人脐带间充质干细胞不同培养方案的比较与优化

目的:目前人脐带间充质干细胞已广泛的应用于各种基础研究以及治疗疾病的临床实验,但目前各个实验室所选取的培养方案各异,培养效果并不稳定。本实验旨在选择一种稳定可靠的人脐带间充质干细胞培养方案。方法:从脐带中分离间充质干细胞,采用组织贴壁法将其培养于8组不同配方的培养基中,通过比较间充质干细胞从组织中游出的时间,生长状态,细胞数量,表面抗原的表达等,选出较优的人脐带间充质干细胞培养方案。结果:从细胞生长状态比较,达优MSC基础培养基-血清替代物组(F组)、X-VIVO^(TM)15-胎牛血清组(B组)、X-VIVOT M15-胎牛血清+血清替代物组(C组)、迈键医药的干细胞无血清基础培养基-无血清替代物组(G组)所培养的间充质干细胞从脐带游出时间较早且细胞融合率达到80%~90%时间较其他组短;达优MSC基础培养基-血清替代物组人脐带间充质干细胞生长增殖最快(P<0.05)。选取生长较快的B、C、F、G组进行免疫表型分析,发现达优MSC基础培养基-血清替代物组(F组)所培养的间充质干细胞表面抗原CD73,CD90表达均在90%以上,而其他组CD90和CD73的表达都在90%以下(P<0.05),各组造血细胞表面抗原CD34,CD45表达均呈低表达。结论:达优MSC基础培养基-血清替代物组为较优的人脐带间充质干细胞培养方案。