HIF-1α在肾缺血-再灌注损伤及高压氧、丹参酮Ⅱ_A治疗中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肾缺血-再灌注损伤及其治疗中的表达及意义。方法:选用Wistar大鼠84只,随机分为空白对照组、缺血组、缺血-再灌注组(1,3,5 h)、高压氧组(1,3,5 h)、丹参酮ⅡA组(1,3,5 h)及假手术组(1,3,5h)。空白对照组和缺血组及其余各组的每一时间点各6只。各组均先切除右肾,取左肾研究。取左肾部分皮髓质用4%的多聚甲醛固定并制作蜡块,行石蜡切片免疫组化检测各组肾HIF-1α蛋白的表达,另一部分提取总RNA,采用荧光定量PCR检测各组肾HIF-1αmRNA的表达。取肾后通过下腔静脉采血,检测MDA、TNF-α、Urea及Scr。结果:(1)Urea、HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达分别在假手术组5,3,1 h增高与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Urea、Scr、MDA、TNF-α在缺血-再灌注组(1,3,5 h)增高与空白对照组、缺血组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1αmRNA在缺血组呈高表达,缺血-再灌注组呈低表达,HIF-1α蛋白在缺血组和缺血-再灌注组均呈高表达。(3)经高压氧、丹参酮ⅡA治疗后,Urea、Scr、MDA、TNF-α降低,HIF-1αmRNA增高,与缺血-再灌注组比较,差异有统计学意义(P<0.05),HIF-1α蛋白的表达经丹参酮ⅡA治疗后降低,差异有统计学意义(P<0.05),而经高压氧治疗后变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)手术本身的创伤对BUN的含量和HIF-1α的表达有影响。(2)HIF-1α在肾缺血-再灌注损伤中其基因的表达水平与蛋白的表达水平不同步。肾缺血-再灌注后,MDA和TNF-α含量增高以及肾组织中HIF-1α蛋白的过度表达是加重肾功能损害的重要原因。(3)抑制再灌注后氧自由基和致炎因子的产生是丹参酮ⅡA和高压氧产生肾保护效应的共同通路。丹参酮ⅡA对肾组织中HIF-1α蛋白的表达具有明显的抑制作用,这可能是肾缺血-再灌注后丹参酮ⅡA产生肾保护效应的另一重要机制。而高压氧对肾组织中HIF-1α蛋白的表达无明显的抑制作用,表明再灌注后高压氧可能没有通过HIF-1α环节发挥肾保护作用。