微结构上均与对照兔眼的角膜内皮类似,使移植新西兰兔角膜长期保持透明。