壳聚糖及其衍生物在口腔医学应用研究新进展

壳聚糖是一种天然聚阳离子多糖衍生物,因具有良好的生物相容性及多种生物学功能,已作为一种生物材料得到广泛应用。笔者就壳聚糖及其衍生物在口腔医学领域的应用研究进展作一综述。

壳聚糖温敏凝胶及其在口腔医学中的应用前景

壳聚糖(Chitosan,CS)/甘油磷酸钠(Glycerophosphate salt,GP)温敏凝胶具有在生理体温发生溶胶-凝胶相变的特性,加之良好的生物相容性、制备工艺简单等优点,已经逐渐被应用于生物载药、组织工程等领域。近年来,CS/GP温敏凝胶体系的研究主要表现在对其性能的改进及其在相关医学领域中的应用。本文对CS/GP温敏凝胶体系的研究进展及其在口腔医学领域的应用前景作一综述。

附着龈重建在口腔种植修复中的应用

目的:探讨种植体周围附着龈重建的方法,评估其临床应用效果及技术特点。方法:选择2011年1月—8月在山东大学口腔医院种植中心行种植二期手术且伴有附着龈不足的患者8例,共10个种植位点,应用改良根向复位瓣术在种植二期手术的同期为患者进行附着龈重建。术后4周行烤瓷冠修复,冠修复半年后复诊。分别记录术前、术后4周、冠修复半年后的有效角化黏膜宽度。记录冠修复半年后的改良菌斑指数(mPI)、探诊深度(PD)、出血指数(BI)和探诊出血位点百分比。采用SPSS 18.0软件包对数据进行Wilcoxon符号秩检验。结果:术后4周时,有效角化黏膜宽度与术前相比平均增加2.41 mm(P<0.05)。重建的角化黏膜宽度在冠修复半年后仍然保持稳定,无明显炎症并紧密贴合于烤瓷冠,平均为(2.64±0.53)mm。mPI平均为0.70±0.82,PD平均为(1.80±0.36)mm,BI平均为0.73±0.64,探诊出血位点百分比为23.3%。结论:在种植二期手术同期,采用改良根向复位瓣术能有效重建种植体周围的附着龈,短期内效果良好。

姜黄素联合紫杉醇对人口腔鳞癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的:探讨姜黄素和紫杉醇对人口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖和凋亡的影响。方法:培养人口腔鳞癌细胞系CAL27,采用不同浓度的姜黄素和紫杉醇及联合用药处理细胞24 h、48 h及72 h。MTT法检测对细胞增殖的影响,Tunel法检测对细胞凋亡的影响,Western印迹法检测对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和活性caspase-3表达的影响。采用SPSS11.0软件包对数据进行统计学分析。结果:相对于姜黄素或紫杉醇对CAL27的单独作用,两者联合用药能更显著地抑制CAL27细胞增殖和促进CAL27细胞凋亡,更显著地下调Bcl-2表达和Bcl-2/Bax表达比例,上调Bax和活性caspase-3的表达。结论:相比于单一用药,姜黄素和紫杉醇联合用药对CAL27有更好的增殖抑制和凋亡诱导作用。

不同氟浓度的人工唾液对口腔常用金属腐蚀性的研究

目的:研究钴铬合金、纯钛及高钴铬钼合金在不同氟浓度的人工唾液中的电化学腐蚀行为。方法:将3种口腔常用金属分别在不同氟浓度(0%、0.05%、0.2%)的人工唾液中,采用动电位极化曲线法测得其腐蚀电位、腐蚀电流密度及极化电阻,分析材料的耐腐蚀性。结果:纯钛及钴铬合金的腐蚀电流密度随着氟的浓度增加而变大,极化电阻随着氟的浓度增加而变小,纯钛在不同氟浓度的人工唾液中的腐蚀电流密度和自腐蚀电位变化明显(P<0.05)。氟对维他灵和钴铬合金的耐腐蚀性影响不明显。结论:氟离子的存在影响钴铬,纯钛及高钴铬钼合金的耐腐蚀性,常使用氟制品的患者,不宜选用纯钛金属;口腔中有这三种金属修复体的患者,不宜长时间使用高氟产品。

骨形成蛋白信号通路中Smad4和Smad7在口腔鳞癌中的表达变化

目的:观察口腔鳞癌和癌旁正常组织中Smad4和Smad7表达量的变化,探讨Smad4和Smad7对口腔鳞癌发生和发展的影响。方法:收集临床和病理学诊断为OSCC的病例72例。取癌组织和癌旁正常组织做切片,用SP免疫组化法分别检测Smad4和Smad7在口腔鳞癌和正常组织中的表达,采用SPSS11.5软件包对数据进行统计学分析。结果:Smad4蛋白在癌旁正常组织中的阳性表达率为69.44%,在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为45.83%(P<0.05),且随着分化程度的降低其阳性表达率降低;有淋巴结转移者阳性表达率为22.50%,无淋巴结转移者阳性表达率为65.63%(P<0.05)。Smad7蛋白在癌旁正常组织中的阳性表达率为19.44%,在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为83.33%(P<0.05),且随着分化程度的降低其阳性表达率升高;有淋巴结转移者阳性表达率为92.50%,无淋巴结转移者阳性表达率为68.75%(P<0.05)。结论:Smad4在癌组织中表达明显减少,且分化程度越低,表达越少,Smad4在有淋巴结转移的组织中比在无淋巴结转移的组织中表达低;Smad7的作用则相反。Smad4的表达缺失可能促进了口腔鳞癌的发展和转移,Smad7的过表达促进了口腔鳞癌的发展和转移;BMP/Smads信号传导通路受到抑制,可能会导致口腔鳞癌的继续发生和发展。

大鼠下牙槽神经离断和牙周炎双重动物实验模型的建立

目的:建立大鼠下牙槽神经离断和实验性牙周炎双重动物实验模型,探讨神经因素在牙周炎发生、发展及牙周组织再生中的作用,为相关牙周病学研究提供基础。方法:36只成年SPF级Wistar大鼠随机分为3组,每组12只。离断下牙槽神经并诱导牙周炎组(P1组):结扎双侧下颌第一磨牙,同时离断左侧下牙槽神经,术后高糖饮食喂养;单纯离断下牙槽神经组(P2组):离断左侧下牙槽神经,术后常规喂养;正常组(N组):假手术操作,常规喂养。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学处理。结果:6周时,P1组牙周炎模型建立成功,各项指标与P2组及N组差异显著;P1组离断下牙槽神经侧牙周组织破坏程度明显重于该组对照侧,P2组离断神经侧牙周组织无明显炎症。结论:神经缺失可加重牙周炎症引起的组织破坏,但单纯神经缺失不会引起牙周组织炎症。

一氧化碳释放分子对大鼠实验性牙周炎的影响

目的研究一氧化碳释放分子(CORM)对大鼠实验性牙周炎的影响。方法将42只健康雄性Wistar大鼠分为正常组(NL组)、牙周炎组(LO组)和一氧化碳干预组(CO组)。NL组不作任何处理;CO及LO组采用牙周丝线结扎法建立牙周炎实验模型;建模当天起CO组经腹腔注射CORM-2,每天10 mg·kg-1,连续10 d,LO组注射等体积生理盐水。分别于结扎3、7、10 d后自心脏抽取静脉血,用酶联免疫吸附测定法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的质量浓度。10 d后在体视显微镜下测量牙槽骨的吸收高度,并于光镜下观察牙周组织炎症细胞的浸润情况。结果丝线结扎10 d后,LO、CO组牙槽骨的吸收高度均明显大于NL组,而CO组明显小于LO组(P<0.05);LO、CO组炎症细胞浸润指数明显高于NL组,而CO组明显低于LO组(P<0.05)。在同一观察时期内,LO组TNF-α及IL-1β质量浓度均明显高于其他两组,而CO组虽高于NL组,但明显低于LO组(P<0.05)。结论 CORM-2能有效抑制大鼠实验性牙周炎的炎症细胞浸润和牙槽骨吸收。

角质细胞生长因子对口腔黏膜上皮细胞凋亡的作用研究

目的研究不同浓度角质细胞生长因子(KGF)对口腔黏膜上皮细胞凋亡的作用,为探讨KGF在口腔黏膜病发生发展中的作用提供依据。方法将不同浓度的KGF(对照组0 ng·mL-1,实验1组5 ng·mL-1,实验2组25 ng·mL-1,实验3组50 ng·mL-1)分别加入体外培养的口腔黏膜上皮细胞,培养12、24、48 h后,倒置显微镜下观察其对细胞形态的影响,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,荧光实时定量检测细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA的表达水平。结果 1)实验组较对照组细胞贴壁明显,且48 h时实验3组细胞核仁明显。2)培养48 h时,4组之间的细胞凋亡率、Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达均有统计学差异,随着KGF浓度的增加,细胞凋亡率和Bax mRNA表达逐渐降低,Bcl-2 mRNA表达逐渐升高(P<0.05)。结论 KGF可通过上调Bcl-2 mRNA和下调Bax mRNA的表达抑制上皮细胞的凋亡。

济南敬老院老年人口腔缺牙及修复情况初步调查

目的:了解济南市敬老院老年人缺牙状况和口腔保健习惯,为采取针对性措施提高敬老院老年人生活质量提供相关参考。方法:按照"第三次全国口腔健康流行病学调查"的要求,采取多阶段、随机抽样的方法,对济南市敬老院420名老年人进行口腔保健问卷调查和口腔健康状况检查。所得数据采用SPSS18.0软件进行统计分析。结果:在420例受检者中,牙列完整者9例(2.14%),牙列缺损者321例(76.43%),牙列缺失者90例(21.43%);义齿修复率47.45%(195/411)。结论:济南市敬老院老年人口腔健康状况欠佳,缺牙率高而修复率低,缺乏正确的口腔卫生保健习惯。应加强口腔卫生宣教,并采取相应的口腔保健措施改善老年人口腔健康状况。

盐酸米诺环素脂质体控释凝胶改善大鼠实验性牙周炎的作用评价

目的在动物体内检验盐酸米诺环素脂质体控释凝胶的生物相容性及其对牙周炎动物模型的修复效果。方法毒性实验:用质量分数2%盐酸米诺环素脂质体控释凝胶溶液给SD大鼠灌胃,观察长期应用该制剂有无全身不良反应及其反应程度。牙周炎动物模型实验:将实验性牙周炎建模成功的SD大鼠分为3组,A组为派丽奥组,B组为实验药物组,C组为阴性对照组;A、B组每周牙周袋内给药1次,连续56 d,C组给予生理盐水;分别在给药7、14、28、56 d后测量各组动物的牙周探诊深度(PD)和牙龈指数(GI),并进行组织学观察,计算单核细胞和破骨细胞的数目。结果盐酸米诺环素脂质体控释凝胶具有良好的生物相容性;给药14 d后,PD、GI,以及单核细胞和破骨细胞数目均较其他两组明显降低,组织学观察可见新骨及部分新纤维形成。结论牙周袋内使用盐酸米诺环素脂质体控释凝胶可减轻牙周炎症,提示该制剂对改善牙周炎有一定的疗效,具有临床应用前景。

增强型绿色荧光蛋白慢病毒载体标记人牙周膜干细胞的实验研究

目的研究增强型绿色荧光蛋白(eGFP)慢病毒载体标记人牙周膜干细胞(PDLSCs)的理想条件,以获得稳定高表达eGFP的人PDLSCs。方法 eGFP慢病毒载体以25、50、100、200和400的感染复数(MOI)转染人PDLSCs48 h,荧光倒置显微镜及流式细胞术检测各组的转染效率和荧光强度,MTT法评价转染对细胞增殖的影响,检测细胞多向分化能力以及碱性磷酸酶(ALP)的表达状况,从而确定理想的转染条件。结果 eGFP慢病毒作用48 h,不同组的转染效率分别为44.7%、60.9%、71.7%、85.8%、86.9%;除MOI为400时以外,eGFP慢病毒转染对细胞增殖无明显影响;MOI为200时,转染细胞的多向分化能力未受影响,ALP活性与未转染组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MOI为200作用48 h对细胞的增殖分化无明显影响,是eGFP慢病毒载体标记PDLSCs的理想条件,保持了其基本的生物学特性。

p75神经营养蛋白受体阳性舌鳞状细胞癌细胞的生物学特性研究

目的对流式细胞仪分选获得的p75神经营养蛋白受体(p75NTR)阳性舌鳞状细胞癌细胞进行生物学特性研究。方法通过流式细胞术检测舌鳞状细胞癌细胞系Tca-8113和Cal-27中p75NTR阳性细胞的表达。对流式细胞仪分选获取的p75NTR阳性细胞进行单克隆培养、四甲基偶氮唑盐比色法及划痕实验检测,以未分选细胞为对照,分析p75NTR阳性细胞的生物学特性。结果舌鳞状细胞癌细胞株Tca-8113、Cal-27中,p75NTR阳性细胞的比例分别为3.1%和1.9%。与未分选的细胞相比,p75NTR阳性细胞的单克隆形成能力更高(Tca-8113细胞,P=0.024;Cal-27细胞,P=0.009);单克隆p75NTR阳性细胞再培养2周后,p75NTR阳性细胞率分别降为14.5%(Tca-8113)和5.8%(Cal-27);p75NTR阳性细胞体外增殖能力显著增强,且具有明显的侵袭迁移能力。结论 p75NTR阳性舌鳞状细胞癌细胞具有肿瘤干细胞的特性。

酸蚀及微弧氧化对钛表面处理后与瓷结合强度的实验研究

目的:研究酸蚀和微弧氧化单独或联合应用对纯钛表面处理后进行烤瓷,观察其表面粗糙度并分析其钛瓷结合强度。方法:将50个纯钛试片(25mm×5mm×0.5mm)随机均分为5组,表面用碳化硅砂纸抛光后110μm Al2O3进行喷砂处理,再进行喷砂、酸蚀、微弧氧化、酸蚀后微弧氧化及微弧氧化后酸蚀处理分别为A到E组,用粗糙度测试仪测量各组的粗糙度值并进行统计学分析,扫描电镜观察试件的表面形貌。行瓷粉烧结(厚度控制在1mm),然后对钛瓷间的三点弯曲结合强度进行测试并进行统计学分析,用扫描电镜观察钛瓷分离面的的表面形貌。结果:酸蚀使纹路更清晰,粗糙度增加。C组纯钛表面形成许多孔洞,孔洞较大,大小基本一致。C组除大孔洞外还存在许多小孔洞,均匀致密。D组表面孔洞大小不一,较致密,存在凹陷,边缘不规则,个别相邻孔洞之间可见微裂纹。与喷砂相比,微弧氧化处理使纯钛与瓷的结合强度差异有统计学意义(P<0.05),而酸蚀处理的钛表面与瓷的结合强度增加,但与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:酸蚀和微弧氧化联合处理与单独微弧氧化处理钛瓷间的结合强度差异无统计学意义,说明微弧氧化处理更利于钛瓷间的结合。

P75神经营养因子受体在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:研究口腔鳞状细胞癌中p75神经营养因子受体(p75NTR)的表达,探讨p75NTR作为预测口腔鳞状细胞癌预后指标及将其作为肿瘤干细胞标志物的可能性。方法:采用SP免疫化学方法,对舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113及43例手术切除口腔鳞状细胞癌标本进行p75NTR表达的检测,另外选取5例癌旁组织及8例正常组织作为对照。应用SPSS16.0软件包,采用行×列表资料的χ2检验进行统计学分析。结果:p75NTR在Tca8113细胞膜中阳性表达。43例口腔鳞状细胞癌组织中,p75NTR阳性表达33例,在癌旁组织及正常对照组中没有表达。p75NTR均定位于细胞膜上,于癌巢中分散分布,且常有聚集性分布趋势。p75NTR表达与临床分期(P<0.05)及有无淋巴结转移(P<0.05)相关。结论:p75NTR的表达可以作为预测口腔鳞状细胞癌预后的指标,但还不能将其单独作为肿瘤干细胞的标志物,其在肿瘤发生、发展中的作用及机制仍需进一步研究。

新型纳米抗菌无机填料抗菌防龋作用的动物实验研究

目的:探讨表面枝接长链烷基季铵盐的新型纳米抗菌无机填料在大鼠口腔内的抗菌防龋功能。方法:选取5周龄SD雄性大鼠20只,口腔内接种变形链球菌,同时辅以致龋饮食,建立大鼠口腔龋病模型;并随机分成实验组和对照组,每组10只。实验组以自行合成的新型纳米抗菌无机填料刷洗牙齿而对照组则用以普通的纳米二氧化硅无机填料。4周后进行大鼠口腔变形链球菌菌落计数;随后处死大鼠,鼠齿按照Keyes龋齿计分标准进行计分,所有结果进行统计学分析。结果:实验组大鼠口腔变形链球菌菌落计数少于二氧化硅处理组(P<0.05);Keyes计分结果显示,实验组大鼠牙齿面窝沟及平滑面龋损均低对照组(P<0.05)。结论:大鼠动物实验表明,新型纳米抗菌无机填料具有明显的抗菌防龋功能。

碳离子注入对义齿基托树脂表面性能改进的实验研究

目的研究碳离子注入对义齿基托树脂表面性能的影响。方法制备20个热固化型义齿基托树脂试件,并随机分成实验组(进行碳离子注入)和对照组(不做任何处理),每组10个试件。分别进行纳米硬度、润湿性和耐磨性的检测,实验组和对照组任取1个试件进行表面化学结构的红外光谱分析。结果实验组和对照组试件表面纳米硬度值、接触角、质量损失量间的差异有统计学意义(P<0.01)。红外光谱分析显示实验组试件表面有羟基的生成。结论碳离子注入有明显改善义齿基托树脂相关性能的作用。

三种口腔修复支架材料调磨后不同抛光方法对其表面粗糙度的影响

目的:研究钴铬合金、高钴铬钼合金(Vitallium 2000合金)和纯钛三种支架材料调磨后不同的抛光方法对其粗糙度的影响,为临床选择合适的抛光方法提供参考。方法:将三种金属铸件常规抛光,每种金属均匀调磨后按不同处理方式随机分成四组,用粗糙度测试仪测量各组的粗糙度值并进行统计学分析,电子显微镜观察铸件表面形貌。结果:相同的材料,随着抛光程序的增加,其表面粗糙度值除钴铬合金和Vitallium 2000中使用抛光机布轮加抛光液组和使用绒轮加抛光膏组结果差异无统计学意义(P>0.05)外,其它组均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);相同的抛光方法,纯钛组所测得的粗糙度值比钴铬,Vitallium 2000合金组大,差异有统计学意义(P<0.05)。钴铬和Vitallium 2000组每组间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。显微镜下观察其表面形貌与上述粗糙度值相一致。结论:临床钴铬合金和Vitallium 2000合金金属支架在试戴调磨后可使用金刚砂橡皮轮+绒轮蘸抛光膏抛光即可达到良好的抛光效果,而纯钛需在上述抛光基础上继续增加抛光机布轮抛光液抛光;使用相同的抛光方法,纯钛的抛光效果比其它两种材料稍差,提示了临床上针对纯钛铸件的抛光应仔细、认真。

不同制作工艺对金属基底边缘适合性影响的实验分析

目的:比较CAD/CAM制作的蜡熔模和树脂熔模与传统滴蜡法制作的蜡熔模对金属基底边缘适合性影响的差异。方法:采用标准模具制作标准代型18个,随机分为A、B、C三组,每组6个,A组代型滴蜡法制作蜡熔模,B组代型CAD/CAM制作蜡熔模,C组代型CAD/CAM制作树脂熔模。每一代型及熔模进行四点标记,分别进行包埋铸造,按标记点就位,对每一个代型就位后的金属基底用Leica显微镜在四个标志点对垂直边缘缝隙进行拍照,用Image-Pro Plus 6.0进行测量后,使用SAS9.13对结果进行方差分析及t检验。结果:A组:68.20±24.30μm;B组:46.31±23.43μm;C组:60.58±21.87μm。所有试件的垂直边缘缝隙均在120μm以内。经方差分析及t检验,三组之间(P=0.0061)差异有统计学意义,A、C两组(P=0.2600)之间差异无统计学意义,A组与B组(P=0.0027)、B组与C组(P=0.0343)之间差异均有统计学意义。结论:CAD/CAM制作的蜡熔模与CAD/CAM制作的树脂熔模、传统滴蜡法制作的蜡熔模相比,经铸造后的试件具有较好的边缘适合性。CAD/CAM与传统铸造法结合能获得边缘适合性良好的修复体。

孔洞设计界面对硅橡胶软衬材料粘接性能影响的实验研究

目的:探讨改变树脂表面形态中孔的直径以及分布后其与硅橡胶软衬材料的粘接效果,获取一种增加硅橡胶软衬材料粘接强度的简便可靠的方法。方法:利用模具制作3.6×2.5×3.0mm3的带孔的自凝树脂板,要求如下:边距1mm、孔的直径分别为1.0mm、1.5mm、2.0mm,间隔2mm,孔的厚度为1.0mm;同等型号的树脂板相对,中间加1.5mm的软衬材料,形成"三明治"结构,利用改良的"L"型拉伸实验进行剥脱力值的测定,并进行统计学分析;选择第一组实验中力值较大的一组直径制作全部打孔和周边打孔两组树脂板,重复实验并进行统计学分析;任选一个直径制作平板组和周边打孔组,制作"三明治"结构,然后利用拉伸实验进行剥脱力值的测定,并对所得的数值进行统计分析。结果:三组直径的全部打孔组剥脱力值分别为512.64±231.44572N、463.75±98.90334N与480.85±47.84115,差异无统计学意义;1.5mm组的全部打孔和周边打孔组剥脱力值为469.26±94.83642N与440.09±56.60532N,差异无统计学意义;2.0mm组的平板组和周边打孔组剥脱力值为625.68±72.19835N与688.52±85.89314N,差异有统计学意义。结论:利用树脂界面打孔增加硅橡胶类软衬材料的粘接强度确实可行;鉴于直径为1.0mm、1.5mm、2.0mm组及周边打孔和周边打孔的剥脱力值相当,可直接采用周边打孔增加粘接强度。