胡椒碱抑制脂多糖活化的结肠腺癌细胞炎症因子IL-8的表达

目的探讨胡椒碱抑制脂多糖(LPS)活化的结肠腺癌细胞炎症因子IL-8的表达及作用机制。方法胡椒碱对结肠腺癌细胞增殖作用的检测方法为WST-1法,采用流式微球捕获蛋白定量技术检测炎症因子(IL-8、IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α和IL-12p70)蛋白水平的表达,采用实时定量PCR法检测IL-8mRNA的表达,采用Western blot法检测JNK和p38MAPK信号通路的活化水平。结果胡椒碱处理可剂量依赖性地抑制结肠腺癌细胞的增殖,且胡椒碱对结肠腺癌细胞的毒性相对较小;胡椒碱干预能够有效地抑制LPS活化的结肠腺癌细胞IL-8的分泌,且具有剂量依赖性;单纯胡椒碱处理后IL-8mRNA表达水平非常低,而经过LPS处理后,IL-8mRNA的表达水平显著提高,LPS干预后再经过胡椒碱处理结肠腺癌细胞IL-8mRNA的表达水平又降低,表明胡椒碱对LPS活化的结肠腺癌细胞IL-8蛋白的表达是在转录水平控制的;LPS干预结肠腺癌细胞能有效地激活p38和JNK信号通路,且随着时间的延长,p-p38及p-JNK逐渐增高,具有时间依赖性,而LPS干预后经过胡椒碱处理,15min后p38及JNK的磷酸化水平明显受到抑制,与单纯LPS干预组相比差异有统计学意义(P<0.05),随着时间的推移,30min时,p38和JNK的磷酸化抑制作用仍较显著(均P<0.05),而到60min时,p38和JNK的磷酸化抑制作用已经明显减弱(均P>0.05),说明胡椒碱对p38和JNK的磷酸化具有明显的抑制作用。结论胡椒碱可能从转录水平上抑制LPS诱导的结肠腺癌细胞分泌促炎因子IL-8,即通过下调p38 MAPK和JNK信号通路上p38和JNK的磷酸化进一步降低IL-8的分泌,具体机制还有待于进一步阐明。

细胞核内β-连环素表达水平在胃癌中的临床研究

目的：探讨细胞核内β-连环素表达水平与胃癌临床病理因素的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测77例胃癌组织及30例癌旁组织细胞核中β-连环素表达水平，分析其与肿瘤组织浸润深度、淋巴结转移、组织分化程度、临床分期的关系。以无病生存时间（DFS）和总生存时间（OS）为评价指标，探讨β-连环素与胃癌患者预后的关系；ROC曲线衡量β-连环素在评估胃癌患者预后中的价值。结果：胃癌肿瘤组织细胞核内β-连环素的表达水平与年龄、性别无关（P＞0.05），与肿瘤的浸润深度、淋巴结的转移、TNM分期以及肿瘤的分化程度有关。Kaplan-Meier生存曲线显示：肿瘤组织细胞核内β-连环素阴性表达者DFS（26月）和OS（38月）优于阳性表达者DFS（18月）和OS（24月）（P＜0.05）；COX多因素分析：细胞核内β-连环素的表达可以作为胃癌患者OS独立预后因素（HR=0.87，95％CI：0.54~2.34，P=0.03）；ROC曲线显示，β-连环素在评估胃癌患者预后中具有中等价值（曲线下面积为0.82）。结论：胃癌组织细胞核内β-连环素表达水平与胃癌的TNM分期、淋巴结转移、浸润深度呈正相关性，与肿瘤的分化程度呈负相关性，可能是胃癌患者预后较差的标志物。