钩藤碱固体脂质纳米粒对哮喘小鼠miR-155/p38MAPK轴的影响

目的观察钩藤碱固体脂质纳米粒(Rhy-SLN)对支气管哮喘模型小鼠微小RNA-155(miR-155)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)轴的影响。方法15只BALB/c小鼠随机均分为正常对照组、模型组和Rhy-SLN组。Rhy-SLN组小鼠行鼻内氢氧化铝致敏操作前以Rhy-SLN(50 mg/kg)灌胃;正常对照组和模型组给予等量生理盐水。干预结束后,肺泡灌洗液涂片观察嗜酸粒细胞的数量;HE染色观察小鼠肺组织病理改变情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素(IL)-13水平;羟脯氨酸测试盒检测小鼠肺组织中羟脯氨酸水平;Werstern blot检测小鼠肺组织(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达水平;荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测小鼠肺组织miR-155 m RNA表达水平。结果与模型组比较,Rhy-SLN组可以降低哮喘小鼠肺泡灌洗液中嗜酸粒细胞的数目、血清中IgE和肺泡灌洗液中IL-13的水平(P<0.05);减轻肺组织炎性细胞浸润;降低肺组织中α-SMA、collagenⅠ、羟脯氨酸和p-p38 MAPK的表达(P<0.05);上调小鼠肺组织中miR-155的表达水平(P<0.05)。结论Rhy-SLN可缓解小鼠哮喘,其机制可能与调节miR-155/p38 MAPK轴,降低气道的炎症反应有关。

黄精提取物对急性肝损伤小鼠的保护作用

目的研究黄精提取物对急性肝损伤小鼠的保护作用。方法采用四氯化碳致肝损伤模型,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,观察小鼠肝脏病理学变化。结果黄精提取物各剂量组小鼠ALT、AST活性均降低,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。黄精提取物高、中剂量组小鼠肝组织SOD活性升高,MDA活性降低,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄精提取物可以降低肝损伤小鼠ALT、AST及MDA活性,提高肝脏SOD活性,对急性肝损伤小鼠有一定的保护作用。

2012至2014年某三级综合医院住院患者多药耐药菌感染分析

目的分析某三级综合医院住院患者多药耐药菌的分布及耐药性,以指导临床合理用药。方法对2012年1月至2014年12月的临床标本按常规进行病原菌分离,采用VITEK-2全自动细菌鉴定与药敏分析仪对病原菌进行鉴定。结果共分离出病原菌7 579例,其中多药耐药菌共3 223株,其中ESBLsECO占40.83%,其次为MDR-PA占19.45%。多药耐药菌主要来源于痰液(2 056株,63.79%),其次是分泌物标本(1 414株12.85%)和尿液(369株,11.45%);痰液标本中检出最多的是MDR-AB(550株,26.75%),在尿液标本、血液、分泌物以及脓液标准中检出最多的均为ESBLs-ECO。多药耐药菌感染科室主要分布于各种类型ICU病房中(53.94%),其次为神经内科(14.96%)和呼吸内科(8.75%)。结论本院住院患者多药耐药菌感染分布较广,主要集中在各ICU,加强病原菌的耐药性监测,对指导临床合理使用抗菌药物及减缓多重耐药菌株形成具有重要意义。

钩藤碱固体脂质纳米粒对TGF-β1诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究钩藤碱固体脂质纳米粒对TGF-β1诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法 采用组织块培养法进行大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的原代培养，将细胞按随机数字表法分为对照组，TGF-β1组，TGF-β1＋钩藤碱固体脂质纳米粒高、中、低剂量组。除对照组外，其余各组细胞加入20 μg/L的TGF-β1进行干预，TGF-β1＋钩藤碱固体脂质纳米粒高、中、低剂量组细胞加入25、50、100 mg/L的钩藤碱固体脂质纳米粒进行干预。培养24 h后，采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率，采用流式细胞仪检测各组细胞周期，采用Western blot法检测各组细胞c-myc、c-Fos蛋白表达。结果 与TGF-β1组比较，TGF-β1＋钩藤碱固体脂质纳米粒高剂量组吸光度值[（0.457±0.046）比（0.975±0.049）]降低（P＜0.01）；TGF-β1＋钩藤碱固体脂质纳米粒高、中、低剂量组S期细胞[（15.87±2.47）、（15.23±1.69）、（17.02±2.87）比（38.58±2.68）]比例降低（P＜0.01），c-myc[（48.65±3.65）、（50.69±4.16）、（55.29±3.67）比（68.21±3.25）]、c-Fos[（38.78±4.25）、（43.56±3.69）、（46.58±3.57）比（66.54±4.09）]蛋白表达降低（P＜0.01）。结论 钩藤碱固体脂质纳米粒可抑制TGF-β1诱导的大鼠血管平滑肌细胞的增殖，其作用机制与阻滞血管平滑肌细胞G0/G1期向S期转化及下调c-myc、c-Fos蛋白表达有关。

牙疼舒滴丸的制备及含量测定

目的制备牙疼舒滴丸并建立其质量标准。方法采用滴制法制备牙疼舒滴丸，采用高效液相色谱法测定本制剂中欧前胡素含量。结果制得的滴丸大小均匀、圆整光滑、硬度适中；薄层色谱法可鉴别出欧前胡素的特征斑点；欧前胡素在0．50-520μg/ml范围内线性关系良好，r=0．9998，平均加样回收率范围为98．38％，RSD值为1．05％。结论该制备方法简单，滴丸成形性好，质量可控。

钩藤碱固体脂质纳米粒对小鼠气道平滑肌细胞增殖及TGF-β1/ERK/P38通路的影响

目的观察钩藤碱固体脂质纳米粒(rhynchophylline solid lipid nanoparticles, Rhy-SLN)对小鼠气道平滑肌细胞增殖及TGF-β1/ERK/P38信号通路的影响。方法小鼠气道平滑肌细胞体外分离培养,按随机数字表法分为空白组、TGF-β1组、Rhy-SLN组、抑制剂组。除空白组外,其余各组气道平滑肌细胞以0.2% BSA/DMEM无血清培养基培养,使细胞处于增殖停滞状态。TGF-β1组加入5 μg/L的TGF-β1进行干预;Rhy-SLN组加入5 μg/L的TGF-β1及10 μmol/L的Rhy-SLN进行干预;抑制剂组加入5 μg/L的TGF-β1及10 μmol/L SB431542进行干预。干预后24 h,采用MTT法检测小鼠气道平滑肌细胞增殖情况;采用Western blot法检测小鼠气道平滑肌细胞的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、ERK1/2、p-ERK1/2、p38、p-p38蛋白表达水平。结果与TGF-β1组比较,Rhy-SLN组和抑制剂组吸光度值[(1.352±0.14)、(1.139±0.12)比(1.780±0.18)]降低(P<0.05),PCNA蛋白[(0.25±0.03)、(0.24±0.02)比(0.49±0.05)]、p-ERK1/2[(1.01±0.11)、(0.97±0.09)比(1.86±0.17)]、p-p38蛋白[(0.26±0.03)、(0.22±0.02)比(0.41±0.04)]表达降低(P<0.05)。结论 Rhy-SLN可抑制小鼠气道平滑肌细胞增殖,其机制可能与调节TGF-β1/ERK1/2信号通路有关。

牙疼舒滴丸的抗炎镇痛实验研究

目的研究牙疼舒滴丸的抗炎镇痛作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足掌肿胀2种急性炎症模型及棉球致小鼠肉芽肿胀慢性炎症模型，观察牙疼舒滴丸的抗炎作用。采用热板法和醋酸扭体法致痛，观察牙疼舒滴丸的镇痛作用。结果与空白对照组比较，阳性对照组，牙疼舒滴丸中、高剂量组小鼠耳廓肿胀度[（2．56±1．35）mg、（4．26±1．21）mg、（3．23±1．25）mg比（8．25±1．21）mg]降低（P〈0．05）；给药后120min，与空白对照组比较，阳性对照组，牙疼舒滴丸中、高剂量组小鼠足掌肿胀度[（23．54±9．12）mg、（27．58±9．14）mg、（21．25±8．45）mg比（39．54±8．89）mg]、棉球致小鼠肉芽肿胀质量[（6．51±2．58）mg、（7．82±1．57）mg、（6．58±3．47）mg比（13．58±3．25）mg]下降（P〈0．05）；小鼠热板痛阈值[（20．86±2．58）s、（20．25±2．14）s、（20．75±1．78）s比（17．21±3.31）s]升高（P〈0．05）；扭体次数[（23．47±7．57）次、（28．65±6．54）次、（24．36±7．78）次比（40．96±6．58）次]减少（P〈0．05）。结论牙疼舒滴丸具有显著的抗炎镇痛作用。

钩藤总碱缓释滴丸的长期毒性实验研究

目的：探讨钩藤总碱（RTA）缓释滴丸的长期毒性。方法将80只Wister大鼠按体质量随机分为空白对照组、RTA缓释滴丸高、中、低剂量组，每组20只。每天观察大鼠的一般状态、每2周记录一次体质量、日食量。连续灌胃12周后和停药2周后分别检测大鼠白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、血小板（PLT）、淋巴细胞（LYM）、中性粒细胞（NEU）等血液学指标及谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）等生化指标，计算心、脑、肝、肾脏体比值，观察心、脑、肝、肾组织病理学改变。结果连续灌胃12周后， RTA 缓释滴丸高剂量组大鼠饮食减少，体质量增长缓慢；各组大鼠 WBC、RBC、Hb、PLT、LYM、NEU无明显变化；RTA缓释滴丸高剂量组大鼠的ALT、AST和ALP值升高[分别为（77.5±11.9）U/L、（210.4±21.7）U/L、（220.6±19.8）U/L]，与空白对照组[分别为（55.2±12.1）U/L、（180.4±21.3）U/L、（190.3±22.6）U/L]比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。RTA 缓释滴丸高剂量组大鼠肝脏的脏体比值（3.86±0.29）较空白对照组（3.52±0.25）升高（P＜0.05），肝脏部分出现变性、灶状坏死。结论 RTA缓释滴丸高剂量长期给药可产生肝毒性。

四叶参多糖对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用

目的 观察四叶参多糖对酒精致小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法 按随机数字表法将小鼠分为正常对照组,模型组,四叶参多糖高、中、低剂量组,每组10只.除正常对照组外,其余各组采用酒精灌胃法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型.造模第1天开始给药,四叶参多糖高、中、低剂量组分别灌胃0.8、0.4、0.2 g/kg四叶参多糖溶液,正常对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水.给药1次/d,连续10 d后,测定血清谷氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、三酰甘油（TG）水平,肝组织超氧化歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）水平,观察小鼠肝组织病理形态学变化.结果 与模型组比较,四叶参多糖高、中、低剂量组小鼠血清中ALT[（97.5±22.12）U/L、（108.8±22.15）U/L、（125.2±19.68）U/L比（152.3±17.32）U/L]、AST[（72.5±21.3）U/L、（89.2±17.47）U/L、（104.3±19.34）U/L比（1215±22.31）U/L]和 TG[（0.75±0.32）mmol/L、（0.80±0.22）mmol/L、（0.96±0.21）mmol/L 比（1.44± 0.23）mmol/L]水平降低（P〈0.05）;肝组织 SOD[（215.6 ± 22.68）U/mg、（203.2 ± 22.18）U/mg、（186.2 ± 18.34）U/mg比（164.3±17.54）U/mg]、GSH[（17.74±2.12）μmol/g、（14.84±1.12）μmol/g、（13.93±2.15）μmol/g比（12.23±2.09）μmol/g]水平升高（P〈0.05）,MDA[（6.22±2.12）nmol/mg、（6.22±2.12）nmol/mg、（8.36± 1.84）nmol/mg 比（9.35±1.68）nmol/mg]水平降低（P〈0.05）.结论 四叶参多糖可减少酒精致急性肝损伤小鼠氧化应激损伤,有较好的肝保护作用.

不同产地及不同采收期钩藤中异钩藤碱的含量分析

目的：研究不同产地及不同采收期钩藤中异钩藤碱的含量。方法应用HPLC测定8个不同产地及不同采收期钩藤中异钩藤碱含量，采用Waters Symmetry C18色谱柱（250 mm34.6 mm，5μm），流动相为甲醇-0.01 mol/L醋酸铵缓冲液（pH 8.0）（60∶40），柱温25℃，进样体积20μl，流速1.0 ml/min，检测波长246 nm。结果不同产地及不同采收期的钩藤中异钩藤碱含量不同，其中含量最高的地区为宁明县；含量最高的采收时间为每年9月至次年2月。结论不同产地钩藤药材异钩藤碱的含量不同，每年9月至次年2月采收的钩藤中异钩藤碱含量较高。

中药钩藤不同药用部位异钩藤碱含量分析

目的测定钩藤的不同药用部位中异钩藤碱的含量。方法应用高效液相色谱法（HPLC）测定8批不同产地钩藤的不同药用部位中异钩藤碱含量。采用Waters Symmetry C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-0．01mol／L醋酸铵缓冲液（pH8．0）（60：40），柱温25℃，进样量20μl，流速1．0ml／min，检测波长246nm。结果8批不同产地钩藤药材中均能检测出异钩藤碱，但产地间差异较大；不同药用部位中异钩藤碱的含量：主杆〉带钩茎枝〉无钩茎枝〉无茎枝钩〉叶。结论钩藤不同药用部位大部分含异钩藤碱成分，为扩展钩藤植物的药用部位提供试验依据。