同步化羊水细胞传代培养在产前诊断中的应用

目的探讨应用旧培养基内同步化羊水细胞（M期细胞）传代培养其细胞基数达到多少为最佳的培养方法以及旧培养基在4℃冰箱内的存放期限。方法对照组141份，每例接种2瓶，仅作原代培养。实验组140份，采用原代培养联合旧培养基内M期细胞传代培养及4~C冰箱储备种细胞的方法。结果羊水细胞培养成功率由92．2％（对照组）提高到100％（实验组），两者间的差异有统计学意义（x2=11．367，P〈O．01）；对照组原代培养原位制片获得的细胞克隆数（13．35±6．38）与实验组原代培养原位制片获得的细胞克隆数（25．31±6．68）比较，两者差异无统计学意义（P〉0．01）。实验组原位制片获得的细胞克隆数（25．31±6．68）与1：2传代培养原位制片获得的克隆数（90．68±8．41）比较，两者之间的差异有统计学意义（P〈0．01）；对照组与实验组获得的可分析分裂相数比较，两者之间的差异有统计学意义（x2=140．063，P〈0．01）；旧培养基4＂C冰箱保存2～12天后分离其内细胞传代培养同样可获得满意效果。结论旧培养基内M期细胞的再利用可获得较多的有效分裂相，提高了培养成功率，保留了原代培养原位制片羊水细胞克隆的完整性，有利于核型分析时真假嵌合体的鉴定，保证了分析结果的可靠性，确保了一次性穿刺即可达到羊水细胞培养成功的效果。

冷“休克”同步化羊水细胞传代培养在产前诊断中的应用

目的探讨冷“休克”同步化羊水细胞传代培养在产前诊断中的应用。方法实验组将原代培养至7天时置换出的旧培养基放置于4℃冰箱冷“休克”15天后，分离其内的M期细胞加入适量新培养基传代培养；对照组直接将原代培养至第7天时置换出的旧培养基离心，收集其内的M期细胞加入适量新培养基传代培养，不做冷“休克”处理。采用流式细胞术检测实验组和对照组活细胞、早期凋亡细胞及晚期凋亡细胞和死细胞的百分比；染色体G显带技术进行实验组和对照组的染色体核型分析，观察实验组染色体核型是否存在畸变。结果实验组收获的活细胞数（21．65±2．58）与对照组（34．80±2．02）比较差异有统计学意义（t=31．127，P〈0．01），实验组收获的早期凋亡细胞数（26．08±2．09）与对照组（23．79±2．31）比较差异有统计学意义（t=5．683，P〈0．01），实验组收获的晚期凋亡细胞及死细胞数（13．63±0．68）与对照组（12．95±0．69）比较差异有统计学意义（t=5．384，P〈0．01）；实验组染色体核型与对照组一致，均未见染色体发生畸变。结论将原代培养至7天时置换出的旧培养基放置于4℃冰箱15天后，分离其内的M期细胞继续传代培养，仍能获得一定数量的可分析分裂相，且染色体未见畸变，诊断结果可靠，应用该方法可确保一次性穿刺即可确保羊水细胞培养成功并得出最终的产前诊断。

46例早期自然流产绒毛组织的改良培养及染色体核型分析

目的探讨改良的绒毛细胞培养方法在分析早期自然流产原因中的应用价值。方法应用长期培养法联合旧培养基内的活细胞（组织块）传代培养及4＂C保存旧培养基内种细胞的方法，对46例早期自然流产绒毛组织进行细胞培养、染色体制备及核型分析。结果46例自然流产绒毛细胞全部培养成功。共检出异常核型30例（65．2％），以非整倍体多见，共16例，占异常核型的53．3％[其中，常染色体三体8例，双重三体2例，性染色体单体（45，X）6例]，多倍体6例，嵌合体4例，结构异常4例；正常核型16例（34．8％），男、女性核型各8例。结论采用高效改良绒毛细胞培养法可显著提高绒毛细胞培养成功率。胚胎染色体异常是早期自然流产的主要原因，常规检查早期流产胚胎绒毛的染色体有利于查明流产原因，合理指导下次妊娠。

染色体异常核型两例

例1 女，5岁，生活不能自理，不会说话．2岁时学会走路。患儿为第3胎足月顺产，父母发现患儿6～7个月时反应迟缓。查体：智力低下，反应差，特殊面容，双手通贯掌，头颅磁共振成像示脑发育不良，脑电图正常。

46，XY，t（11；13）（q23;q34）一例

患者男，25岁。结婚4年，其妻子妊娠4次，第1次为计划外怀孕于停经50天行人工流产术，之后习惯性流产3次，