山东省淡水鱼类资源现状研究

为进行环保部山东省生物多样性评价试点工作,对山东内陆水系的淡水鱼类资源进行了调查和采集,共采集到野生鱼类153种,分别隶属于15个目31个科,其中鲤形目2科79种,占51.6%,在山东淡水鱼资源中占优势。对所调查的120个县级单元内淡水鱼类分布的区域性进行了分析,提出了保护建议。

人工诱导雌核发育技术在淡水鱼类遗传育种研究中的应用

简述了人工诱导淡水鱼类雌核发育的原理、方法,阐述了目前淡水鱼类人工雌核发育在应用方面的进展以及存在的主要问题。

山东省克氏原螯虾3个地理群体遗传差异的RAPD分析

利用RAPD标记技术对山东省克氏原螯虾(Procambarus clarkii)3个地理群体(微山湖、东平湖、济南小清河)的遗传多样性进行了分析。结果表明:在优化的反应条件下,所用12个随机引物共扩增出118个位点,其中48个多态位点。遗传距离显示克氏原螯虾群体间有一定遗传分化,其中济南小清河群体和微山湖群体之间的遗传距离最大(0.3155),微山湖群体和东平湖群体之间的遗传距离最小(0.2027)。济南小清河群体内的遗传相似系数最高(0.9411),微山湖群体内的最低(0.9023)。UPGMA聚类结果显示,微山湖群体和东平湖群体聚为一支,济南小清河群体聚为另一支。

山东省3个克氏原螯虾地理群体线粒体CO Ⅰ基因的序列差异分析

利用PCR技术扩增山东境内的3个克氏原鳌虾地理群体(济南小清河、东平湖和微山湖)COⅠ基因片段,得到长度约为874bp的片段,分析比较了3群体87尾克氏原螯虾COⅠ基因序列的变异和遗传结构。结果显示,87条序列共检测到8个变异位点,存在6种单倍型。单倍型多样性(H)为0.174,核苷酸多样性(Pi)为0.0036,单倍型多样性(H)以东平湖群体最高(0.243),微山湖群体其次(0.204),小清河群体最低(0.000);3群体的核苷酸多样性(H)均较低(<0.001)。分子变异等级分析(AMOVA)表明,3群体间总的遗传分化指数(Fst)为0.023 85(P>0.05),群体间的遗传变异仅占总遗传变异的2.38%,而97.62%的遗传变异源于群体内,群体间遗传分化指数与遗传距离均较低。表明山东克氏原鳌虾野生群体的遗传多样性较低,具有较低的遗传分化水平。

淡水黑鲷染色体核型分析

以淡水黑鲷(Hephaestus fuliginosus)头肾组织为材料,采用腹腔注射植物血细胞凝集素(PHA)、秋水仙素和空气干燥法制备染色体标本,进行染色体核型分析。结果显示,淡水黑鲷染色体为48条,核型公式为2n=48=4m+44t,NF=52;未发现随体、次级缢痕及异形性染色体;其核型符合典型的高位类群鱼类核型特征。

淡水黑鲷5种同工酶的组织特异性研究

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对淡水黑鲷(Hephaestus fuliginosus)的6种组织(肝脏、心脏、脾脏、肾脏、肌肉和眼)的5种同工酶[酯酶(EST)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苹果酸脱氢酶(MDH)、乳酸脱氢酶(LDH)]进行了研究,并对其同工酶位点及酶谱进行了分析。结果表明,淡水黑鲷5种同工酶系统具有不同程度的组织特异性。EST检测到2个位点,每个位点都有2个等位基因。CAT检测到1个基因位点,存在2个等位基因。POD酶谱较复杂,有5个位点,Pod-2,3,4,5都检测到2个等位基因。MDH具有s-MDH和m-MDH两种类型,在各组织中均表达,s-MDH只形成一种二聚体,m-MDH仅在肝脏中有2条带,其余组织中为1条带。LDH在6种组织中都表达,而Ldh-5只在心脏中能检测到。

淡水鲨鱼形态性状与体质量关系的初步研究

选取1龄淡水鲨鱼(Pangasias sutchi Fowler)30尾,测量其体质量、全长、体长、体高、体宽、眼间距、头长、头高、头宽、吻长、尾柄长和尾柄高等12个形态性状,采用相关分析、通径分析和逐步回归分析的方法研究了各性状对体质量的影响效果。结果表明,(1)经相关分析,淡水鲨鱼各形态性状(除吻长)与体质量的相关系数均达到极显著水平;(2)经通径分析,保留了全长、头宽、体宽和尾柄高4个达到显著水平的形态变量,所得相关指数为:R2=0.939;(3)经逐步多元回归分析,建立最优回归方程为:Y=-458.204+0.997X1+6.610X8+2.506X4+2.825X11,式中X1、X8、X4、X11分别为全长(mm)、头宽(mm)、体宽(mm)和尾柄高(mm),为淡水鲨鱼的育种工作提供了重要的理论依据。

利用mtDNA COI基因序列分析引进的澳洲虫纹鳕鲈群体遗传多样性

根据线粒体COI基因序列分析了虫纹鳕鲈(Maccullochella peelii)引进群体的遗传多样性。用PCR技术扩增了线粒体COI的序列,PCR产物经纯化、克隆和测序后得到了652bp的核苷酸片段。运用CLUSTAL X(1.83)软件比对了25个个体的序列,共检测到5个多态位点,其中4个为转换位点,1个为颠换位点;运用MEGA5.0软件构建了NJ系统树;用DNASP软件计算出的单倍型个数(H)为5,单倍型多样性(Hd)为0.300,核苷酸多样性(Pi)和平均核苷酸差异数(k)为分别为0.00073和0.473。结果表明,引进群体的虫纹鳕鲈mtDNA COI基因序列的变异程度较小,群体内遗传多样性较低。

盐度对淡水鱼类繁殖·生长及代谢相关指标的影响

综述了水体盐度变化以及作用时间对淡水鱼类繁殖、生长以及代谢等方面相关指标的影响,以期为半咸水地区淡水鱼养殖提供理论依据。

黄河口中华绒螯蟹成蟹形态性状与体质量的相关性及通径分析

为确定影响黄河口地区养殖中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)成蟹体质量的重要形态性状,为品种选育提供参考,测定随机采集的247只黄河口中华绒螯蟹成蟹的头胸甲长(X1)、头胸甲宽(X2)、体高(X3)、第三步足长节长(X4)和体质量(Y),通过相关分析、多元回归分析及通径分析建立其形态性状与体质量间的多元线性回归方程。研究显示各形态性状与体质量的相关程度均达到极显著水平(P<0.01)。通过回归分析,剔除偏回归系数不显著的性状,排除共线性自变量,建立了最优多元线性回归方程Y=-328.06+5.43X2+2.43X4。拟合度检验表明达到极显著水平(P<0.01)。通径分析结果显示,头胸甲宽对体质量的直接影响最大,直接作用大于间接作用,表明头胸甲宽是影响黄河口中华绒螯蟹成蟹体质量的主要性状。在对黄河口中华绒螯蟹成蟹以体质量为目标性状进行选育时,可以头胸甲宽(X2)为主要间接选择指标,第三步足长节长(X4)为辅进行选育。

4种常用水产药物对大鳞鲃的急性毒性试验

在水温(24.1±1.5)℃、pH 8.41±0.12、溶解氧(6.1±0.9)g/L条件下,采用静态试验法研究阿维菌素、聚维酮碘、三氯异氰尿酸和敌百虫4种渔药对体质量(63.4±19.3)g大鳞鲃的急性毒性。试验结果显示,4种药物中敌百虫的96h半致死质量浓度最低(0.709mg/L),阿维菌素(1.000mg/L)和三氯异氰尿酸(3.548mg/L)次之,聚维酮碘最高(50.106mg/L),即毒性大小为敌百虫>阿维菌素>三氯异氰尿酸>聚维酮碘。敌百虫、阿维菌素、三氯异氰尿酸和聚维酮碘的安全质量浓度分别为0.253、0.616、0.798mg/L和13.397mg/L。试验结果表明,三氯异氰尿酸安全质量浓度略低于常规用量,在生产中应谨慎使用;阿维菌素、敌百虫和聚维酮碘安全质量浓度均高于常规用量,可安全使用。

雌核发育草鱼群体及两个普通草鱼群体的微卫星遗传分析

以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)养殖群体(YZ)为母本,以紫外线灭活的鲤鱼精子激活草鱼卵子,冷休克抑制第二极体排出的方法诱导获得异精雌核发育草鱼群体(CH)。利用12对微卫星引物对YZ群体、YS (扬州广陵长江系家鱼原种场引进草鱼群体)群体、CH群体进行PCR扩增并分析,共检测出194个等位基因,其中75.8个有效等位基因。YZ群体、YS群体、CH群体的平均等位基因数依次为13.0、12.6、4.7;平均有效等位基因数依次是7.7、6.6、2.3;平均期望杂合度依次为0.87、0.82、0.56;平均多态信息含量依次为0.84、0.79、0.49。从每个个体在微卫星位点的纯合率看,YZ群体中个体的纯合度在0.00～0.33, YS群体r中个体的纯合度在0.00～0.42, CH群体中个体的纯合度在0.42～0.92。这表明与YZ群体和YS群体相比,CH群体的遗传多样性显著下降,并且在每个位点的纯合率CH群体均高于普通草鱼群体,表明人工诱导减数雌核发育可加速草鱼大多数基因位点的纯合,是快速建立高纯品系的有效手段。同时,本研究筛选并利用微卫星位点组合建立了雌核发育草鱼子代不同家系及其母本亲缘关系的简易、高效鉴别技术,旨在为雌核发育草鱼标记辅助育种打下基础。

4种水产药物对大口黑鲈鱼苗的急性毒性研究

采用半静水式试验方法,在水温(24.1±1.5)℃、pH(8.41±0.12)、溶氧(6.1±0.9)mg/L条件下,研究了车轮斜管净、二氧化氯、硫醚沙星和复合碘4种水产药物对大口黑鲈(Micropterus salmoides)鱼苗的急性毒性。结果显示,4种药物中车轮斜管净的96h半致死浓度最低,为2.24mg/L;二氧化氯的96h半致死浓度最高,为15.84mg/L;4种药物毒性大小表现为二氧化氯>复合碘>硫醚沙星>车轮斜管净;4种药物的安全浓度大小表现为复合碘(4.65mg/L)>二氧化氯(3.36mg/L)>硫醚沙星(2.13mg/L)>车轮斜管净(0.56mg/L)。研究结果表明,车轮斜管净、二氧化氯、硫醚沙星和复合碘4种水产药物的安全浓度均高于常规用量,按照常规用量进行病害防治是安全的。

泰山螭霖鱼线粒体COⅠ基因序列的遗传多样性分析

[目的]通过克隆泰山螭霖鱼的COⅠ基因序列,研究其与鲤科几属鱼类的进化关系,确定泰山螭霖鱼的分类地位。[方法]以泰山螭霖鱼30个个体为材料,对其线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)的部分序列进行PCR扩增和序列对比,检测泰山螭霖鱼的遗传多样性;计算泰山螭霖鱼不同单倍型与Gen Bank中鲤科5个属鱼类的遗传距离,采用聚类分析方法,构建NJ和UPGMA系统进化树。[结果]30个个体泰山螭霖鱼线粒体COⅠ基因片段长度约1 600 bp,无碱基的插入和缺失,纯化并去除引物序列后获得约1 493 bp的核苷酸序列,存在6种单倍型,共检测到6个多态位点,包括4个转化、2个颠换,其单倍型多样性(Hd)为0.460,核苷酸多样性(Pi)为0.000 78,平均核苷酸差异数(K)1.163。遗传距离和NJ和UPGMA系统进化树表明,泰山螭霖鱼与多鳞白甲鱼的COⅠ序列一致,泰山螭霖鱼所在的突吻鱼属与光唇鱼属的亲缘关系最近,与金线鲃属、倒刺鲃属、华鲮属的亲缘关系较远。[结论]该研究为其种质资源的管理与保护及遗传育种提供分子生物学依据。

南四湖夏秋季鱼类群落结构特征研究

2020年7月和11月,在淮河流域的南四湖即南阳湖、独山湖、昭阳湖和微山湖(34°60'~35°14'N,116°68'~117°23'E)的上级湖(鲁桥)、湖中(二级坝)和下级湖(韩庄)设置3个采样点,用多网目复合刺网、地笼网、网箔、拦网采集鱼类样本,并定期走访采样点附近的渔船码头、跟随采样点附近的捕捞渔船等现场补充调查,分析和研究该水域鱼类群落的种类组成、生物量、优势种以及生物多样性,为填补南四湖鱼类研究的空白,完善南四湖生态保护内容和渔业持续发展提供基础数据。结果表明,夏秋季该水域共发现鱼类45种,隶属于7目14科34属,包括鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、鳙(Aristichthys nobilis)、鲫(Carassius auratus)、鲤(Cyprinus carpio)、刀鲚(Coilia nasus)、翘嘴鲌(Culter alburnus)等主要经济种类,鲫为绝对优势种,其他优势种类因网具选择性而差异较大。二级坝附近水域多样性指数最高,鲁桥次之,韩庄最低。区域因子多重比较结果显示,二级坝湖区多样性指数显著高于其他湖区(P<0.05)。各网具渔获物总量看,二级坝与其他2个湖区差异显著(P<0.05);韩庄和鲁桥差异不显著(P>0.05)。7月CPUE高于11月,差异不显著(P>0.05)。根据主要物种的生物量聚类,南四湖鱼类群落可划分为2组,A组群(二级坝调查点)、B组群(鲁桥、韩庄调查点),这二个组群的平均相似率较高,达77.13%,刀鲚的差异贡献率较高。

酸水解法快速测定肉和肉制品中脂肪

建立酸水解法快速测定富含结合态脂肪的肉及肉制品中脂肪含量的方法。样品与盐酸一同在75℃水浴中加热进行水解,结合或包藏在组织里的脂肪可游离出来,然后用乙醚和石油醚提取3次,除去溶剂即得样品中总脂肪含量。该方法测定结果同食品安全国家标准GB5009.6—2016规定方法相比无显著差异,测定结果的相对标准偏差为0.38%(n=20),测定时间由食品安全国家标准GB5009.6—2016方法的13h缩短至4h,且不需要专门的索氏抽提仪器。该方法适用于肉及肉制品中脂肪的批量测定。

2种养殖模式下植物浮床对养殖水体的净化效果

在主养草鱼(Ctenopharyngodon idella),套养少量鲤鱼(Cyprinu carpio)、鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)和鳙鱼(Aristichthys nobilis)的池塘(面积0.67 hm^(2))以及主养加州鲈(Micropterus salmoides)、套养少量鲢鱼和鳙鱼的相同面积池塘中,分别设置4.0 m×4.0 m×2.5 m的聚乙烯编织布围隔,围隔内设置水葫芦(Eichhornia crassipes)浮床(SH)和空心菜(Ipomoea aquatica Forsk)浮床(KC)及对照(T),研究水葫芦和空心菜对主养草鱼和加州鲈池塘水体的净化效果。结果发现:水葫芦和空心菜对不同渔业模式养殖水体均有较好的净化作用。草鱼池塘中植物浮床对氨氮、亚硝态氮和总氮(TN)的最大去除率平均值分别为75.00%、47.93%和38.34%,但对总磷(TP)无去除效果。加州鲈池塘中植物浮床对氨氮、亚硝态氮和TN的最大去除率平均值分别为95.73%、80.00%和21.74%。不同植物对不同渔业模式下的水质净化效果存在一定差异。草鱼池塘中水葫芦对氨氮的去除效果比空心菜更好,而对TN的去除效果较差。加州鲈池塘中水葫芦对亚硝态氮和TN的去除效果较空心菜更差。不同养殖模式下的水质状况及其变化趋势不同,而不同水生植物的生长特点及人为管护措施均可能影响水质净化效果,故应依据养殖生产需求选择适宜的水生植物种类及管护措施。

澳洲长鳍鳗各形态性状对体重的影响效果分析

随机选取澳洲长鳍鳗(Anguilla reinhardtii)1龄鱼50尾,分别测量全长、体长、背鳍长、臀鳍长、体高、头长、吻长、眼径、眼间距、口裂宽和体重共11个形态学指标。采用多元分析的方法,计算了以形态性状为自变量,体重为依变量的相关系数、通径系数、决定系数及相关指数。结果表明,除眼径和头长以外其他各形态性状与体重的相关性均达到了极显著(P<0.01)水平。剔除了通径系数未达到显著水平的变量,保留了全长、体高和口裂宽3个变量,其中全长对体重的直接影响最大(P1=0.398)。所选性状与体重的相关指数R2=0.965,说明所选性状是影响体重的主要形态性状。采用逐步多元回归方程法建立了回归方程为:Y=-1412.565+1.923X1+13.000X5+15.767X10。式中,X1、X5、X10分别为全长(mm)、体高(mm)和口裂宽(mm),为澳洲长鳍鳗育种提供了理论依据。

一个奥利亚罗非鱼雌性特异性SCAR标记的建立

以奥利亚罗非鱼Oreochromis aureus为实验材料,通过对800多条随机引物的筛选,获得了1个奥利亚罗非鱼雌性特异性的、长度为1 488 bp的RAPD标记片段RAPD71699-1488,经琼脂糖凝胶电泳后回收、克隆、测序,并根据测序结果设计PCR特异引物,再经PCR条件优化,成功地将该RAPD标记片段转化为实验结果稳定、操作简便的SCAR标记,即SCAROaF1488。采用双重PCR技术,以mtDNA 16S rRNA基因片段为PCR扩增阳性对照,对该标记的有效性在两个群体共200个个体(雌、雄各100个)中进行验证。结果显示,标记检测结果与表型性别的符合度为100%。SCA-ROaF1 488标记的获得为奥利亚罗非鱼遗传性别鉴定及标记辅助选择提供了有效工具,为深入研究鱼类性别相关基因及性别决定机制提供了重要线索和新的思路。

虫纹鳕鲈的生物学特性及人工养殖技术研究

虫纹鳕鲈(Maccullochella peelii peelii)是原产于澳大利亚墨累河流域的一种著名经济鱼类,是澳大利亚乃至世界上最大类型的淡水鱼类之一。对虫纹鳕鲈的生物学特性、人工养殖技术、经济价值和养殖前景进行了介绍。