FPR2通过ERK1/2信号通路调控炎症状态下滋养细胞生物学功能

目的:明确甲酰肽受体2(FPR2)在炎症状态下对滋养细胞生物学功能的影响,分析其在绒毛膜羊膜炎中的作用,并探讨其机制。方法:收集10例绒毛膜羊膜炎患者和10例正常产妇的胎盘组织,利用免疫组化和Westernblot检测胎盘组织中FPR2的定位和表达。应用脂多糖(LPS)建立人绒毛膜滋养层细胞系HTR-8/SVneo体外炎症模型,利用Westernblot检测FPR2表达;应用小干扰RNA敲减FPR2基因,检测正常组、LPS处理组和LPS+FPR2敲减组细胞培养液上清中促炎因子白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,并通过EdU实验、流式细胞术、Transwell实验和划痕实验检测细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移;利用Westernblot分析丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中关键因子细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p-ERK1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、p38和p-p38蛋白表达。结果:绒毛膜羊膜炎患者胎盘组织中FPR2表达显著增加(P<0.01)。FPR2敲减显著降低LPS诱导的HTR-8/SVneo细胞IL-6、IL-1β和TNF-α的分泌(P<0.01或P<0.05),同时减弱了LPS对HTR-8/SV⁃neo细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响(P<0.05或P<0.01);LPS激活了ERK1/2、JNK和p38信号通路(P<0.05或P<0.01),FRP2敲减后JNK和p38信号通路无显著变化,ERK1/2信号通路受到显著抑制(P<0.01)。结论:FPR2参与了炎症状态下滋养细胞功能的调节,其作用机制可能与ERK1/2信号通路有关。

产后出血的止血方法研究现状

产后出血(postpartum hemorrhage,PPH)是指胎儿娩出后24 h内阴道分娩出血量>500 mL或剖宫产出血量>1000 mL。PPH是最常见的分娩期并发症,也是导致孕产妇死亡的首要原因。及时、迅速、正确止血是治疗PPH至关重要的一步。文章对PPH的止血理论和方法研究现状作一概述,以期为控制PPH、改善预后提供帮助,为孕产妇生命安全提供保障。

二氧化硅上调活性氧诱导NLRP3依赖的巨噬细胞焦亡机制

[背景]巨噬细胞是天然免疫系统的重要组成成分,其在抵抗呼吸道途径外来异物入侵和维持肺组织内环境稳态中发挥重要作用。[目的]探讨不同粒径的二氧化硅(SiO_(2))粉尘诱导巨噬细胞焦亡发生机制。[方法]将巨噬细胞RAW-ASC分为空白组、脂多糖(LPS)组(1μg·m L^(-1)LPS)、纳米SiO_(2)组(1μg·m L^(-1)LPS+100μg·m L^(-1)纳米SiO_(2))、微米SiO_(2)组(1μg·m L^(-1)LPS+750μg·m L^(-1)微米SiO_(2))和阳性对照组[1μg·m L^(-1)LPS+3 mmol·L^(-1)三磷酸腺苷(ATP)]。除空白组外,其他组细胞均以LPS预处理6 h,再以SiO_(2)或ATP处理4 h。锚定焦亡通路分子靶点NOD样受体蛋白3(NLRP3)、活性氧(ROS)施加特异性干预剂[NLRP3抑制剂MCC950、ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)]。CCK-8法检测细胞活性;5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(Ed U)染色检测细胞增殖能力;试剂盒法检测细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)水平;钙黄绿素/碘化丙啶(Calcein AM/PI)荧光双染评估细胞破裂状况;二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测细胞内ROS水平;Western blotting检测焦亡相关标志NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、gasdermin D(GSDMD)、白介素-1β(IL-1β)的蛋白表达水平。[结果]与空白组相比,100μg·m L^(-1)纳米SiO_(2)及750μg·m L^(-1)微米SiO_(2)处理,分别使细胞活性降低至40%和68%(P<0.05),细胞增殖率降低至30%和33%(P<0.01),并且诱导细胞破裂与ROS释放,上调NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白表达水平(P<0.05),诱导巨噬细胞发生焦亡。添加特异性干预剂MCC950(10μmol·L^(-1))和NAC(10 mmol·L^(-1))后,巨噬细胞内NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β表达水平均较未干预组下降(P<0.05)。此外,NAC还可有效降低细胞内ROS水平(P<0.05)。[结论]纳米及微米级SiO_(2)粉尘均具细胞毒性,表现为上调巨噬细胞ROS水平,激活NLRP3炎性小体并介导细胞焦亡,促进炎性细胞因子释放等,相关研究结果有助于揭示SiO_(2)粉尘诱导的巨噬细胞焦亡分子机制。