LncRNA CBR3-AS1调节miR-448/TFAM轴对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)CBR3-AS1对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法 收集济南市第五人民医院2021年1月至2022年6月获取的40对CRC组织和邻近癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人CRC组织、癌旁组织和CRC细胞系、正常结直肠上皮细胞中LncRNA CBR3-AS1、微小RNA-448(miR-448)及线粒体转录因子A(TFAM)mRNA表达。根据不同CRC细胞系中LncRNA CBR3-AS1的表达水平筛选后续实验使用的细胞系。验证miR-448与LncRNA CBR3-AS1、TFAM的靶向关系。在目标细胞中转染靶向LncRNA CBR3-AS1的小干扰RNA(si-CBR3-AS1)、miR-448抑制物(miR-448 inhibitor),采用qRT-PCR、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LncRNA CBR3-AS1、miR-448及TFAM mRNA和蛋白表达;采用CCK-8法、流式细胞术、划痕愈合实验和Transwell实验分别检测细胞活力、凋亡率、迁移及侵袭能力。结果 CRC组织和细胞中LncRNA CBR3-AS1及TFAM mRNA呈高表达,miR-448呈低表达,且HCT116细胞中LncRNA CBR3-AS1的表达最高,故选择HCT116细胞进行后续靶向验证和转染实验。经验证,HCT116细胞中miR-448与LncRNA CBR3-AS1、TFAM均存在靶向关系。转染si-CBR3-AS1可降低HCT116细胞中LncRNA CBR3-AS1及TFAM mRNA和蛋白表达水平,同时降低细胞活力、划痕愈合率、迁移细胞数、侵袭细胞数,升高miR-448表达水平及凋亡率;转染si-CBR3-AS1基础上转染miR-448 inhibitor可减弱干扰LncRNA CBR3-AS1表达对HCT116细胞的影响。结论 干扰LncRNA CBR3-AS1可抑制CRC细胞的恶性生物学行为,其机制可能与靶向miR-448/TFAM轴有关。

槲皮素调控SOCS3/STAT3信号通路对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨槲皮素(Que)调控细胞因子信号转导抑制分子3(SOCS3)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞生物学行为的影响。方法:以TPC-1细胞为研究对象,设置分组为对照组、Que低(Que-L,25μmoL/L Que)、中(Que-M,50μmoL/L Que)、高浓度(Que-H,100μmoL/L Que)组、Que-H+shRNA NC组(先利用Lipofectamine2000转染试剂盒转染shRNA NC,再经100μmoL/L Que处理)、Que-H+SOCS3 shRNA组(先利用Lipofectamine2000转染试剂盒转染SOCS3 shRNA,再经100μmoL/L Que处理),流式细胞仪检测TPC-1细胞凋亡变化;CCK-8及Transwell实验检测TPC-1细胞增殖、迁移及侵袭变化;qRT-PCR检测TPC-1细胞SOCS3、STAT3 mRNA表达水平;Western blot检测TPC-1细胞中SOCS3、p-STAT3/STAT3、磷酸化非受体酪氨酸激酶Janus激酶2(p-JAK2)/JAK2表达水平。结果:与对照组相比,Que-L组、Que-M组、Que-H组TPC-1细胞凋亡率、SOCS3 mRNA及蛋白表达显著增加,增殖率、侵袭及迁移数、STAT3 mRNA、p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2表达显著下降(P<0.05);与Que-H+shRNA NC组相比,Que-H+SOCS3 shRNA组TPC-1细胞凋亡率、SOCS3 mRNA及蛋白表达显著降低,增殖率、侵袭及迁移数、STAT3 mRNA、p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2表达显著增加(P<0.05)。结论:Que通过激活SOCS3/STAT3信号通路可抑制PTC细胞系TPC-1细胞的恶性生物学行为。