胰岛素样生长因子Ⅱ及其受体在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及其Ⅱ型受体(IGF-ⅡR)表达与胃癌分型、分期、浸润和转移等生物学行为的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测67例胃癌、16例慢性萎缩性胃炎(CAG)和13例慢性萎缩性胃炎伴重度异型增生(CAGD)组织中IGF-Ⅱ和IGF-ⅡR的表达。结果:胃癌组IGF-Ⅱ阳性表达率为76.1%(51/67),较CAGD组及CAG组明显增高(P<0.05,P<0.01),且CAGD组较CAG组有明显差异(P<0.05),IGF-Ⅱ的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(P<0.05～0.01);胃癌组IGF-ⅡR阳性表达率为59.7%(40/67),较CAG组明显升高(P<0.01),与其分化程度密切相关(P<0.05),但与其浸润深度、肿瘤大小、淋巴结转及TNM分期均无密切相关。结论:IGF-Ⅱ过表达与胃癌发生有关,是胃癌发生过程中一个较早期的分子事件,并影响其生物学行为,而IGF-ⅡR过表达对胃癌发生、分化有促进作用,两者联合检测可作为胃癌手术治疗及评估预后的参考指标。

TIM-3基因启动子区多态性与胃癌易感的相关性研究

目的探讨中国汉族人群中肿瘤免疫调节基因TIM-3启动子区单核苷酸多态性与胃癌的遗传易感性关联。方法提取190例胃癌患者及216例健康人群外周血基因组DNA,用PCR-RFLP方法检测2组人群中TIM-3基因启动子区-574G/T、-882C/T、-1516G/T3个多态性位点的基因型;各多态位点的基因型与胃癌风险之间的相关性以OR值(odds ratio)及其95%CI(confidence intervals)表示;OR值及其95%CI以非条件Logistic回归模型分析,均经各混杂因素校正后取得;所有的统计检验均为双侧概率检验,统计学分析使用SPSS11.5软件。结果 PCR-RFLP检测结果显示,TIM-3启动子区的3个多态性位点在检测人群中均存在,但3个位点的多态纯合形式在研究人群中几乎没有出现。190例胃癌患者与216例健康对照人群中3个多态性位点的基因率差异均有统计学意义(P<0.05)。经混杂因素的校正后,Logistic回归分析结果显示3个位点的基因型差异均有统计学意义,-574G/T位点:OR=3.92(95%CI:1.40-10.94);-882C/T位点:OR=3.20(95%CI:1.22-8.41);-1516G/T位点:OR=2.32(95%CI:1.23-4.40),P值均<0.05。结论 TIM-3启动子区的基因多态性对于胃癌的发生有着显著的易感关联,虽然该3个位点的多态性纯合基因型存在形式极低,但结果依然提示对于胃癌的发生,TIM-3启动子区的多态性仍是一个重要的易感危险因素。

氧化苦参碱抑制人肝癌细胞EGF和EGFR表达的研究

目的:探讨氧化苦参碱对人肝癌细胞EGF及EGFR表达的影响。方法:将肝癌细胞株BEL-7402在37℃、5%CO2条件下培养、传代。按氧化苦参碱浓度分为1000μg/ml、500μg/ml、250μg/ml3组,对照组不加氧化苦参碱,每组设6个平行孔,每孔加入细胞1×105/ml,培养24h、48h和72h,分别进行EGF及EGFR的免疫组化染色。结果:不同浓度的氧化苦参碱均抑制EGF和EGFR在人肝癌细胞的表达,随着培养时间的延长,EGF和EGFR表达阳性率下降显著,在1000μg/ml组24h、48h和72h的EGF和EGFR阳性率均较500μg/ml组和250μg/ml组同时段的阳性率下降显著(P〈0.05,P〈0.01)。500μg/ml组和250μg/ml组同时段的阳性率无明显差异。结论:氧化苦参碱对EGF和EGFR的抑制途径可能是其抗肝癌机制之一。

乙肝后肝硬化患者血清IL-1β、TNF-α变化对骨代谢影响的临床研究

为探讨细胞因子对乙肝后肝硬化骨代谢的影响 ,采用RIA及ELISA分别测定 36例乙肝后肝硬化患者血清IL - 1β、TNF -α水平及骨密度测量 ,并与 15例健康者对照。结果表明 ,肝硬化患者血清IL - 1β、TNF -α水平较对照组显著升高 (P <0 0 0 1,P <0 0 0 1) ,其中骨质疏松 (OP)组较非骨质疏松 (NOP)组均升高明显 (P <0 0 0 1,P <0 0 1) ,且两组间Child -PughA、C级同级分别比较 ,血清IL - 1β水平显示差异 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,血清TNF -α水平亦有差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 5 ) ;OP组血清IL - 1β、TNF -α与尺桡密度均呈负相关 (r=0 6 38,P <0 0 1;r=0 483,P<0 0 5 ) ,而NOP组则呈无相关。提示乙肝后肝硬化患者血清IL - 1β、TNF -α水平升高 ,是肝性骨病 (HBD)发生的重要因素 ,降低体内IL - 1β、TNF -α水平对HBD防治有一定意义。

高脂血症与急性酒精性胰腺炎发病关系的临床分析

目的探讨高脂血症对急性酒精性胰腺炎发病及病情的影响。方法将69例急性酒精性胰腺炎患者按发病次数分为单发(SA)组和复发(RA)组;按病情程度分为轻症急性酒精性胰腺炎(MAAP)和重症急性酒精性胰腺炎(SAAP),分析伴及不伴高脂血症患者的发病特点。结果SA组患者体重指数(BMI)≥25和血脂异常率间差别有显著性意义(均P=0.000)。伴及不伴高脂血症的患者急性酒精性胰腺炎的复发率和SAAP发生率间差别有显著性意义(P<0.05)。结论高脂血症可加重急性酒精性胰腺炎病情,并促进其复发。

肝硬化患者血浆VIP、CCK水平与胆囊排空功能的关系

探讨肝硬化时血浆胃肠激素水平对胆囊运动的影响。用放免法测定肝硬化患者及对照者血浆血管活性肠肽 (VIP)和胆囊收缩素 (CCK)含量 ;用B超测定餐前、餐后胆囊容积及排空率。结果 :肝硬化时血浆VIP、CCK均明显增高 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ;胆囊空腹容积、剩余容积均明显增大 (P <0 0 1,P <0 0 0 1) ,最大排空率较对照组无明显差异 (P >0 0 5 ) ,但Child -PughC级降低 (P <0 0 5 )。肝硬化组胆囊最大排空率与VIP呈负相关 ,胆囊空腹容积及剩余容积与VIP均呈正相关 ,胆囊空腹容积、剩余容积及最大排空率与CCK均无相关。提示肝硬化时VIP增高既抑制胆囊运动 ,又明显降低胆囊张力 ,肝硬化时可能存在对CCK的抵抗。

干扰素对人肝癌细胞株HepG2.2.15凋亡的影响

目的:探讨肝癌细胞株HepG2.2.15通过低表达Fas逃避免疫监视,以及干扰素α(IFN-α)通过上调Fas表达对细胞凋亡的影响。方法:用流式细胞术检测肝癌细胞株HepG2.2.15的Fas表达及IFN-α对其Fas表达的影响;用激活性Fas单克隆抗体CH11诱导细胞凋亡的方法,研究肝癌细胞对Fas介导凋亡的抵抗以及IFN-α对肝癌细胞凋亡的影响。结果:①HepG2.2.15细胞低表达Fas,经浓度分别为2 000、1 000、500 U/ml的IFN-α作用后,Fas表达均显著增加(P均<0.001),且Fas表达率随IFN-α浓度的增加而增加;②CH11不能诱导HepG2.2.15细胞凋亡,IFN-α上调细胞Fas表达后,由CH11诱导的细胞凋亡增加(P均<0.01),且凋亡率随IFN-α浓度的增加而增加。结论:肝癌细胞HepG2.2.15能抵抗Fas介导的凋亡,IFN-α可通过上调细胞Fas表达,促进CH11诱导的肝癌细胞凋亡。

肝癌细胞系Fas/FasL功能与免疫逃逸机制探讨

目的:探讨肝癌细胞通过Fas/FasL途径的免疫逃逸机制。方法:用流式细胞术检测肝癌细胞系HepG2.2.15细胞表面Fas及FasL的表达;用激活性Fas单克隆抗体CH11诱导细胞凋亡法检测肝癌细胞对Fas介导凋亡的抵抗;用HepG2.2.15与Jurkat细胞共培养法检测细胞表面FasL诱导T细胞凋亡的功能。结果:①HepG2.2.15细胞Fas表达低下,CH11不能诱导其凋亡;②FasL的表达率为18.03%,与Jurkat细胞共培养可诱导Jurkat细胞凋亡;③用中和抗体NOK-2封闭HepG2.2.15细胞表面FasL后,Jurkat细胞的凋亡率由21.41%降为8.91%。结论:肝癌细胞能抵抗Fas介导的凋亡,其表面的FasL可抑制T细胞的免疫功能,Fas/FasL途径是肝癌细胞免疫逃逸的重要机制之一,可成为免疫治疗的新靶点。

FasL反义寡核苷酸逆转肝癌细胞免疫逃逸的实验研究

目的:研究FasL反义寡核苷酸对肝癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸的逆转作用。方法:用流式细胞术检测肝癌细胞系HepG2.2.15细胞表面Fas、FasL的表达及Jurkat细胞表面Fas的表达;用HepG2.2.15细胞与Jurkat细胞共培养方法,研究FasL诱导T细胞凋亡的功能;用脂质体介导法转导FasL反义寡核苷酸入肝癌细胞,并通过检测细胞表面FasL表达、RTPCR及细胞共培养方法研究FasL反义寡核苷酸转导对肝癌细胞免疫抑制的逆转作用。结果:①HepG2.2.15细胞低表达Fas,却表达有功能的FasL,与高表达Fas的Jurkat细胞共培养可诱导后者凋亡;②肝癌细胞转入FasL反义寡核苷酸后,FasLmRNA降低;细胞表面FasL表达下降;与Jurkat细胞共培养,Jurkat细胞的凋亡率下降。结论:肝癌细胞表达的FasL可抑制T细胞的免疫功能,是肝癌细胞免疫逃逸的重要机制之一;FasL反义寡核苷酸转导可以逆转肝癌细胞的免疫抑制作用。

Cyclin D1和VEGF在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨细胞周期蛋白D 1(cyclinD 1)和血管内皮生长因子 (VEGF)表达与胃癌分型、分期、浸润转移等生物学行为的关系。方法 应用免疫组织化学S P法 ,检测各期胃癌共 5 7例、慢性萎缩性胃炎 2 0例组织中cyclinD1和VEGF的表达。 结果 胃癌组cyclinD 1阳性表达率 ( 4 7.4% )高于慢性萎缩性胃炎组 ( 2 0 .0 % ) ;cyclinD1表达与肿瘤分化程度密切相关 ,与肿瘤浸润深度、肿瘤大小、淋巴结状态及TNM分期无关。胃癌组VEGF阳性表达率 ( 77.2 % )显著高于慢性萎缩性胃炎组 ( 5 .0 % ) ;VEGF的表达与胃癌的分化程度、肿瘤浸润深度、肿瘤大小、淋巴结状态、TNM分期均密切相关。在胃癌组织中 ,cyclinD1与VEGF的表达呈正相关。cyclinD 1、VEGF均阳性组以Ⅲb期和Ⅳ期患者多 ,cyclinD1、VEGF均阴性组以Ⅰa +Ⅰb和Ⅱ +Ⅲa期患者多。 结论 cyclinD1过表达参与了胃癌的发生 ,是胃癌发生过程中 1个较早期的分子事件。VEGF促进胃癌的增长 ,促使肿瘤向黏膜深层浸润并向远处转移。cyclinD 1和VEGF在胃癌的发生中起协同作用 ,其表达与TNM分期密切相关 。

胃癌患者血清胰岛素样生长因子-Ⅱ检测及其临床意义

目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)与胃癌的关系。方法:采用放射免疫法对31例胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平进行检测,并与10例正常组、10例慢性萎缩性胃炎伴肠腺化生(CAGGM)组及10例慢性萎缩性胃炎伴重度不典型增生(CAGD)组作对照。比较20例胃癌患者手术前后血清IGF-Ⅱ水平的变化,分析其与胃癌病理分期、恶性程度、肝转移及与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的关系。结果:血清IGF-Ⅱ水平胃癌组和CAGD组较正常组均明显升高(P<0.001,P<0.01),且胃癌组较CAGGM组、CAGD组血清升高(P<0.001,P<0.001),CAGD组与CAGGM组比较亦有显著性差异(P<0.01);术后2周血清IGF-Ⅱ水平较术前显著下降(P<0.001)。中、晚期胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较早期患者显著升高(P<0.01);差分化型胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较分化型明显升高(P<0.05);胃癌有无肝转移、是否伴Hp感染其血清IGF-Ⅱ水平均无明显差异。结论:血清IGF-Ⅱ水平升高是胃癌发生、发展的重要因素之一;检测血清IGF-Ⅱ水平的变化,对胃癌的诊断、手术切除是否彻底、判断病情变化有一定临床价值。Hp感染与血清IGF-Ⅱ水平升高可能分别作为独立因素,共同参与胃癌的发生、发展。

胰岛素样生长因子-Ⅱ与肿瘤关系的研究进展

近年研究发现胰岛素样生长因子-Ⅱ与肿瘤关系密切,是肿瘤细胞生长的刺激因子,与其Ⅰ型受体、Ⅱ型受体特异性结合,通过一系列信号转导,发挥多种生物学作用,参与肿瘤的发生、发展、转移及新生血管的形成等。本文介绍胰岛至少样生长因子-Ⅱ的结构、功能以及促进肿瘤发生、发展和转移等方面的研究进展。

便秘型肠易激综合征肛门直肠动力学的临床研究

目的:观察便秘型肠易激综合征(IBS)患者的肛门直肠动力学改变。方法:采用Pc Polygraf多功能消化道压力检测仪测定18例便秘型IBS患者和21例健康人的肛门内外括约肌、直肠静息压力、肛门内括约肌主动收缩压。

乙肝后肝硬化患者血清IL-1β、TNF-α变化和骨质改变的关系

目的探讨血清IL1β、TNFα变化对肝硬化骨代谢异常的影响及病理学改变。方法采用RIA及ELISA分别测定61例乙肝后肝硬化血清IL1β、TNFα及骨密度测量,并与30例健康者对照。其中17例患者及12例健康者行骨组织学观察。结果肝硬化组血清IL1β、TNFα水平较对照组明显升高(P<0.001),骨质疏松(OP)组血清IL1β、TNFα与非骨质疏松(NOP)组比较差异显著(P<0.01),且OP组IL1β、TNFα与尺桡骨密度均呈负相关性(r=-0.574,P<0.001;r=-0.418,P<0.05)。组织学发现14例诊断为OP,其重度组血清IL1β、TNFα水平较轻度组也明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论肝硬化患者血清IL1β、TNFα水平升高可引起骨吸收加强,是肝性骨病(HBD)发生重要因素。

原发性肝癌患者血清雌二醇和泌乳素的变化

本文对伴有肝硬化的原发性肝癌男性患者30例和肝硬化男性患者30例检测血清雌二醇和泌乳素水平,探讨二者与原发性肝癌的关系。结果显示两组病人的雌二醇和泌乳素均较正常对照明显增加(P<0.01),原发性肝癌组两种激素水平较肝硬化组亦明显增加(P<0.01)。提示,在肝硬化基础上的原发性肝癌形成过程中,雌二醇和泌乳素可能具有促进作用。

核因子-κB在高脂饮食诱导的大鼠胰腺损伤中的作用

目的研究长期高脂饮食诱导的大鼠胰腺损伤及核因子-κB（NF-κB）在其发病机制中的作用。方法雄性Wistar大鼠14只分为高脂组和正常对照组,分别给予正常饮食和高脂饮食喂养20周。检测血清三酰甘油、总胆固醇及淀粉酶、脂肪酶、葡萄糖水平;常规HE染色观察胰腺病理改变;透射电镜观察胰腺超微结构改变;苦味酸-天狼猩红染色观察胶原形成;免疫组织化学染色检测NF-κB/p65、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和α-平滑肌动蛋白（α-SMA）表达;RT-PCR法检测胰腺组织中NF-κB/p65、ICAM-1、TNF-α、α-SMAmRNA水平。结果高脂组大鼠喂养2周后即出现高脂血症,20周末,高脂组大鼠血清三酰甘油和总胆固醇均高于对照组（P〈0.01）。20周后高脂组大鼠胰腺组织腺泡细胞萎缩、空泡变性;内质网明显扩张,血管内皮细胞间隙增宽,血管内皮断续;胰腺组织内有胶原形成。高脂组大鼠胰腺NF-κB/p65、ICAM-1和α-SMA蛋白高表达;高脂组大鼠NF-κB/p65、ICAM-1、TNF-α、α-SMAmRNA水平均较对照组明显增高（P〈0.05或P〈0.01）。结论长期高脂饮食可引起高脂血症和胰腺组织损伤,其分子机制与NF-κB活化及其下游分子的表达增强有关。

己酮可可碱对大鼠胰腺纤维化的影响

目的:观察己酮可可碱(PTX)对大鼠胰腺纤维化的影响。方法:大鼠胰管内注射2%三硝基苯磺酸(TNBS),制备大鼠胰腺纤维化模型。将大鼠12只随机分为PTX干预组、对照组。PTX干预组于术后第2天给予PTX 6 mg/(kg.d)腹腔注射,4周后收集两组胰腺标本。采用免疫组化技术检测治疗前后胰腺组织中α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)、血小板衍化生长因子(PDGF)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)、磷酸化细胞外信号调节激酶1(P-ERK1)的含量同时做组织胶原纤维染色,部分胰腺组织液氮冻存,以Western blot方法检测-αSMA的表达。结果:对照组发生胰腺纤维化,PTX干预组有轻度纤维化。PTX干预组-αSMA、PDGF、COLⅠ的含量以及P-ERK1在基质细胞中的表达均低于对照组(P<0.01)。胶原纤维染色显示,PTX治疗组胶原面积百分比明显低于对照组(P<0.01)。结论:PTX有抗大鼠胰腺纤维化的作用。

PDGF及其受体在大鼠胰腺纤维化中的作用

目的:探讨血小板源生长因子(PDGF)及其受体(PDGFR)在胰腺纤维化过程中的作用及意义。方法:通过胰管内注射2%三硝基苯磺酸(TNBS)的方法制作大鼠胰腺纤维化模型,采用免疫组化方法检测2、3、45、6、周PDGF、PDGFR及α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)在大鼠胰腺组织中的表达。结果:第4周,PDGF-B、PDGFR-β、-αSMA在模型组的表达均强于对照组(P均<0.01)。-αSMA与PDGF-B、PDGFR-β定量分析呈正相关(P均<0.01),与PDGF-A、PDGFR-α无相关关系(P均>0.05)。模型组中不同时期PDGF-B及PDGFR-β表达分别强于PDGF-A、PDGFR-α(P均<0.01)。结论:PDGF、PDGFR在慢性胰腺炎发生纤维化过程中具有重要作用,其中以PDGF-B及PDGFR-β为主。