基于模拟实验建立改进的乙酰氯甲醇法测定特殊医学用途婴儿配方食品中的脂肪酸

针对氨基酸和乳蛋白深度水解特殊医学用途婴儿配方食品,建立改进的乙酰氯甲醇法,实现特殊医学用途婴儿配方食品中亚油酸、α-亚麻酸、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和二十碳四烯酸(arachidonic acid,ARA)的快速、准确测定。结果表明,加入6 mL反应试剂、反应时间为60 min、萃取剂异辛烷为最优的前处理条件,亚油酸和α-亚麻酸的检测线性范围分别为0.8~8.0、0.2~2.0 mg/mL,DHA和ARA的检测线性范围均为0.02~0.40mg/mL,决定系数均≥0.9997,方法的检出限为2 mg/100 g,定量限为5 mg/100 g。方法的重复性好(相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)≤3.3%)、精密度高(RSD≤3.8%)、稳定性好(RSD≤2.6%)、加标回收结果准确可靠(平均回收率93.1%~101.7%)。该方法有效解决了乙酰氯甲醇法在测定氨基酸和乳蛋白深度水解特殊医学用途婴儿配方食品时样品结块反应不彻底的问题,与传统方法相比,工作效率至少提高了100%。

微生物法检测特殊医学用途婴儿配方食品中叶酸含量的研究

[目的]分析和探讨微生物方法在特殊医学用途婴儿配方食品中叶酸含量测定中的应用。[方法]利用微生物法对5类不同基质特殊医学用途婴儿配方食品中叶酸含量及回收率进行检测,分析其精密度和准确度。[结果]5类不同基质特殊医学用途婴儿配方食品中叶酸含量检测较稳定,加标回收率90.0%~108.8%,相对标准偏差1.05%~2.40%。[结论]微生物法检测特殊医学用途婴儿配方食品中叶酸含量具有较高的准确度,在符合国标的前提下,验证了标准的合理性,为我国特殊医学用途婴儿配方食品中叶酸含量测定提供科学参考。

UPLC-MS/MS测定特殊医学用途配方乳粉中姜黄素类化合物

建立基于通过式固相萃取净化检测特殊医学用途配方乳粉中姜黄素的超高效液相色谱串联质谱检测方法。样品经80%乙腈提取,通过Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化后,以乙腈-0.1%甲酸溶液作为流动相,在acquity UPLC HSS T_(3)色谱柱上进行梯度洗脱,经超高效液相色谱仪进行分离后,通过电喷雾正离子模式电离,多反应监测模式进行检测分析,外标法定量。对目标物进行稳定性研究,对样品中目标物提取、净化方式、色谱分离条件、质谱条件等关键因素进行了优化。结果表明,3种姜黄素类化合物在25~2 500 ng/mL范围内线性关系好,相关系数高于0.99,加标回收率在87.9%~102.8%之间,精密度在1.31%~4.94%之间,3种姜黄素类化合物的检出限为10μg/kg,定量限为25μg/kg。该方法定性定量结果准确、稳定性好、灵敏度高,能够对特殊医学用途配方乳粉中姜黄素类化合物进行定性分析与定量检测。

超高效液相色谱法检测特殊医学用途配方食品中22种游离氨基酸

本文建立了特殊医学用途配方食品中22种游离氨基酸的超高效液相色谱检测方法。样品中氨基酸用磺基水杨酸提取,以2,4二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生试剂,以乙腈水-甲酸铵为流动相梯度洗脱,HSS T3色谱柱高效分离,超高效液相-二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果显示,22种氨基酸在2~100μg/mL范围内线性关系良好(R2>0.99)。方法检出限(S/N≥3)为10 mg/100 g,定量限(S/N≥10)为25 mg/100 g,低、中、高三个加标水平的回收率在90.1%~109.1%,相对标准偏差为0.8%~6.9%。方法简单高效、准确度高、重复性好,适用于特殊医学用途配方食品中22种游离氨基酸的定性、定量分析,为保障特殊医学用途配方食品的质量安全提供技术支持。

国内外特殊医学用途配方食品标准概况及技术指标比对

特殊医学用途配方食品在我国起步较晚,我国标准制定过程中参考和借鉴了CAC、欧盟、美国等国家和组织的相关规定。目前,我国对特殊医学用途配方食品实行注册管理,产品准入门槛相对较高。本文将相关组织和国家标准中的规定进行汇总整理,同时将标准中的技术指标与我国标准进行了比对分析,比对结果显示,我国基本上建立了与国际接轨的标准体系。

氨基酸配方及蛋白质水解配方特殊医学用途婴儿配方食品中氯测定方法的比较研究

以氨基酸和乳蛋白水解配方产品为样本,对我国标准和AOAC标准中的测定方法进行比较。经验证,电位滴定法测定结果的准确度好,精密度高,测定结果(n=6)的相对标准偏差分布在0.9%~2.7%之间;加标回收实验回收率分布在98.9%~101.6%之间,相对标准偏差RSD分布在1.2%~2.4%之间,电位滴定法能够满足产品质量控制的要求。

UPLC-MS/MS测定特殊医学用途配方乳粉中氯酸盐和高氯酸盐

建立一种特殊医学用途配方乳粉中氯酸盐和高氯酸盐测定的超高效液相色谱-串联质谱法。样品用0.1%(体积比)甲酸水-乙腈提取,经Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,复合离子交换色谱柱分离后,以乙腈-20 mmol/L甲酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,多反应模式检测,同位素内标法定量。结果显示,氯酸盐和高氯酸盐在1~200 ng/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.999,检出限为3.75μg/kg,定量限为7.5μg/kg。氯酸盐和高氯酸盐在7.5、50、500、1500μg/kg 4个加标水平回收率为97.1%~104.8%之间,相对标准偏差为2.55%~6.05%(n=6)。该方法简单快速、定量准确,能用于特殊医学配方乳粉中氯酸盐和高氯酸盐含量的测定。

超高效液相色谱法测定特殊医学用途婴儿配方食品中的19种游离氨基酸和牛磺酸

建立超高效液相色谱法同时测定特殊医学用途婴儿配方食品中19种游离氨基酸和牛磺酸的分析方法。样品经α-淀粉酶酶解,调pH值沉淀蛋白等杂质净化,采用6-氨基喹啉基-N-羟基-琥珀酰亚氨基甲酸酯为柱前衍生试剂,以甲酸-甲酸铵缓冲液(20 mmol/L,pH 2.25)为流动相A、甲酸-甲酸铵缓冲液(20 mmol/L,pH 3.00)为流动相B和乙腈为流动相C进行梯度洗脱,经AccQ-Tag Ultra C;色谱柱分离后,二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果表明,胱氨酸浓度在5~125μmol/L之间,其余18种氨基酸和牛磺酸浓度在10~250μmol/L范围内线性良好,相关系数均大于0.999;检出限胱氨酸为1.5μmol/L,其他分析物均为3μmol/L,定量限胱氨酸为5μmol/L,其他分析物为10μmol/L。方法测定的平均回收率为90.16%~109.84%,相对标准偏差均不大于4.77%。该方法操作简单、结果准确、重复性好,可以满足特殊医学用途婴儿配方食品中19种游离氨基酸和牛磺酸的测定,可为企业质量控制和政府监管提供有力的技术支撑。

特殊医学用途配方食品渗透压的不同检测方法和结果比较分析

研究了不同仪器、不同检测方法检测特殊医学用途配方食品的渗透压的检测结果差异情况和现阶段国内外各类特殊医学用途配方食品渗透压状况。收集国内外各类特殊医学用途配方食品样品38个,采用德国GONOTEC3000-D渗透压仪进行检测,同时选择部分代表性样品使用其他冰点法仪器和露点法仪器进行仪器比对和方法比对。冰点法检测的38个样品的渗透压检测结果范围为89m Osmol/kg^869m Osmol/kg,相对标准偏差为0.25%~0.97%;进行比对的样品中,冰点法检测结果平均值的范围为168m Osmol/kg^640 mOsmol/kg,相对标准偏差为0.18%~1.70%;露点法检测结果平均值的范围为162 mOsmol/kg^594 mOsmol/kg,相对标准偏差为0.61%~4.81%。渗透压较高的样品以氨基酸配方和全营养配方为主,专门用于婴儿的配方样品渗透压检测结果较低;露点法的检测结果低于冰点法,检测结果的稳定性和重复性不及冰点法。检测过程中保持环境温湿度和仪器的稳定性,使用合理的进样量能够减小检测误差。

特殊医学用途婴儿配方食品中生物素含量的测定

本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定特殊医学用途婴儿配方食品中生物素含量的分析方法。样品经0.2 mol/L磷酸121℃水解30 min提取,并通过生物素免疫亲和柱净化后,采用Acquity UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱进行分离,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,经电喷雾电离串联质谱在多离子反应监测(MRM)模式下进行测定,内标法定量。在最优化条件下,生物素在0.50~50.00 ng/mL范围内线性关系良好(R^(2)=0.9986),方法检出限为0.75μg/100 g。特殊医学用途婴儿配方食品中生物素相对标准偏差在0.42%~4.77%之间,不同添加浓度回收率为97.27%~102.06%。该方法具有样品处理操作简单,灵敏度高,分析周期短等优点,可以满足特殊医学用途婴儿配方食品中生物素含量的测定,可为企业质量控制和政府监管提供有力的技术支撑。

分子荧光光谱法检测氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中的维生素C含量

目的优化前处理方法提取氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中的维生素C,并采用分子荧光光谱法进行测定。方法通过氧化后的维生素C与邻苯二胺反应生成荧光物质,利用分子荧光光谱进行外标法定量,考察了含有不同乙醇浓度的偏磷酸-乙酸溶液A前处理方法的方法学参数,同时在不同基质的样品中对确定的最佳前处理方法进行了实验验证。结果采用50%乙醇-偏磷酸-乙酸溶液A提取的前处理方法能够有效沉淀氨基酸和多肽,所得处理液易于过滤且滤液澄清。样品在10 mg/100 g、50 mg/100 g和100mg/100g添加水平的加标回收率为90.7%~96.8%,相对标准偏差为2.73%~3.66%。结论 50%乙醇-偏磷酸-乙酸溶液A的前处理方法快速、准确、灵敏,适用于批量测定氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中维生素C。

特殊医学用途配方食品和婴幼儿配方乳粉中氟含量测定方法的改进

目的对国标方法测定特殊医学用途配方食品和婴幼儿配方乳粉类产品中氟含量测定进行改进。方法样品经Taka淀粉酶酶解,高氯酸溶液沉淀蛋白质,加入总离子强度缓冲剂消除金属干扰离子,过滤后,使用氟离子选择电极测定样品中氟含量。结果与国标法相比,改进方法使测试溶液澄清,电极响应更快,回收率范围为92.8%~107.5%,相对标准偏差为3.36%~4.38%,能满足方法准确度和精密度要求。结论改进后的方法能够满足方法学要求,能够准确地检测特殊医学用途配方食品和婴幼儿配方乳粉类产品中的氟含量。

分光光度法检测特殊医学用途婴儿配方乳粉中左旋肉碱

优化前处理方法来提取氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中的左旋肉碱,并采用分光光度法进行测定。左旋肉碱与乙酰辅酶A生成游离的辅酶A,游离的辅酶A和2-硝基苯甲酸反应生成黄色物质,利用分光光度法进行外标法定量。考察了酶水解前处理方法的方法学参数,同时在不同基质的样品中对确定的最佳前处理方法进行了实验验证。采用酶水解所得处理液易于过滤且滤液澄清。一种特殊医学用途氨基酸配方食品样品在5 mg/100 g、15 mg/100 g和50 mg/100 g添加水平的加标回收率为96.1%~108.5%,相对标准偏差RSD为3.18%~3.85%。酶水解前处理方法快速、准确、灵敏,适用于批量测定氨基酸配方和蛋白质水解配方特殊医学用途配方食品中左旋肉碱。

食品过敏原检测技术研究进展

目前食物过敏在人群中的収生率呈明显上升趋势,食物过敏已成为突出的食品安全问题。食物过敏事敀最有敁的预防方式是过敏者避克食用过敏食物,因此检测不同食物中是否含有过敏原其有十分重要的意义。本文比较了食品法具委员会、澳大利亚、加拿大、中国、欧盟、日本、南非、美国对食品过敏原标识管理的情况,综述了基于蛋白水平的酶联克疫(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)法、克疫层析技术和基于核酸水平的实时荧光定量PCR技术、环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测食物过敏原的方法,探讨了质谱法以及生物芯片、生物传感器等兵他新关检测技术在过敏原检测领域的应用,有利于加强食品质量监管的力度,确保食品安全。

酸水解-酶水解-UPLC-MS/MS测定特殊医学用途配方食品中多种氨基酸和牛磺酸

利用酸水解与酶水解互补,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),建立了特殊医学用途配方食品中22种氨基酸和牛磺酸的检测方法。样品经酸水解或酶水解提取,采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺-氨基甲酸酯(AQC)衍生后,以乙腈-甲酸铵(10 mmol/L)为流动相梯度洗脱,通过AccQTag Ultra C18色谱柱进行分离,三重四极杆质谱电喷雾多反应监测模式检测,内标法定量。结果表明:22种氨基酸和牛磺酸线性关系良好,相关系数均大于0.9956;检出限在0.0028~0.0225 g/100 g之间,定量限在0.0094~0.0751 g/100 g之间。22种氨基酸和牛磺酸的平均加标回收率在90.1%~104.7%之间,相对标准偏差在1.1%~4.3%之间。该方法实现了GB 29922-2013和GB 25596-2010中规定的22种不同性质氨基酸以及牛磺酸成分的水解提取与准确测定,适用于特殊医学用途配方食品中氨基酸和牛磺酸的准确定性、定量分析。

液相色谱内标法测定婴幼儿配方食品中色氨酸含量

以α-甲基-色氨酸为内标物,建立了碱水解-高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉及特殊医学用途婴儿配方食品中色氨酸含量的方法。样品经碱溶液水解,C 18柱分离,荧光检测器检测;再通过内标法定量,校正水解过程色氨酸的损失,降低基质之间的差异,提高定量结果的准确性;对不同种类的婴幼儿配方食品进行加标回收实验,样品的回收率为92.5%~97.4%,相对标准偏差<3.11%,实验室间偏差<6.7%。方法操作简单、准确度高,重复性好,适用于婴幼儿配方乳粉及特殊医学用途婴儿配方食品中色氨酸的准确定性定量。

特殊食品渗透压及常用渗透压仪的比较

随着越来越多的特殊食品进入大众的视野,无论从市场监管角度还是饮食安全角度,食品渗透压的检测和控制都具有重要的意义。但目前国内外学者对特殊食品中渗透压的研究关注度较低,我国尚未完善特殊食品中渗透压相关标准的制定。渗透压仪分为冰点渗透压仪和露点渗透压仪,调研显示现有的仪器完全能满足婴幼儿配方食品渗透压的测定,但是对于基质复杂、样品状态多变的特殊医学用途配方食品可能需要更多的开发研究。本文阐述了渗透压对特殊食品的意义及婴幼儿配方食品和特殊医学用途配方食品渗透压的研究现状,并针对适用于市场上现有的特殊食品测定的渗透压仪进行介绍和比较分析,以期为现行标准的完善、渗透压仪的选择和特殊食品的市场监管提供参考依据。

婴幼儿配方乳粉中氯丙醇酯含量测定方法的研究

建立气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定婴幼儿配方乳粉中3-氯-1,2-丙二醇酯(3-MCPDE)和2-氯-1,3-丙二醇酯(2-MCPDE)的分析方法。样品中加入氘代同位素内标,经乙酸乙酯提取、甲醇钠-甲醇溶液水解、七氟丁酰基咪唑衍生,气相色谱-质谱法选择离子监测(SIM)模式分析,内标法定量。结果表明,两种化合物在10~400μg/L范围内线性关系良好,相关系数R2>0.999,方法检出限均为0.003 mg/kg,定量限均为0.01 mg/kg;在3个加标浓度水平下的平均回收率为95.8%~115.7%,精密度试验结果的相对标准偏差(RSD)为1.9%~2.2%。该方法简便、快速、准确、灵敏度高,能够满足婴幼儿配方乳粉中氯丙醇酯快速检测的要求。

钒钼黄分光光度法检测液态特殊食品中磷含量的优化

目的建立钒钼黄分光光度法检测低磷含量液态婴幼儿配方食品、液态特殊医学用途配方食品等特殊食品中磷含量的分析方法。方法试样经消解,磷在酸性条件下与钒钼酸铵生成黄色络合物钒钼黄,于440 nm测定试样溶液中钒钼黄的吸光度值,并与标准系列比较定量。对3种基质液态特殊食品的磷含量进行测定。结果增大称样量能满足方法准确度和精密度要求;称样量为4 g时,回收率范围为92.4%~107.0%,相对标准偏差为0.8%~3.7%;方法定量限为30 mg/100 g。结论该方法能够准确测定液态配方食品中较低含量的磷,适合液态婴幼儿配方食品、液态特殊医学用途配方食品等特殊食品中磷含量的测定。

QuEChERS-在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱法高通量筛查动物源性食品中的多农药残留

将QuEChERS技术与在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱(GPC-GC-MS/MS)技术结合,建立了动物源性食品中196种农药残留的高通量检测方法。样品经乙腈提取、QuEChERS结合在线GPC净化后,进行GC-MS/MS检测,多反应监测模式(MRM)分析,外标法定量。方法优化了提取溶剂及净化剂类型,实现了目标物的高效提取和基质的有效去除;考察了在线GPC对样品溶液的净化作用。通过研究不同馏分接收时间段内目标物的回收率和基质效应,得出最佳馏分接收时间,实现目标物的有效导入和基质的高效去除,并对QuEChERS-GPC联用技术的优势进行了评价。该方法研究了196种农药的基质效应,其中10种农药表现为中等强度基质效应,4种农药为强基质效应。本研究采用基质匹配标准溶液进行定量,结果表明,196种农药在0.005~0.2 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均>0.996,方法的检出限为0.002 mg/kg,定量限为0.005 mg/kg。向猪肉、牛肉、猪肝3种不同脂肪含量基质的空白样品中添加标准溶液,196种农药在3个加标水平下(0.01、0.05、0.20 mg/kg)的平均回收率为65.3%~126.2%,精密度为0.7%~5.7%。本方法快速、准确、灵敏,适用于动物源性食品中多农药残留的高通量筛查与检测。