重组人骨靶向干扰素γ的骨靶向性和对巨噬细胞向破骨细胞分化的影响

目的对重组人骨靶向干扰素γ(rhIFNγ-D10)进行体外骨靶向性和促进巨噬细胞向破骨细胞分化的活性分析。方法采用羟基磷灰石体外结合实验分析钙亲和力,表征目的蛋白靶向骨组织能力。分别测定重组人骨靶向干扰素γ(rhIFNγ-D10)和非骨靶向性重组人干扰素γ(rhIFNγ)体外结合羟基磷灰石的能力并加以比较,分析天冬氨酸寡肽对干扰素γ骨靶向性的影响。用RANKL、RANKL+rhIFNγ-D10、RANKL+rhIFNγ、rhIFNγ-D10和rhIFNγ分别诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7向破骨细胞分化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法评价rhIFNγ-D10对破骨细胞分化形成的影响。结果rhIFNγ-D10体外结合羟基磷灰石的能力明显高于rhIFNγ,说明天冬氨酸寡肽有助于将干扰素γ靶向骨组织。与RANKL对照组相比,RANKL+rhIFNγ-D10组和RANKL+rhIFNγ组破骨细胞分化染色细胞明显减少,说明在RANKL诱导破骨细胞分化条件下,rhIFNγ-D10和rhIFNγ对破骨细胞分化有抑制作用。结论采用大肠杆菌表达的rhIFNγ-D10具有骨靶向性,但未显示预期的促进小鼠巨噬细胞向破骨细胞分化的作用,相反表现出一定的抑制作用,其分子机制有待进一步研究。