肝素在组织工程研究中的应用进展

近年来随着组织工程的迅速发展,肝素在组织工程研究中的应用越来越值得关注。肝素及其衍生物作为组织工程支架材料的成分之一,不仅赋予支架抗凝血、减少血栓的特点,而且可以改善支架的生物相容性和促进种子细胞的黏附、增殖和分化,另外还可作为细胞因子的储库和缓释载体,在组织构建过程中进一步促进种子细胞的增殖、分化和维持细胞表型,为组织的再生创造必要条件。我们对肝素在血管、肝脏、神经、皮肤、骨和软骨等组织工程领域中的应用研究进行了综述。

硅烷化玻璃酸酯在皮肤抗皱剂中细胞水平的功能研究

硅烷化玻璃酸酯复合物(silanol hyaluronate compound,SHAC)是一种透明质酸衍生物。类人胶原和肌肽是当前市场上主流的抗皱成分。本研究将SHAC用于皮肤抗皱剂中,研究其对成纤维细胞的影响。SHAC分别与类人胶原和肌肽复配,作用于体外培养的L929细胞,检测正常细胞的增殖活性和UVB损伤细胞的修复能力。结果表明:(1)肌肽能促进L929细胞的增殖,具有抑制UVB照射细胞引起的氧化损伤的能力。类人胶原蛋白没有明显效果。(2)SHAC分别与类人胶原、肌肽制备复配制剂,均能够显著促进细胞的增殖,抑制UVB照射引起的细胞损伤。SHAC能增强类人胶原和肌肽的功效,在开发皮肤抗皱功能的产品领域前景良好。

MPEG-PLLGA多孔支架制备影响因素研究

采用热致相分离法制备了MPEG-PLLGA(单甲氧基聚乙二醇-聚左旋丙交酯乙交酯)多孔支架。讨论了丙交酯/乙交酯(LA/GA)配比、聚合物质量浓度、预冻温度等因素对支架的孔径、孔隙率和力学性能的影响。结果表明,当聚合物质量浓度为0.03g/mL时,不同n(LA)/n(GA)比的MPEG-PLLGA支架的孔形貌相差较大,而当聚合物质量浓度为0.04g/mL和0.05g/mL时,3种n(LA)/n(GA)比的MPEG-PLLGA支架的孔形貌和孔径没有明显差异,且在相同聚合物质量浓度下,随着n(LA)/n(GA)比升高,所得支架的压缩强度增大;随聚合物溶液质量浓度的提高,3种n(LA)/n(GA)比支架的孔隙率、孔径均呈变小趋势,压缩强度逐渐增大;随预冻温度的降低,所得支架的孔径、孔隙率逐渐变小,压缩强度逐渐增大。

聚谷氨酸的保湿功效及安全性评价

通过CM825型皮肤水分测试仪和皮肤斑贴试验,研究聚谷氨酸的保湿功效及安全性。结果表明:不同分子量和质量分数的聚谷氨酸在保湿特性上差异较大,其中分子量为1 200 k Da的聚谷氨酸在质量分数为0.1%时,保湿效果最好;受试者涂抹该受试物2和4 h后皮肤水分含量的变化率分别为(103.9±0.2)%和(112.2±0.2)%,接近现在广泛使用的保湿剂透明质酸钠的(114.0±0.3)%;皮肤斑贴试验结果表明聚谷氨酸对皮肤安全、无刺激性。

以交联透明质酸钠为支架体外构建组织工程软骨

背景:采用组织工程技术再生和重建软骨是目前修复软骨组织缺损效果最好、最有应用前景的方法。目的:以体外培养的软骨细胞和交联透明质酸钠为支架材料,开发一套体外构建组织工程软骨的完整方案。方法:分离新西兰兔膝关节软骨细胞,制成细胞悬液滴加于交联透明质酸钠支架上,体外复合培养21 d,提取RNA进行RT-PCR检测,制备冰冻切片进行显微观察和免疫组织化学观察。结果与结论:软骨细胞接种于交联透明质酸钠支架材料后,可贴附于支架上生长,并且大量细胞聚集成团,在支架材料的纤维间隙中生长或呈单层细胞附着于支架材料纤维。细胞-支架复合物表达软骨组织特异性蛋白聚糖基因和Ⅱ型胶原α1基因,以及软骨组织特异性蛋白Ⅱ型胶原蛋白,可维持软骨细胞表型。表明培养的细胞-支架复合物在体外培养可形成软骨细胞外基质,有望获得组织工程软骨组织。

细菌透明质酸酶基因工程菌的构建及高效表达

目的将兽疫链球菌透明质酸酶hyl基因在大肠杆菌原核表达系统中高效分泌表达。方法通过PCR方法扩增得兽疫链球菌hyl基因,Xho I和Nco I双酶切后,连入表达载体pET26b(+),并转化入大肠杆菌,经低温异丙基-β-D-硫代半乳糖苷或乳糖诱导表达,DNS法检测胞外透明质酸酶活性。结果成功构建含兽疫链球菌透明质酸酶基因hyl的大肠杆菌基因工程菌株,经IPTG诱导并添加甘氨酸后胞外透明质酸酶活性高达5.3×104 U/mL。结论实现了透明质酸酶在原核系统中的表达,为工业化生产奠定了基础,具有很好的市场前景。

离子凝胶法制备EGF-透明质酸-壳聚糖纳米微球

以透明质酸、壳聚糖为原料,采用离子凝胶法制备载有表皮生长因子(EGF)的纳米微球。通过正交试验设计研究了壳聚糖与透明质酸质量比、三聚磷酸钠用量、CS溶液酸碱度、反应时间等因素对微球形貌、粒径的大小及其分布、Zeta电位值、包封率、释放度等参数的影响。结果表明,纳米微球最佳的制备工艺为壳聚糖与透明质酸质量比3∶1,三聚磷酸钠用量1.5mg,CS醋酸溶液pH值4.0,反应时间3h。